第三章
1、病毒的一般大小如何？与原核生物和真核生物细胞有何大小上的差别？最大的病毒和最小的病毒（不计亚病毒因子）是什么？ 答：①它们的直径多在100nm(20~200nm)上下；
②病毒、细菌和真菌这3类微生物个体直径比约为1:10:100 ③最大：400nm的拟菌病毒和另一种海洋原生动物病毒 最小：环形病毒科的猪圆环病毒（PCV）和长尾鹦鹉喙羽病毒(PBFDV)。
16、什么是溶源菌，它有何特点？如何检出溶源菌？
答：①溶源菌是一类被温和噬菌体感染后能相互长期共存，一般不会出现迅速裂解的宿主细胞。 ②溶源性的特点：a自发裂解
③将少量溶源菌与大量的敏感性指示性菌（遇溶源菌裂解后所释放的温和噬菌体的大肠杆菌）相混合，然后与琼脂培养基混匀后倒一个平板，经培养后溶源菌就一一长出菌落。由于溶源菌在细胞分裂过程中有极少数个体会引起自发裂解，其释放的噬菌体可不断侵染溶源菌周围的指示菌菌苔，于是就形成了一个个中央有溶源菌的小菌落，四周有透明圈围着的这种特殊溶源菌。
20、用发酵的纯菌做两组平板(都要那种长成菌苔的)，其中一组加入合适浓度的发酵液，另一组加入同浓度的新鲜培养基或未染噬菌体的发酵液，培养一段时间后观察，若出现空白斑，则为有噬菌体
广州双食记
或者：噬菌体有烈性的和非烈性噬菌体。烈性的噬菌体侵染细菌后会快速造成细菌菌体裂解，培养液呈现清凉透明有破碎残渣。非裂解性的可以铺顶层琼脂板（可以查阅噬菌体滴度的测试实验方案），培养后看顶层琼脂层中有没有噬菌斑，也可以在底层培养基中加些IPTG/X-gal若噬菌体带有lacZ的还有蓝白斑筛选的作用（如M13KE的噬菌斑显现蓝斑）。不知道你的菌是否是抗性菌，可以些XL1-blue（Tet抗性）加抗性培养一段时间到对数期再接种你认为有噬菌体污染的样品（非Tet抗性）后铺顶层琼脂培养查看噬菌斑。重大危险源辨识2009
M13噬菌体侵染细菌一般需要细菌带有F-pilus（性菌毛）才可以介导噬菌体的侵染过程。这一类的雄性菌比如TG1、XL1-blue等。
21、预防噬菌体污染的措施主要有：
水处理控制系统
（1）决不使用可疑菌种 认真检查斜面、摇瓶及种子罐所使用的菌种，坚决废弃任何可疑菌种。
（2）严格保持环境卫生。
（3）决不排放或随便丢弃活菌液 环境中存在活菌，就意味着存在噬菌体赖以增殖的大量宿主，其后果将是极其严重的。为此，摇瓶菌液、种子液、检验液和发酵后的菌液绝对不能随便丢弃或排放；正常发酵液或污染噬菌体后的发酵液均应严格灭菌后才能排放；发酵罐的排气或逃液均须经消毒、灭菌后才能排放。
（4）注意通气质量 空气过滤器要保证质量并经常进行严格灭菌，空气压缩机的取风口应设在30～40米高空。
（5）加强管道及发酵罐的灭菌。
（6）不断筛选抗性菌种，并经常轮换生产菌种。
（7）严格执行会客制度。
如果预防不成，一旦发现噬菌体污染时，要及时采取合理措施。例如，①尽快提取产品，如果发现污染时发酵液中的代谢产物含量已较高，即应及时提取或补加营养并接种抗噬菌体菌种后再继续发酵，以挽回损失；②使用药物抑制，目前防治噬菌体污染的药物还很有限，在谷氨酸发酵中，加入某些金属螯合剂（如0.3～0.5％草酸盐、柠檬酸铵）可抑制噬菌体的吸附和侵入；加入1～2μg／ml金霉素、四环素或氯霉素等抗生素或0.1～0.2％的“吐温60”、“吐温20”或聚氧乙烯烷基醚等表面活性剂均可抑制噬菌体的增殖或吸附；③及时改用抗噬菌体生产菌株。
第四章
1、试以能源为主、碳源为辅对微生物的营养方式进行分类，并举例说明之。
有机物：化能异养微生物（绝大多数原核生物，全部真菌和原生动物）
化学物质（化能营养型）﹛
能源﹛ 无机物：化能自养微生物（硝化细菌、硫化细菌、铁
细菌、氢细菌、硫磺细菌）中国儿童网
光能自养微生物（紫硫细菌、蓝细菌、绿硫细菌、藻类）
辐射能（光能营养性）﹛
光能异养微生物（红螺菌科的细菌）
2、什么是自养微生物？它有几种类型？试举例说明。
答：自养微生物是能以CO2为主要或唯一碳源。自养微生物一般分为光能自养型（有光和素能进行光合作用）例如：蓝细菌 和 化能自养型（利用化学能，将二氧化碳等无机物合成自身需要的有机物）例如：硝化细菌。
7、什么是水活度？它对微生物的生命活动有何影响？对人类的生产和生活实践有何关系？
定义：是一个比渗透压更有生理意义的物理化学指标，它表示在天然或人为的环境中，微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。
影响：水活度过低时，微生物生长的迟缓期增长，比生长速率和总生长速率减小，微生物不同，其最适生长的水活度不同，一般而言，细菌生长最适水活度较酵母菌和霉菌高，而嗜盐微生物生长最适水活度则较低，生长繁殖在水活度高的微生物代谢旺盛，在水活度低的范围内生长的微生物抗逆性强，了解各类微生物生长的水活度，不仅有利于设计培养基，而且还能对防止食物霉腐具有指导意义。 8、试述通过基因移位运送营养物质的机制。
答：定义：基团移位指一类既需特异性载体蛋白的参与，又需耗能的一种物质运送方式，其特点是溶质在运送前后会发生分子结构的改变。广泛存在于原核生物中。主要用于运送各种糖类、核苷酸、丁酸、腺嘌呤等物质，特点是每输入一份子葡萄糖分子就需要消耗一个ATP的能量。机制：在大肠杆菌中，主要靠磷酸转移酶系统（PTS）即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸转移酶系统。（1）热稳载体蛋白（HPr）的激活：细胞内的高能化合物—磷酸烯醇式丙酮酸的磷酸基团通过酶I的作用把HPr激活；（2）糖经磷酸化而进入细胞内：膜外环境中的糖分子先与细胞膜外表面上的底物特异蛋白—酶IIc结合，接着糖分子被由P～HPr→酶IIa→酶IIb逐级传递来的磷酸基团激活，最后通过酶IIc再把这一磷酸糖释放到细胞质中。高炉炼铁原理
9、微生物细胞内各种成分间有一较稳定的比例。因此，在大多数为化能异样微生物配置的培养基中，除水分外，碳源（兼能源）的含量最高，其后依次是氮源、大量元素和生长因子。为便于记忆，可以认为，它们间大体上存在着10倍序列的递减趋势，即：
要素：H2O＞C 能源＞N源＞P、S＞K、Mg＞生长因子
含量：10－1 10－2 10－3 10－4 10－5 10－6
苯丙氨酸解氨酶
11、设计培养基的4个原则、4个方法是什么？你能提出一个更好的原则和方法
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