海峡药学2621年第33卷第1期
甘加明，黄丹，林婷婷（广东省药品检验所，广东广州516663）
摘要：目的测定瑞格列奈在不同pH溶液中的平衡溶解度及其在正辛醇-水系统中的油水分配系数，为瑞格列奈动力学性质、新剂型设计和生物药剂学分类提供依据。方法采用摇瓶-高效液相谱法分别测定瑞格列奈在不同pH溶液中的平衡溶解度和正辛醇-水/缓冲液体系中的油水分配系数。结果在37t下，瑞格列奈在pH为00、2.6、3.0、4.6、5:6、6.8缓冲液和水中，平衡溶解度分别为6.599、0.81、0.082、0.01、0.609.0.061和0.015mg-mL-，平均油水分配系数分别为0.9、1.7、2.7、3.4、3.6、2.9和2.6。结论瑞格列奈为低溶解性，脂溶性好的药物，而且其平衡溶解度和油水分配系数与pH密切相关，本研究可以佐证其属于生物药剂学（BCS）分类系统中的H类药物。 关键词：瑞格列奈；平衡溶解度；油水分配系数;HPLC
中图分类号:R94文献标识码:A文章编号：1007-3775（20210-01-0618-03
Eff e cl of pH Value on EquiliOrium Solubility and Oil Wataa Partitinn Coefficient of RepagUnide
GAN Jin-ming,HUANG Dan,LIE Ting-dng(Guangdong Institute for Durg Contral,Guangzhou516663,Chi-na
ABSTRACT：OBJECTIVE Tv determine the epuiliChum solubilite of repagliniCe in solution with differeui pH coniitions and Cs oil watea pahition coefficieut in i-3ctaiot-Natea system,so ns io proviCe the basis for-he kinetic properties of reuayliniCe,the design of new dosage forms and the classification of Biolopicai Pharmaceutics(BCS). METHODS The epuiliChum soluPiCty of repagliniCe in differeui pH solutions and the pahition coefficieut of oil and watea in n-3ctanot-Nater/Vuffer system were determineU by shaPina flash HPLC.RESULTS At76t, the equi-liChum soluPilita of repagliniCe was6.596,0.81,6.082,0.01,6.009,0.061and6.017mg•mL"1in pH1.6,
2.0 ；1l0 ；7l0 ；5l0 ,6.4buffet solution and watea,and the average oil watea pahition coefficients were0.6,06,2.6,
3.4,3.6,2.9and2.6,reshectiveiy.CONCLUSION RepagliniCe is a drup with low soluPilita and goop fat soluPil-ity, and Cs epuiliChum soluPilita and oil watea pahition coefficient are closeiy relateU to pH.This stuPy can pmva that it belonys to the class H drup in Biolopicai Pharmaceutics(BCS)classification system.
