TLR-2、TLR-4、NF-kB在中耳胆脂瘤中的表达及意义 一.目的胆脂瘤型中耳炎是慢性中耳炎的一种常见类型,其主要特征表现为中耳腔内大量增殖的角化鳞状上皮和邻近骨质破坏以,其中骨质破坏是其最主要的特征,能导致严重的颅内、外并发症,威胁患者生命。目前的研究尚未完全阐明胆脂瘤形成的确切机理。本研究旨在分析Toll样受体2(toll-like receptor 2,TLR-2)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR-4)、核转录因子(Nuclear factor-kappa B,NF-kB)在中耳胆脂瘤中的表达及分布,分析TLR-2、TLR-4及NF-kB之间的相关性,探讨TLR-2、TLR-4、NF-kB在中耳胆脂瘤炎症反应过程中的作用。 国宝沉浮录
二.材料与方法本实验收集胆脂瘤型中耳炎病人手术中新鲜标本46例,其中15例胆脂瘤患者术中同时取外耳道正常皮肤,作为正常对照。所取标本经10%福尔马林固定后,制成石蜡切片。采用免疫组织化学技术(S P法)检测TLR-2、TLR-4及NF-kB在中耳胆脂瘤及外耳道皮肤中的表达,并采用计算机图像分析系统对TLR-2、TLR-4及NF-kB染结果进行定量分析。
三.结果1.TLR-2在胆脂瘤组织及正常外耳道皮肤中的表达TLR-2在46例胆脂瘤上皮组织中均呈中等阳性或强阳性反应,表现为棕黄颗粒密布于上皮各层和上皮下基质细胞的胞浆中,包括基底细胞层、棘层、颗粒层、角质层,但阳性细胞的分布范围和频率各有不同,胞核无着。金大奶奶
在15例正常外耳道皮肤组织中仅表达于上皮基底层。2.TLR-4在胆脂瘤组织及正常外耳道皮肤中的表达TLR-4在46例胆脂瘤上皮组织中均呈中等阳性或强阳性反应,表现为棕黄颗粒密布于上皮各层细胞的胞浆中,呈现从基底层向角质层染逐渐增强的趋势,胞核无着。
胆脂瘤上皮下可见成纤维细胞、单核.巨噬细胞、浆细胞、少数为淋巴细胞等散在的阳性细胞。15例正常外耳道皮肤组织中仅上皮基底层有弱阳性表达。3.NF-kB在胆脂瘤组织及正常外耳道皮肤中的表达NF-kB在46例胆脂瘤上皮组织中,NF-kB阳性细胞分布于上皮全层,不同胆脂瘤组织的阳性表达强度不等,多数标本呈强阳性表达;每例标本均有胞浆染,部分标本胞核阳性着。
经济与社会发展研究
胆脂瘤上皮下炎性细胞及血管上皮细胞亦可见散在阳性表达。正常15例外耳道皮肤组织见表皮全层的弱阳性表达,均为胞质表达。4.计算机图像分析系统检测TLR-2、TLR-4、NF-kB灰度值(1)TLR-2在46例胆脂瘤上皮组织中的灰度值为138.61±6.20,在15例正常外耳道皮肤中的平均灰度值为95.64±6.20,两者之间差异有统计学意义(t=20.73,p＜0.05)。
公路排水设计规范(2)TLR-4在46例胆脂瘤上皮组织中的灰度值为140.87±5.23,在15例正常外耳道皮肤中的平均灰度值为100.45±2.88,两者之间差异有统计学意义(t=28.48,p＜0.05)。(3)NF-kB在46例
胆脂瘤上皮组织中的灰度值为155.25±11.72,在15例正常外耳道皮肤中的平均灰度值为95.65±8.12,两者之间差异有统计学意义(t=17.96,p＜0.05)。5.经spearman等级相关分析,胆脂瘤组织中TLR-2与NF-kB之间存在正相关关系(r=0.316,p＜0.05);TLR-4与NF-kB之间存在正相关关系(r=0.389,p＜0.01)。
四.结论1.TLR-2、TLR-4、NF-kB介导慢性炎症反应和免疫应答反应,本研究结果显示TLR-2、TLR-4、NF-kB在胆脂瘤组织中的高表达,提示其在中耳胆脂瘤慢性炎症反应过程中发挥有一定的作用。2.TLR-2感受胆脂瘤炎症微环境病原体表面的PAMPs刺激,经由胞内信号传导通路,活化核因子NF-kB,NF-kB通过对多种基因表达的调控,调控众多炎症介质和细胞因子的表达,参与机体炎症反应。本研究结果显示TLR-2与NF-kB之间存在正相关关系,提示TLR-2与NF-kB可能在中耳胆脂瘤炎症反应过程中有协同作用。四神茶
松江清真寺3.TLR-4感受胆脂瘤炎症微环境病原体表面的PAMPs刺激,经由胞内信号传导通路,活化核因子NF-kB,NF-kB通过对多种基因表达的调控,调控众多炎症介质和细胞因子的表达,参与机体炎症反应。本研究结果显示TLR-4与NF-kB之间存在正相关关系,提示TLR-4与NF-kB可能在中耳胆脂瘤炎症反应过程中有协同作用。
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