1、基因工程的先导是？
艾弗里等人的工作证明了DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体
2、不同生物的基因为什么可以连接在一起？
因为所有生物的DNA基本结构是相同的
3、真核生物的基因为什么可以在原核生物体内表达？
（或者原核生物的基因为什么可以在真核生物体内表达？）
所有生物共用一套密码子
4、基因工程育种的原理是什么？具有什么优点？
原理：基因重组 优点：打破了生殖隔离，定向改造生物的性状
5、与DNA有关的酶的比较
名称商业银行法 | 作用部位 | 作用底物 | 作用结果 |
| 霍尔式角度传感器 限制酶 | 磷酸二酯键 | DNA | 将DNA切成两个片段 |
DNA连接酶 | 磷酸二酯键 | DNA片段 | 将两个DNA片段连接为一个DNA分子 |
DNA聚合酶或热稳定DNA聚合酶 | 磷酸二酯键 | 脱氧核苷酸 | 将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端 |
DNA(水解)酶 | 磷酸二酯键 | DNA | 将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸 |
解旋酶 | 碱基对之间的氢键 | DNA | 将双链DNA分子局部解旋为单链，形成两条长链 狭管效应 |
RNA聚合酶 | 磷酸二酯键 | 核糖核苷酸 | 将单个核糖核苷酸依次连接到单链末端 |
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6、限制酶的特点是什么？
一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点上进行切割 7、限制酶不切割自身DNA的原因是什么？
原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
8、DNA连接酶可以连接什么样的末端？
同一种限制酶切割形成的相同的黏性末端
两种不同限制酶切割后形成的相同黏性末端
任意的两个平末端
9、如何防止载体或目的基因的黏性末端自己连接即所谓“环化”？ 可用不同的限制酶分别处理含目的基因的DNA和载体，使目的基因两侧及载体上各自具有两个不同的黏性末端。
10、载体需具备的条件及其作用
绍兴市数字健康服务平台具备的条件 | 作用 |
1、具有一个至多个限制酶切割位点 | 供外源基因插入其中 |
2、能够在受体细胞中进行自我复制并稳定保存 | 目的基因稳定存在且数量可扩大 |
3、具有特殊的标记基因 | 便于重组DNA的鉴定和选择 |
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11、基因工程的基本操作步骤是哪四步？
目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定
12、目的基因的获取方法有哪些？三种方法都需要模板吗？
十万人大会从基因文库中获取目的基因
利用PCR技术扩增目的基因
通过化学方法人工合成
前两种需要模板，从基因文库中寻目的基因时需要用DNA探针利用DNA分子杂交的方法到目的基因；化学方法人工合成不需要模板，只要知道核苷酸序列就行，这是一个纯粹的化学反应
13、CDNA文库和基因组文库的区别？
cDNA是指以mRNA为模板，在逆转录酶的作用下形成的互补DNA。以细胞的全部mRNA逆转录合成的cDNA组成的重组克隆体成为cDNA文库。cDNA文库只包含表达的基因，并且逆转录得来的基因缺乏内含子和启动子、终止子等调控序列豪杰超级解霸3000
基因组文库指的是将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入宿主细胞，进行克隆得到的所有重组体内的基因组DNA片段的集合，它包含了该生物的所有基因。
从两种文库的区别中可以看出，从cDNA文库中筛选出目的基因更加简单易行，而且目的基因不含内含子，可以直接用于基因工程。
14、为什么基因组文库只有部分基因可以进行物种间的基因交流？（知道原因就行，不需要背过）
一种解释是：某种生物的基因组文库包含着这种生物的所有基因,是用限制酶剪切然后连接上运载体导入受体细胞得来的.这种方式不能保证所有的基因都能被限制酶剪切完整,即基因组文库中的所谓基因其实只能够说是DNA片断,这些片断可能正好是一个完整的某基因,也有可能是某基因的一个部分,还有可能包含有几个基因或他们的片断等,在这里,只有那些包含完整基因的片断才能够用于基因交流.所以,基因组文库中的“基因”只有部分能够在物种间进行基因交流
还有一种解释是：基因文库中的DNA,由于内含子、启动子、终止子等调控基因的存在，这些核苷酸序列不像遗传密码一样所有的生物共用因而只有部分没有调控基因的DNA才可进行基因交流.
15、PCR的中文全称、原理、目的分别是什么？
中文全称：聚合酶链式反应 原理：DNA复制 目的：短时间大量扩增目的基因
16、PCR有哪些应用？
PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以扩增，进行比对，所以除了扩增基因工程所用的目的基因，还在古生物学研究，刑侦检测，传染病检测（细菌、病毒类疾病）；诊断遗传疾病；诊断肿瘤等方面有重要的作用
17、PCR的条件？
PCR扩增仪中必须要有的五个要素：模板、dNTP、热稳定DNA聚合酶、引物（2种）、缓冲液，(缓冲液可以给Taq DNA聚合酶提供一个最适酶催反应条件.这个一般不用写出来)，不需要额外加能量。但是PGR需要能量，dNTP并不是DNA的基本单位，但是 dNTP要作为原料加入到延伸链的3`端，与上一个核苷酸形成二酯键，在此过程中同时释放一个焦磷酸PPi（即两个P～P,内含高能磷酸键，也就是说dNTP脱去两个磷酸，形成了脱氧核苷酸），焦磷酸不稳定，极易水解，释放能量产生磷酸，这2个反应互相偶联，也就是说dNTP可以作为原料，又同时提供能量。
PCR的条件可以是：模板、四种脱氧核苷酸、ATP、热稳定DNA聚合酶、引物；
也可以是模板、dNTP、热稳定DNA聚合酶、引物
18、PCR的过程？
变性--退火--延伸
①变性：加热至90~95℃左右，目的基因DNA受热变性链解链为单链,以便它与引物结合；
②退火（复性）：温度降至55~60℃左右,引物与模板DNA单链的相应互补序列配对结合；
③延伸：在70~75℃左右，在DNA聚合酶的作用下, ,以dNTP为反应原料, 从引物起始进行互补链的合成。
19、基因表达载体构建的目的？
①使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。
②使目的基因能够表达和发挥作用。
20、基因表达载体的组成？
目的基因、启动子、终止子及标记基因（还有复制原点）
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