KEY WORDS:Repaglinide；Euuilinrium solubility;Oii watea partition coefficient；HPLC
瑞格列奈（RepagUnide）属于新型短效非磺酰脲类短效口服促胰岛素分泌降糖药，是第一个用于H型糖尿病的餐时血糖调节剂⑴，主要用于饮食控制、降低体重与运动不能
有效控制高血糖的H型糖尿病，与二甲双胍合用对控制血糖
有协同作用。瑞格列奈，临床使用“R-异构体”，其化学名（S）-2-乙氧基CN2-〔〔3冲基NC4-（3基）苯基〕丁基〕
氨基〕-2-乙氧基〕苯甲酸；分子式:C07H36N3O4；为白或类白结晶性粉末，无臭，具有多晶型，在水中几乎不溶，溶解性差是限制该药制剂研究的主要难点之一〔切。研究药物在不同
生理pH条件下的溶解度和油水分配系数可以预测药物在体内的吸收、分布、代谢情况⑺，药物具有适宜的溶解性和脂溶
性既有利于药物在机体体液中运转，又可以快速扩散并透过生物膜，从而到达作用部位。因药物的理化性质与其生物膜的渗透性存在着相关性，所以这种相关性有助于预测药物动
作者简介：甘加明，职称：药师，主要从事药品质量标准研究。力学性质，并为剂型设计提供指导意
义4-。但目前尚无测定瑞格列奈的油水分配系数和平衡溶解度的文献报道，本文旨在通过采用摇瓶法〔■讪和HPLC法测定瑞格列奈在不同pH 值条件下的平衡溶解度和油水分配系数来推测瑞格列奈的体内吸收过程，并为其剂型开发设计提供理论支撑。
1仪器与试药
1.1仪器SHIMADZU高效液相谱仪（RF-24A荧光检测器DAD）,METTLER XS245电子天平（十万分之一），Sartohus PB-14pH计,Junnc SW20恒温水浴摇床，MILLIPORE超纯水发生器。
1.2试药瑞格列奈原料药（纯度：14.3%），瑞格列奈对照品（来源冲国食品药品检定研究院，批号：104753-241343，含量99.3%）8乙腈、甲醇为谱纯；磷酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氢氧化钠、磷酸二氢钾、正辛醇、盐酸均为分析纯。
2方法与结果
2.1溶液配制
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Strait Pharmaceutical Journal V o I33No.12221
5.41不同pH溶液的配制:①pH40盐酸溶液：取盐酸9 mL，加水适量使成1L，即得;②pH5,0盐酸溶液：取盐酸417 mL，加水适量使成1L，即得；③pH3.0磷酸盐缓冲溶液: 0.025mU•LT柠檬酸溶液，用0.45mU•L"磷酸氢二钠溶液调节pH值至3.0，即得;④pH4,0醋酸盐缓冲溶液：取醋酸钠1.25g，加水适量使溶解，与2mU•L"醋酸溶液20.2mL 混合，加水稀释至1L，摇匀，即得;⑤pH5.0枸椽酸-磷酸盐缓冲溶液：取枸椽酸10.20g，磷酸氢二钠二水合物1812g，加水溶解并稀释至1L，摇匀，即得;⑥pH6,8磷酸盐缓冲溶液：取0.5mU•L"磷酸二氢钾溶液252mL与0.2mcl•L"氢氧化钠溶液112mL混合，用水稀释至1L，摇匀，即得。⑦水：经脱气处理的纯化水
5.42对照品储备液的配制：取瑞格列奈对照品约10mg，精密称定，置20mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。
2.48对照品溶液的配制：精密量取瑞格列奈对照品溶液储备液10mL，置20mL量瓶，加甲醇稀释至刻度，摇匀；再精密量取10mL，置100mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.44原料药溶液的配制：取瑞格列奈原料药约10mg，精密称定，置20mL量瓶中加入甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL置100mL量瓶中加流动相稀释至刻度，摇匀，作为原料药溶液。
