廖明凤
matlab
张明霞邓益邓永聪高伟良余卫业陈心春周伯平
【摘要】目的
通过检测结核病患者血浆及胸水中白细胞介素6（IL-6）的浓度变化情况，探讨IL-6与结核菌感染的临床转归、疾病严重程度的关系。方法 用ELISA 法检测30例健康体检者、
30例潜伏感染者、30例活动性患者、20例结核性脑膜炎患者及20例结核性胸膜炎患者血浆和胸水中的IL-6的浓度。结果患者血浆中IL- 6水平明显高于健康对照组及结核潜伏感染者（P ＜0.01，
P ＜0.01）；结核性胸膜炎患者血浆中IL-6水平明显高于患者（P =0.0029）；结核性胸膜炎患者胸水中的IL-6显著高于相应血浆中IL-6水平（P ＜0.0001）。结论IL-6与结核菌感染的临床转归、结核病严重程度相关，是
局部病灶炎症反应的重要作用因子。
【关键词】白细胞介素6；；结核性脑膜炎；结核性胸膜炎
The interleukin-6in plasma /pleural fluid and the clinical significance in Patients with Tuberculosis LIAO Ming-feng 1，2，3
，ZHANG Ming-xia
1，2，3
，DENG Qun-yi
1，2，3
，DENG Yong-cong
1，2，3
，GAO Wei-liang
1，2，3
，SUN Yan-zhi 1，2，3
，YU Wei-
ye
1，2，3
，CHEN Xin-chun
1，2，3
，ZHOU Bo-ping
1，2，3
1
Shenzhen Key Laboratory for Diagnosis and Treatment of Infectious Dis-eases 518020，
China ；2
ShenZhen Third People's Hospital 518020，China ；3The Affiliated Shenzhen Third Hospital ，
Guangdong Medical College 518020，China
【Abstract 】Objective
ept
To investigate the concentration of the cytokine IL-6in plasma and pleural fluid of TB patients ，and the re-lationship between IL-6and the prognosis of Mycobacterium tuberculosis infection and the severity of active TB disease．Methods
The
concentration of IL-6in plasma of 30healthy donors （HD ），30individuals with latent tuberculosis infection （LTBI ），30patients with pul-monary tuberculosis （PTB ）and 20patients with tuberculous meningitis （TBM ）was determined by ELISA．IL-6in cohort plasma and pleural fluid （PF ）from 20patients with tuberculous pleurisy （TP ）was also determined．Results
The concentration of IL-6in PTB was significant-ly higher than that in HD and in those with LTBI （P ＜0.01，P ＜0.01）；IL-6production was significantly higher in patients with TBM than those with PTB （P =0.0029）；IL-6production was significantly increased in pleural fluid than that in plasma
（P ＜0.0001）．Conclusions It demonstrated that increased IL-6is associated with the prognosis of Mycobacterium tuberculosis infection and the severity of active TB disease ；IL-6was one of the important inflammation cytokine in the site of infection．
【Key words 】interleukin-6；pulmonary tuberculosis ；tuberculous meningitis ；tuberculous pleurisy
基金项目：国家自然科学基金项目（编号：30872258）；国家十一五科
技重大专项（编号：2008ZX10003-012）作者单位：518020
广东深圳，深圳市传染病诊治技术重点实验室，深圳市第三人民医院，广东医学院附属深圳第三医院
通讯作者：陈心春，
E-mail ：chenxinchun@hotmail．com 结核病依然是当今世界最厉害的疾病杀手之一，每年约实体经济
300万人死于结核病，但其发病机制目前还不十分清楚。传统的观点认为结核病的发生是机体Th1细胞免疫功能不足造成的。但是人体抗结核菌免疫极其复杂，没有完整的理论可以解释，这就需要我们在众多免疫因素中继续探索。白介素-6（IL-6）生物学功能多样性，有前炎症因子和抗炎因子两种角， 在机体的免疫调节、炎症反应等过程中均发挥重要的作用。国外已有研究发现，结核病人IL-6水平有不同程度的升高，只有少量研究IL-6与结核病的严重程度［2］及与结核病活动与否的关系
香港历史
［3］
，国内还尚无相关报道。本研究通过检测结
核病患者外周血和胸水中IL-6的水平，探讨IL-6与结核菌感染的临床转归、疾病严重程度的关系。材料与方法
一、研究对象
1结核病人（TB ）jnc录音笔
30例病人（PTB ），其中男23
例，女7例，年龄16 78（平均37）岁；30例结核性胸膜炎病
