HEILONGJIANGMEDICINEANDPHARMACYJun.2018，Vol.41 No.3• 69 •
T L R-9、N F-k B表达的影响①
杨川江，颜玉，姜威，陈刚，韩宇鹏
静电纺丝纳米纤维膜(佳木斯大学附属第一医院消化一科，黑龙江佳木斯154003)
摘要：目的：研究益生菌对溃疡性结肠炎小鼠的作用并探讨其可能存在的作用机制。方法：0只清洁级健康KM小鼠随机分为5组，分别为正常组、模型组、益生菌组、美沙拉嗪组、联合组，每组各10只，正常组给予正常饲养，其余四组使 用4%的DSS水溶液供其自由饮用10d，制备U C小鼠模型，于造模同时给予每天灌胃10d后处死小鼠，剖腹分离结肠组 织，观察各组小鼠的疾病活动指数（DAI)、结肠组织病理学变化，采用免疫组化检测结肠组织黏膜TLR-9、NF-k B的表达。结果：模型组的DAI、结肠黏膜损伤评分明显高于正常组、益生菌组、美沙拉嗪组及联合组，具有显著性差异（P< 0.05)，联合组稍低于益生菌组、美沙拉嗪组，差异具有统计学意义（P< 0.05)，但益生菌组与美沙拉嗪组差异不明显(尸> 0.05)，结肠组织中TLR-9、NF-k B的表达中，模型组明显高于正常组、益生菌组、美沙拉嗪组、联合组，存在显著 差异（P< 0.05)，联合组稍低于益生菌组、美沙拉嗪组，差异具有
统计学意义（P< 0.05)，但益生菌组与美沙拉嗪组差 异不明显（P> 0.05)。结论:TLR-9/N F-k B信号通路在U C的发病中起着重要作用，益生菌对UC模型小鼠具有作用，其作用机制可能与抑制TLR-9、NF- k B的表达有关，益生菌与美沙拉嗪联合优于单药。建设r6
有那样一个下午关键词：溃疡性结肠炎;TLR- 9; NF- k B；信号通路；葡聚糖硫酸钠；益生菌；布拉氏酵母菌；美沙拉嗪
中图分类号：R574.62文献标识码:A文章编号=1008 -0104(2018)03 -0069 -03
溃疡性结肠炎UC(ulcerative colitis)为炎症性 肠病中的一种，其具体发病机制不明确，临床典型症 状以腹痛、腹泻、排黏液脓血便为特点[1]，U C的病 情容易复发，病程较长，迁延不愈，使患者的生活质 量严重下降，需长期药物控制给患者家庭及社会带 来沉重的经济负担，临床较为棘手，现已成为世 界难治性疾病之一，近年来，随着人们生活水平的逐 渐改善，特别是近十来年该病的发病率逐年增加，目前该病的药物主要以5 -氨基水杨酸、肾上腺 皮质激素以及免疫抑制剂为主，这些药物长时间的 应用虽疗效确切，但副作用不容忽视，近年来研究表 明益生菌对U C的取得了较好的效果，但 究其具体机制不明确。目前相关研究表明TLR- 9/ NF- k B信号通路在U C的发病中发挥极其重要的 作用，本实验研究通过DSS诱导的溃疡性结肠炎小 鼠模型，观察益生菌对溃疡性结肠炎模型小鼠的治 疗效果以及结肠组织T LR-9、NF- k B的表达的影 响，探讨益生菌对U C的可能机制，从而为益生 菌对U C的临床提供一定的理论依据。
1材料和方法
1.1材料
清洁级健康6 ~ 8周龄雄性KM小鼠50只，体 质量为18 ~22g，购于哈尔滨医科大学实验动物学 部，许可证号：SCXK(黑）2013 - 001，使用许可证 号:SYXK(黑）2016 -014，常规饲养于佳木斯大学 实验动物中心，饲养条件适宜。葡聚糖硫酸钠DSS (分子量36000 -50000)，购自M P公司，美沙拉嗪 肠溶片（Dr.Falk Parma GmbH)购自深圳康哲药业 有限公司，布拉氏酵母菌（Saccharomyces boulardii，SB，亿活）购自法国百科达公司，T L R-9、NF-kB 免疫组化试剂盒均购买武汉博士德公司。
透明国际组织1.2方法
1.2.1分组：将清洁级健康KM小鼠50只，按照随 机分组原则分为正常组、模型组、益生菌组、美沙拉 嗪组、联合组，共5组。各组小鼠周龄、健康状 况及体重均无统计学差异。
1.2.2模型制备及给药处置：参照文献[2’3]的相关 实验方法制作U C模型，正常组给予自来水饮用，余 4组给予4%的DSS水溶液自由饮用10d建立UC 模型，进行常规饲养，同时在造模的当天开始每天给 予正常组及模型组蒸馏水lm L灌胃，益生菌组给予 布拉氏酵母菌水溶液灌胃，美沙拉嗪组给予美沙拉 嗪水溶液灌胃，联合组给予美沙拉嗪及布拉氏 酵母菌灌胃，相关药物均溶于1毫升蒸馏水中 (
每只小鼠药物剂量为美沙拉嗪0.4g/kg •d，布拉 氏酵母800mg/kg •d)每天观察各组小鼠一般状 况，称取大鼠体重，观察饮食、毛光泽度、大便性状 和便血情况，记录并进行疾病活动指数（DAI)评分。
1.2.3标本处理：0d后将所有小鼠称重，颈椎脱 臼法处死，剖腹分离全结肠，P B S轻柔反复冲洗干 净，分别取病变程度最严重处的结肠组织，纵行剖 开，进行肉眼观察结肠黏膜损伤程度并进行评分，然 后甲醛固定、脱水、石蜡包埋、制备4^m组织切片，
H E染，观察结肠黏膜组织病理学改变。
1.2.4结肠炎症评价：分别采用疾病活动指数、结 肠黏膜损伤评分评价结肠炎症[4]。
亲戚聚会发言图1.2.5 T L R-9、NF - k B免疫组化染及结果判 断：结肠黏膜TLR-9、NF- k B的表达采用SABC免
①基金项目：佳木斯大学科学技术重点项目，编号:Sjz2012 - 15。
作者简介：杨川江（189〜）男，四川巴中人，在读硕士研究生。
重芳烃
通讯作者：颜玉（1963 ~ )女，黑龙江佳木斯人，硕士，主任医师，教授，硕士研究生导师。 E -m ail:yanyul963@163 。
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议