根与芽 基因工程育种技术
基因工程又称重组DNA技术，是指将一种或多种生物的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物(受体)，使受体按人们的愿望表现出新的性状。 基因工程诞生于1972年，在其后几年中由于担心重组生物对环境安全的影响，基因工程技术的发展曾一度受挫。但随着人们对DNA重组所涉及的载体和受体系统进行有效的安全性改造，以及相应的DNA重组实验室设计和操作规范的建立，再加上重组DNA技术的巨大应用潜力的诱惑，重组DNA技术迅速发展，现在，基因工程已成为生物学实验室的一项常规技术，并广泛应用于医药、农业、食品、环保等许多领域。
李光斗品牌营销机构 科学家小时候的故事第一节 基因工程的基本过程和原理
基因工程最典型的操作如图6-1所示一般包括以下三个步骤：
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1．外源DNA的获得与酶切；
2．外源DNA与经同样酶切的载体的连接；
3．连接产物转化受体细胞及阳性转化子的筛选；
图6-1 基因工程的基本过程
由图6-1可见，基因工程操作过程需要以下基本材料：外源DNA(基因)、载体、DNA体外重组用的酶以及宿主细胞。
一、 载体
外源基因导入受体细胞一般都要借助于载体，基因工程中最常用的载体是质粒载体。图6-2所示pUC19就是最常用的载体之一。
图6-2 载体pUC19及其多克隆位点
载体一般含有以下几个基本元件：
网路管理>卞仲耘载体在宿主细胞中要独立存在则应具有独立复制的能力，复制原点又称为复制起始位点(Origin，简称ori)，控制载体复制。不同生物的载体复制原点不同，同一种生物的不同载体拷贝数和稳定性有很大差别，这主要决定于载体的复制原点的性质。图6-2所示的pUC系列载体的复制原点是pAM1的一个突变体，在合适的大肠杆菌宿主细胞中(如大肠杆菌JM109)其拷贝数可达500。整合型载体的复制原点被整合位点的同源序列替代。
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