MMP-13、IL-17、NF-k B-p65在多发性骨髓瘤患者血清中的表达及其临床应用价值 邹夏1，吴遥2，刘蜀蓉1
(1.四川大学华西医院血液内科，四川成都610000；2.成都双流国际机场医救中心，四川成都610000)
摘要：目的探讨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素-17(11-17)、核转录因子kppa B-p65(NF-K B-p65.)在多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的表达及其临床应用价值。方法选取2018年10月至2019年9月期间我院收治住院的86例MM患者作为研究对象，依据MM患者人院后的X线检查有无MM骨病，将患者划分为有MM骨病的MM骨病组(58例)和无MM骨病的MM组(28例)；另选取于我院行健康体检正常的人40例作为对照组，对MM患者及对照组的临床资料及血清MMP-13、II-17、NF-KB-p65水平进行分析，探讨血清中MMP-13,IL-17,NF-k B-p65水平在MM及相关骨病临床诊断中的意义。结果MM骨病组和MM组血清MMP-13、II-17、NF-k B-p65水平明显高于对照组，且MM骨病组以上三指标的血清表达水平均高于MM组(P均<0.901)；单因素分析结果显示，MM骨病组与MM组在年龄、CRP 水平、血清MMP-13、血清11-17和血清NF-k B-p65水平方面存在明显差异(P<0.05)；多因素回归分析结果显示，血清MMP-13A7.5pg/mL、血清IL-17>30pg/mL和血清NF-«B-p65>2100pg/mL是MM患者发生骨病的独立预测因素；ROC曲线分析结果显示，血清MMP-13JL-17,NF-KB-p65水平联合预测MM骨病的AUC值明显高于三者单独诊断时的AUC值(P<0.05)；经后，依据MM患者疗效划分为有效组(45例)和无效组(41例)， 发现有效组血清MMP-13、IL-17、NF-k B-p65水平均明显低于无效组(P<0.05)。结论血清MMP-13、II-17、NF-KB-p65水平在MM及相关骨病患者血清中呈较高表达，血清三项指标联合检测对于临床上预测与诊断MM骨病具有较好的应用价值，且可能用于MM临床疗效的评估。
关键词：多发性骨髓瘤；白细胞介素-17；核转录因子kppa B-p65；基质金属蛋白酶-13表达水平
中图分类号:R733.3文献标识码:A
The Expressions and Clinical Application Values of Serum MMP-13, IL-17and NF-k B-p65in Patients with Multiple Myeloma
ZOU Xia1,WU Yao2,LIU Shurong1
(1.Department of Hematology,West China Hospital,Sichuan University,Chengdu610000,China；
2.Medical Rescue Center,Chengdu Shuangliu International Airport,Chengdu610000,China)
Abstract：Objective Toexploretheexpre s ionsandclinicalapplicationvaluesofserum matrixmeta l oproteinase-13 (MMP-13),interleukin-17(IL-17)and nuclear transcription factor kppa B-p65(NF-k B-p65)in patentswth multple myeloma(MM).Methods Atotalof86MM patentswhowereadmi t edtothe hos
ptalfrom October,2018toSeptember,2019wereenro l edastheresearchobjects.Accordngto presence or absence of MM bone disease examined by X-ray after admission,they were divided into the MM bonedseasegroup(58cases)and MM group28cases).Another40healthypeople who underwentphyscalexamnatoninthehosptalwereenro l edasthecontrolgroup.Theclncaldata, andlevelsofserum MMP-13,IL-17and NF-k B-p65in MM patentsandthecontrolgroup were analyzed.Thesgnfcanceofserum MMP-13,IL-17andNF-k B-p65levels ntheclncaldagnossof MM and related bone d seases was explored.Results Thelevelsofserum MMP-13,IL-17andNF-k B-p65in the MM bonedseasegroupand MM group were s gn f cantly h gher than thosein the control group.Also,
DOI：10.11748/bjmy.issn.l006-1703.2021.01.020
收稿日期：2020-09-03；修回日期：2020-10-22
theselevelswerehigherinthe MM bonediseasegroupthanthe MM group(P<0.001).Theresultsof univariate analysis showed that there were significant di f erences in age,levelsofCRP,serum MMP-13, serum IL-17and serum NF-k B-p65between the MM bone disease group and MM group(P<0.05).The results of multivariate regression analysis showed that serum MMP-13not lower than75pg/mL,IL-17not lower than30pg/mL and NF-k B-p65not lower than2100pg/mL were independe
nt predictors of bone diseasesin MM patients．Theresultsof ROC curve analysis showed that the AUC ofserum MMP-13 combined with IL-17and NF-k B-p65for predicting MM bone diseases was significantly higher than those of singlemarkertests(P<005)Aftertreatment,accordingtodi f erentcurativee f ect,patientsweredivided into the effective group(45cases)and ineffective group(41cases).The levels of serum MMP-13,IL-17and NF-k B- p65in the effective group were significantly lower than those in the ineffective group(P<0.05). Conclusion The levels of serum MMP-13,IL-17and NF-k B-p65are highly expressed in patients with MM and tsrelatedbonedseases.Thecombneddetectonofthesethreemarkerssofgoodapplcatonvalue n clncalpredctonanddagnossofMM bonedseases,whch maybeappled nevaluatngclncalcuratve e f ecton MM.