2.2谱条件参考USP42-NF38瑞格列奈片溶出度项下谱条件，采用Syncronis C2（150mm X4.6mm,5p m）；以0.15%磷酸二氢钾溶液（用磷酸调pH值至5.8）-甲醇-乙腈（40：11：49）为流
动相；柱温为40T；流速为44mL•mia-；采用荧光检测器，激发波长为244nm，发射波长为348nm；进样体积20p L。
2.3方法学考察本谱条件下，流动相和不同pH缓冲溶液均对瑞格列奈的含量测定无干扰。瑞格列奈浓度（X）在0.104-55.255p g•mL"浓度范围与峰面积（Y）线性关系良好，线性回归方程为Y=1583424.875X+255774.666,r= 0.999。低、中、高浓度（2.615、5.230、10.460p g•mL-）对照品溶液测定结果的RSD分别为0.5%、41%、0.9%，说明本方法精密度良好。平均回收率为99,5%,RSD为0.2%（n= 2）
2.4不同pH值条件下瑞格列奈稳定性的考察精密量取瑞格列奈对照品溶液储备液10mL，置100mL量瓶，用甲醇稀释至刻度，摇匀；再精密量取10mL，置100mL量瓶中，分别用水、pH44、pH5,0、pH3,4、pH4,4、pH5,4、pH6,8缓冲液稀释并定容至刻度，摇匀，置室温下放置，在0h、、h、h、8 h、24h、48h时，分别注入高效液相谱仪，按“2.2”项下谱条件进行测定，记录峰面积，结果显示不同pH条件下，瑞格列奈峰面积的RSD均小于45%，表明在不同pH条件下瑞格列奈在48h内基本稳定。
2.5瑞格列奈在不同pH溶液中的溶解性考察根据《中国药典）2415年版四部凡例中关于药物溶解性判定的相关要求，考察瑞格列奈在不同pH溶液中的溶解性。结果（见表1）。表1瑞格列奈在不同pH溶液中的溶解性
包头医学院学报
北京农大附小
奥特朗托城堡不同pH溶液溶解性
pH1.2微溶
pH2.2几乎不溶
pH32几乎不溶
pH42几乎不溶
pH52几乎不溶
pH6.8几乎不溶
400公里动车组下线
水几乎不溶
2.6瑞格列奈在不同pH溶液中平衡溶解度测定分别吸取不同pH缓冲液和水各5mL，置不同的具塞刻度试管中，加
入过量的瑞格列奈原料药粉末至溶液出现大量不溶性白粉末，超声并间歇振摇10mc使充分润湿后，放入恒温水浴摇床中，于37±0.2T下以240r•min"的转速振摇48h，使形成饱和溶液；静置后取上层溶
液滤过，用流动相稀释后按“42”项下谱条件进行测定并记录谱图；计算瑞格列奈在不同pH缓冲液溶液及水中平衡溶解度，平行测定3次，取平均值。结果（见表2）。
表4不同pH溶液中瑞格列奈平衡溶解度（a=5）
缓冲溶液平衡溶解度（mg•mL-1）
pH1.2 6.576
pH2202810
pH3202082
arxpH4202014
pH5202009
pH6.89.061
水（pH7.2）9.22琼斯模型
由表2可知，瑞格列奈在pH4 0~5.0缓冲液中，其平衡溶解度随着缓冲液pH的增大而减小,pH6,8缓冲液和水中平衡溶解度略有所增大，所以瑞格列奈的平衡溶解度与pH
密切相关。FDA对于药物高溶解性判断标准42：单次给药的最大剂量能溶解在W252mL的pH1.0~7.4的37T水溶液中，即认为该原料药属于高溶解性。根据瑞格列奈片药品说明书得知，瑞格列奈每次最大使用剂量不超过4mg45〕，若假设瑞格列奈属于高溶解性，则其在250mL水溶性介质中的平衡溶解度均应高于0.016mg•mL-，但瑞格列奈在pH4.0、pH5,0缓冲液和水中的平衡溶解度均低于0.016mg•mL-1，故瑞格列奈属于低溶解物。
2.7瑞格列奈油水分配系数的测定
2.7,1水相饱和正辛醇溶液及正辛醇饱和水相溶液的制备：分别量取油相正辛醇和水相pH为40、2.0、
3.0、
4.0、
5.0、
6.8的介质以及纯化水各20mL，置于252mL锥形瓶中，置于（37±0.2）T恒温水浴摇床中以200r•min-1
