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1. 动物麻醉,颈椎脱臼处死,解剖分离骨组织,置于4%多聚甲醛或者PLP中固定24小时,再由PBS浸泡,4℃存放。
2. 70%乙醇浸润2天,95%乙醇浸润2天,100%异丙醇1天×2次。
3. 二甲苯浸润2天×2次。
4. 标本依次在塑料聚合液1,2,3液中各浸泡3天。 法国社会学
1液:60ml甲基丙烯酸甲酯+35ml甲基丙烯酸丁酯+5ml苯甲酸甲酯+1.2ml聚乙二醇400。
2液:1液+0.4g过氧化苯甲酰。
3液:1液+0.8g过氧化苯甲酰。
陈祖德以上程序均在4℃第28届奥运会
5. 制作瓶底:600ulN,N二甲基-对-苯甲胺加入100ml的3液中,搅拌数分钟,迅速倒入包埋瓶中,放入标本,抽尽空气,4度低温聚合1天。(有专用的小包埋框,只需加0.5ml左右即可,不需抽尽空气) 纳米技术论文
6. 400ulN,N二甲基-对-苯甲胺加入100ml的3液中,搅拌数分钟,迅速倒入包埋瓶中,放入标本,抽尽空气,-20度低温聚合3天。(加满包埋框即可,不需抽尽空气)
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7. 标本完全固化以后,在标本修整仪上进行修整至所需的横断切面。横断面超薄切片,片厚1μm。 (建议:2液、3液中的过氧化苯甲酰和5、6中的N,N二甲基-对-苯甲胺用量为推荐量的1.2-1.5倍,因这两种液体起到催化剂的作用,多加点有利于聚合)