Key words:Multiple myeloma；Interleukin-17 ；Nuclear transcription factor kppa B-p65；Matrix metalloproteinase-13；Expression level
多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种造血系统恶性肿瘤疾病，多发于老年人，且发病率随着年龄的增加而增加［1］.骨髓瘤细胞来源于B 淋巴细胞，并积聚于骨髓，易发生耐药性且恶性程度高，随着疾病的进展常导致患者发生骨痛、病理性骨折、脊柱压缩、脊髓压迫等MM骨病［切。临床研究⑷发现，绝大多数的MM患者可出现MM骨病，并明显造成患者生活质量下降，增加临床难度
及死亡风险，严重影响MM患者的整体效果和生命健康.MM骨病的发生主要与破骨细胞和成骨细胞活性的失衡有关，而破骨细胞活性增强在MM 骨病的发病机制中占有重要作用［5］.白细胞介素-17(interleukin-17,I-17)是 Th17细胞分泌的一种促炎因子6，可通过影响白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6).白细胞介素-leukin-8,IL-8)等炎症因子的表达进一步促进骨髓瘤细胞生长并激活破骨细胞，参与MM的发生和发展.基质金属蛋白酶-13 (matrix metalloproteinases-13,MMP-13)是MMPs家族最早发现的成员，可由恶性浆细胞瘤分泌后直接启动严重的胶原分解，并引起骨破坏性病变，其在血清中的表达可用于骨疾病活动性的评估⑺。核转录因子kppa B-p65(NF-KB-p65)作为调控基因转录的重要因子，可通过调控IL-17等炎性细胞因子的转录、释放而加剧组织的损伤，已被研究证实在MM的免疫和炎症反应中发挥重要的调控作用［8-9］.基于此，本研究通过分析MM患者血清中MMP-13JL-17.NF-k B-p65表达水平，探讨三者在MM中的作用及可能的发病机制，以期为临床骨髓瘤骨病的检测与提供一些理论参考，现报告如下.
材料和方法
1临床资料
选取2018年10月至2019年9月期间我院收治住院的86例MM患者作为研究对象，其中男性48例，女性38例，年龄31~85岁，中位年龄59岁；I 期16例，11期29例，111期41例.纳入标准：①所有患者符合2
017年《中国多发性骨髓瘤诊治指南》中多发性骨髓瘤的诊断标准［10］；②年龄>18岁、初诊为MM患者；③入院后均接受MMP-13.I L-17.NF-k B-p65血清学检测、X线等影像学检查明确有无MM骨病者;④依据2017年《中国多发性骨髓瘤诊治指南》，完成硼替佐米、地塞米松等4个疗程者；⑤血清标本和临床资料完整者。排除标准：①备孕期、妊娠期或哺乳期妇女；②合并严重心脑血管、全身感染、免疫性疾病者；③临床资料不完整者.另选取于我院行健康体检正常的人40例作为对照组，均具备血清标本和完整的临床资料者.排除标准：①合并严重肝肾功能障碍、恶性肿瘤者；②全身免疫性疾病者；③严重心脑血管疾病者.对照组中男性25例，女性15例，年龄29~80岁，中位年龄56岁，两组性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性.依据MM患者入院后的X线检查有无MM
骨病，将&6例入组患者划分为有MM 骨病的MM
骨病组（5&例）和无MM 骨病的MM 组（2&例），对 两组临床资料和血清学检测结果进行回顾性分析。 本研究在获得医院伦理委员会审核批准后进行，研 究内容设计符合《世界赫尔辛基宣言》。
2方法
2.1
—般资料统计通过查询MM 患者的病
草原生态保护补助奖励机制管理信息系统历资料，查阅患者病历，收集患者的一般资料，包括 性别、年龄、体质量指数（body mass index, BMI ）、复
发情况、风湿性关节炎史等。
2.2
血清检查分别在两组患者入院次日清
晨取空腹静脉血，经离心后取上清液冻存送检，采用菏泽地震
双抗体夹心酶联免疫吸附法测定两组患者血清C 反 应蛋白（C- reactive protein , CRP ）、白蛋白水
平以及 血清中MMP-13UL-1 7、NF-k B-p 65水平，检测方法 均严格按照试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司）健康无忧网
说明书进行，由专业实验室人员进行检测。
2.3影像学检查对颅骨、肋骨、颈胸腰椎、肱
骨、股骨及骨盆等部位进行常规X 线摄片，以X 线
片出现骨质疏松、溶骨性改变、病理性骨折或软组织
肿物者诊为MM 骨病，对X 线检查阴性者，予以加
做CT.MRI 等检查。见图1、图2.