人（TP ），
其中男11例，女9例，年龄18 60（平均30）岁；20例结核性脑膜炎病人（TBM ），其中男17例，女3
例，年龄17 60（平均33）岁。以上人诊断标准参照中国卫生部《结核
病临床诊疗指南》，病例确诊依据临床表现；痰、胸水、脑脊液结核菌涂片及培养、
TB-DNA ；胸片；胸水、脑脊液常规及生化；胸膜活检；病人结核抗体（TB-Ab ）；PPD 皮试；结核特异性IFN-γELISPOT ；抗结核药物有效等。
2健康对照组及潜伏感染者从常规体检中筛查出健
康成人60例，
既往无结核病史，其中根据先前建立的结核特异性IFN-γELISPOT 技术分为潜伏感染者（LTBI ）30例，其中
男13例，女17例，年龄24 72（平均33）岁及真正意义上完
全健康者（HD ）30例，
其中男11例，女19例，年龄21 64（平均30）岁［4］
。
以上研究对象来源于深圳市第三人民医院结核病区及体检中心。结核病人均排除合并糖尿病、其他自身免疫性疾病及HIV 感染；尚未开始抗结核。研究中组为单纯患者，病情属于轻症结核病；结核组胸水及血液标本在抗结核之前收集。本项目研究遵循深圳市人体试验委员会所制定的伦理学标准并得到批准，所有研究对象均知情同意参加本项目研究。
二、标本收集所有研究对象用肝素锂抗凝管采集清晨空腹静脉血5ml ，离心分离血浆，选择无溶血、无混浊标本分
7
171临床肺科杂志2010年12月第15卷第12期
装于EP管中存于－30ħ冰箱中保存统一检测；结核性胸膜炎病人用肝素锂抗凝管收集胸水5ml，离心取上清，同样方法保存统一检测。
三、IL-6的检测用双抗体夹心ELISA法检测IL-6，试剂盒购于美国R＆D公司，操作严格按试剂盒说明书进行，用酶标仪在450nm处读吸光度值，并依照标准绘制标准曲线，计算IL-6浓度值。
四、统计学方法所有的统计检验均使用Prism3.0（GraphPad），健康对照、潜伏感染及多个组间的差异用单因素方差分析Newman-Keuls多重比较试验；血浆及胸水中差异用配对t检验；与
结核性脑膜炎两组之间的差异用非配对t检验析。P＜0.05为差异有统计学意义。
结果
一、健康对照、潜伏感染及患者血浆IL-6浓度比较患者（PTB）与健康对照（HD）比较，血浆IL-6浓度分别为3.26ʃ2.69pg/ml、0.95ʃ0.62pg/ml（P＜0.01）有明显差异；患者（PTB）与潜伏感染（LTBI）比较，血浆IL-6浓度分别为3.26ʃ2.69/pg/ml、0.67ʃ0.42pg/ml（P＜0.01），差异有统计学意义；健康对照（HD）与潜伏感染（LT-BI）两组间差别无统计学差异（P＞0.05）。
二、与结核性脑膜炎组血浆IL-6浓度比较结核性脑膜炎患者（TBM）与患者（PTB）比较，血浆IL-6浓度分别为16.36ʃ7.69/pg/ml、3.26ʃ2.69pg/ml（P=
0.0029），差异有统计学意义。
三、结核性胸膜炎患者胸水与相应外周血IL-6浓度比较结核性胸膜炎患者胸水（PF）与相应的血浆（Plasma）比较，IL-6浓度分别为11217ʃ2518pg/ml、14.45ʃ7.16pg/ml（P＜0.0001），差异有统计学差异。
讨论
IL-6是重要的抗炎及致炎因子，通过调节机体感染、损伤免疫反应影响多种疾病的发生及进展。有研究发现抗IL-6作用可以作为疾病的新策略［5，6］，其中人工的抗人IL-6受体抗体Tocilizumab，能特异识别人IL-6受体并且抑制IL-6的作用，在临床实验中显示出能够对抗类风湿性关节炎的疾病过程［7］。结核菌感染是一种慢性炎症性过程，IL-6在结核病中的作用也已做了研究进行探讨，发现有低热、纳差、乏力等临床症状的活动性结核患者其体内IL-6的水平升高［8］；随着正规抗痨的进程，结核病人IL-6水平逐渐下降［3］并且IL-6水平的高低与结核病病情的严重程度有关，临床表现越严重其体内IL-6水平也越高［2］。然而这些研究分别都只是针对单一因素，而胸水中IL-6水平还未曾探讨过，因此尚缺完整系统的资料探究IL-6与结核菌感染的临床转归、疾病严重程度的关系。
人体接触结核菌后有三种结局：无感染状态（结核菌完全清除）；潜伏感染；活动性结核病。这三种状态是由人体抗结核菌免疫反应决定的，潜伏感染在机体免疫改变的情况下可以向活动性结核病发展，结核病被认为是机体对结核菌免疫失败的结果。分析比较健康对照、潜伏感染及患者三组人血浆IL-6浓度，得到的结论是活动性患者体内IL-6浓度较健康对照及潜伏感染两组人均升高，差异有统计学意义（P＜0.01，P＜0.01），这与以前的研究，结核病人体内IL-6的水平升高并且活动性结核病要高于潜伏感染的结果是一致的［3，8］。因此，IL-6与机体感染结核菌的临床转归密切相关。
活动性结核病不同的人临床症状表现差异很大，从轻症结核至重症结核不等，这主要是决定于机体的
免疫反应。结核性脑膜炎是重症结核一种临床表现，本项目结核性脑膜炎患者比患者（轻症）血浆中IL-6浓度高，差异有统计学差异（P=0.0029），这证实了以前的相关研究，严重程度越高的结核病其IL-6浓度越高，IL-6很可能是通过影响了机体的免疫－内分泌系统，导致抗结核感染免疫环境的紊乱［2］。由此可见，IL-6对结核病的严重程度起了一定的作用。
结核性胸膜炎患者其胸膜腔作为一个感染病灶，有大量的抗原聚集，炎症反应较为强烈，曾有研究发现结核性胸膜炎患者血浆中的IL-6较患者高［9］。直接来源于胸膜腔的胸水是炎症活动渗出的结果，更能反应炎症程度。我们平行的比较了结核性胸膜炎患者胸水及血浆中IL-6浓度，发现胸水IL-6浓度比相应的血浆IL-6浓度升高，差异有统计学差异（P＜0.0001）。局部感染病灶更高的IL-6浓度，这一现象更能推测IL-6在结核病中发挥了炎症损伤作用，IL-6主导的免疫环境利于结核病发展。
因此，IL-6与结核菌感染炎性损害有密切关系，有望为结核菌的提供一个新的靶点，同时IL-6水平可作为判断结核病病情严重程度的指标并可为结核患者判断预后及评价疗效提供依据。
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［收稿日期：2010－04－01］
8171临床肺科杂志2010年12月第15卷第12期
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