注：患者肱骨出现病理性骨折
图2 MM 骨病患者X 线影像
注：可见颅骨多发圆形穿凿样骨破坏
图1 MM 骨病患者X 线影像
2.4 MM 疗效判定 参考2016年国际骨瘤工
作组（IMWG ）疗效判定标准［10］，划分为完全缓解、接 近完全缓解、部分缓解、轻微反应、无变化5
种情况。其中将完全缓解、接近完全缓解、部分缓解 定义为有效，轻微反应和无变化定义
为无效.
3 统计学处理
采用SPSS 20.0软件对实验数据进行分析，计
数资料用%表示，采用X 检验，计量资料用X 士 s 表
示，采用t 检验进行比较，多因素分析采用Logistic 回归模型；通过ROC 曲线分析MMP-13 .IL-1 7、
NF-«B-p 65对MM 骨病的诊断价值，以曲线下面积 （AUC ）>0.7表示诊断价值较好；均以P <0.05提 示为差异有统计学意义.
结 果
1
两组血清中 MMP-13、I L-17、NF-KB-p65 表
达水平比较
结果显示，骨病组和MM 组血清MMP-13、II-17,NF- k B- p 65水平明显高于对照组，且MM 骨病
组血清MMP-13.11-1 7.NF-k B-p 65表达水平均高于
机辅翻译MM 组，差异具有显著统计学意义（P 均<0.901），见
表1.
表1 两组血清中MMP-13、II-1 7、NF-k B-p 65表达水平比较（pg/mL,x ± s ）
脊髓损伤论坛组别
MMP-13
IL-1
NF-KB-p 65
MM 骨病组（n = 58）14.53±2.98a 42.36 ±3.72心2535.1 7 ±161.32心
MM 组（n = 28）
马明龙8.76±2.09a
2 7.92 ±3.93a
2061.30 ± 156.54a 对照组（n=40）6.08±1.4518.51±2.351509. 4±149.26
F 值2243025
685126
5093315
P 值
<0.001<0.001<0.001
注：与对照组比较，a P <0.01；与MM 组比较，b P <0.01
2发生MM 骨病的单因素分析 炎史、白蛋白水平方面比较差异无统计学意义（P>
两组患者在BMI 值、性别、饮酒史、风湿性关节 0.05）, MM 骨病组与MM 组在年龄、CRP 水平、
血
清MMP-13.血清IL-17和血清NF-KB-p65水平方面差异存在统计学意义（P<0.05），见表2。
表2两组患者发生MM骨病的单因素分析
项目MM骨病组（n=58）MM组(n=28)X值P值年龄（岁）<507(12.07)19(67.86)27.864<0901
>5051(87.93)9(32.14)
BMKkg/m2)<189(15.52)2(794)19920951
18〜2426(44.83)14(50.00)
>2423(39.66)12(42.86)
性别（例/%）男32(55.17)16(57.14)0.0300963
女26(44.83)12(42.86)
饮酒史（例/%）有25(43.10)11(39.29)09130.737
无33(56.90)17(60.71)
风湿性关节炎史（例/%）有19(32.76)6(21.43)19760978
无39(67.24)22(78.57)
CRP(mg/dL)<3924(41.38)18(64.29)39660.046
>3934(58.62)10(35.71)
白蛋白（g/L）<3535(60.34)11(39.29)39660967
>3523(39.66)17(60.71)
血清MMP-13(pg/mL)<7.511(18.97)22(78.57)28971<0901
>7.547(81.03)6(21.43)
血清IL-17(pg/mL)<3013(22.41)20(71.43)19984<0901
>3045(77.59)8(28.57)
血清NF-k B-p65(pg/mL)<210017(29.31)19(67.86)119290901
>210041(70.69)9(32.14)
3两组患者发生MM骨病的多因素Logisitic 回归分析
以是否发生MM骨病作为因变量，将单因素中差异存在统计学意义的因素（年龄、CRP水平、血清MMP-13.血清IL-17和血清NF-k B-p65水平）作为自变量，并进行赋值，年龄（<50岁=0，上50岁=1）、血浆CRP水平（<3.1mg/dL=0，上3.1mg/dL=1）、血清MMP-13水平(<7.5p g/mL=0,>7.5pg/mL=1)、血清IL-17水平(<30pg/mL=0,$30pg/mL=1)、血清NF-k B-p65水平(<2100pg/mL=0,>2100pg/ mL=1)，并将其纳入Logisitic回归模型中，结果显示血清MMP-13>7.5pg/mL.血清IL-17>30p g/ mL和血清NF-K&p65>2100pg/mL是 MM患者发生骨病的独立预测因素，见表3。
表3影响PTC发生的多因素Logisitic回归分析
因素0值SE Wald P值OR值95%CI MMP-13>7.5pg/mL 1.0930.4368.7950903 3.044 1.550—8.564 IL-17>30pg/mL1905098489810904 3.019 1.422—6.409 NF-kB-p65>2100pg/mL0.0960.411 4.7530.030 2.450 1.095〜5.482
4单项指标预测与联合预测的ROC曲线分析
ROC曲线分析结果显示，血清中MMP-13JL-17. NF-k B-p65水平单独预测MM骨病的ROC曲线下面积分别为0.749.0.717和0.823，联合预测MM骨病的ROC曲线下面积为0.880，高于以上三个指标单独预测MM骨病的ROC曲线下面积（P<0.05），其中联合预测时以MMP-13、IL-17、NF-k&p65三个指标同时为阳性时判定为联合预测阳性；且血清MMP-13.IL-17.NF-k B-p65水平单独预测MM骨病时的截断值分别为：12.496pg/mL、32.599pg/mL 和2152.30pg/mL，见图3、表4。
表4各种检测方法的ROC曲线AUC值
指标AUC值SE P值截断值(pg/mL)95%CI MMP-130.7490253<020112.4960244〜0253 IL-170.71702570201322990205〜0228
NF-k B-p6502230250<02012152.300.724〜0221联合诊断02800240<02010203〜0257
5不同疗效MM患者的血清MMP-13、例患者无效，为无效组.有效组血清MMP-13.
IL-17、NF-KB-p65水平比较IL-17、NF-k B-p65水平均明显低于无效组，差异有经，45例MM患者有效，为有效组；41统计学意义（P<0.05），见表5.
表5不同疗效MM患者的血清MMP-13、II-17、NF-k B-p65水平比较（g/mL）组别MMP-13IL-17NF-k B-p65有效组（n二=45)823士1.472622±220170621士154.13
无效组（n二=41)1029±2263024±223198727±12823 t值511360099130
P值<0201<0201<0201
讨论
MM是骨髓内浆细胞异常增生的一种恶性肿瘤，临床上近2/3患者存在骨质破坏、高钙血症、病理性骨折等骨病，严重影响患者预后及生存质量［1112］.MM患者发生骨病后由于起病隐匿，临床表现复杂多样、且缺乏特异性，部分骨皮质未受侵犯的骨病不能在X线片上清晰显示，影响MM骨病的早期诊断和MM的［3.因此，积极寻求可靠且敏感性较高的MM骨病预测指标对于控制MM病情发展并改善患者预后具有重要的临床意义.已有学者在文献中指出,MMP-13JL-17均与MM骨病的发生密切相关，是MM诊断和预后的重要参考因子.同时,NF-k B-p65水平与MM的发生具有密切关系,NF-KB-p65作为NF-k
B的主要效应因子，可能通过激活下游炎症信号，与MMP-13和IL-17一起参与MM的发生与发展［15-16］.
本研究结果显示，骨病组和MM组血清MMP-13JL-17.NF-k B-p65水平明显高于对照组，且MM骨病组血清MMP-13、IL-17、NF-k B-p65表达水平均高于MM组，可见MMP-13.JL-17.NF-k B-p65在MM患者血清中呈较高表达；同时MM患者发生骨病的单因素分析结果显示，骨病组与MM组在年龄、CRP水平、血清MMP-13.血清IL-17和血清NF-KB-p65水平方面存在明显差异，提示MMP-13. IL-17、NF-k B-p65表达水平可能与MM及MM骨病的发生发展有关。张慧等［7］在其研究报告中亦得出类似的结果。在进一步的多因素分析结果中，本研究发现血清MMP-13>7.5pg/mL.血清IL-17>
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议