的转速振摇,48h后停止振摇，静置/离心（5000r•miaT,5min）。分取上层和下层。上层即为不同pH介质的水相饱和的正辛醇
溶液，下层为正辛醇饱和的不同pH介质的水相溶液。
5.2.2不同pH介质的水相饱和正辛醇溶液中药物的初始浓度：分别精密称取瑞格列奈原料药约2mg，置20mL量瓶
-2•
海峡药学2021年第33卷第1期
中，分别用水与其他不同pH介质的水相饱和的正辛醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得到不同pH介质下的瑞格列奈的初始浓度I)。
0.7.3油水分配系数的测定：分别精密量取“2.6.1项下不同pH介质饱和的正辛醇下的瑞格列奈油相溶液1mL，加入相应的正辛醇饱和的不同pH介质溶液，于(37±4.5)t恒温振荡器中以224a•ms"的转速振摇98h后停止振摇，离心(5204a•mh^89mic)，取下层水溶液1mL，按"2.2"项下谱条件测定瑞格列奈分配平衡时在水相中的浓度(Cw)，并根据P=(C5-C”)/C”计算油水分配系数lovP，平行测定3次，取平均值。结果(见表3)。
表3瑞格列奈在37t正辛醇的不同pH溶液中油水分配系数(a =3)
缓冲溶液油水分配系数(UpP)
pH000.9
pH2006
pH30 2.6
pH40304
pH50306
pH68209
水（pH7.0）206
由表3可知，在pH0 4~7.4的介质中，瑞格列奈的lop P
均大于4，说明在瑞格列奈在油相中的溶解度大于水相的溶解度值，表明瑞格列奈具有良好的脂溶性。
随着pH的升高，瑞格列奈脂溶性先增大，后减小；当pH4.4~5.4时油水分配系数处于最大阶段，且该pH值范围与十二指肠且较为相似，故提示瑞格列奈可能主要是在十二指肠内被吸收。综上所述，瑞格列奈脂溶性良好。
3讨论
本文通过采用摇瓶法对瑞格列奈的平衡溶解度和油水分
配系数进行测定，在选定204a•mlc-8的转速下分别振摇10 h、24h、48h后测定不同pH溶液中的瑞格列奈浓度，试验结
果发现振摇43h时均达到基本平衡，故本试验采用224a•ms"的转速振摇43h进行测定。结果表明，该方法简单可行。
药物对生物膜的渗透性与其脂溶性有关，通常用于反映药物脂溶性的两个关键参数是平衡溶解度和油水分配系数,
药物的平衡溶解度是药物在生理pH条件下测定的，是药物吸收的基础；油水分配系数可反映药物的亲脂性和透过生物膜的能力。有文献报道⑴〕正辛醇的溶解度参数与生物膜相同，所以采用正辛醇-水相分配系统测定油水分配系数。
药物进入人体后，尤其是口服固体制剂，通常在胃肠道内崩解、释放，进而被人体吸收进入血液循环，这些过程都与药物本身的水溶性和脂溶性有关。本试验结果表明瑞格列奈的平衡溶解度与油水分配系数与pH密切相关，所以其体内吸收过程亦可能与生理pH相关。胃肠道不同部位的生理pH 不同。一般情况下，胃pHl.4~3.4，十二指肠pH4.4~6.4，空肠pH6.4~7.4〔2-。本文结果表明在pH04~7.4条件下瑞格列奈油水分配系数为4.9~3.0，在整个胃肠道中均能被•20•吸收，在胃中瑞格列奈油水分配系数最小，溶解性最好，所以溶解过程主要发生在胃内；在十二指肠内油水分配系数最大，故提示可能在十二指肠中最易被吸收。
通过对瑞格列奈平衡溶解和油水分配系数的测定本研究佐证了瑞格列奈在生物学药剂学分类系统中属于生物药剂学分析系统(BCS)H类，即低溶解性、高渗透性。BCS H类药物溶解度差，口服后在胃肠道溶出慢，易受食物影响，生物利用度低⑴〕。提高瑞格列奈在生理环境中的溶解性是提高药物的生物利用度的关键，目前改善药物溶解性的技术主要有〔役①B-环糊精包合技术;②固体分散技术;③微乳化和自微乳化技术;④制备成磷脂复合物;⑤超微粉碎技术等都运用到难溶物剂型设计中。结合瑞格列奈的溶解性与生理pH密切相关的特点，选择合适的技术增加瑞格列奈在整个胃肠道的溶解度，提高生物利用度有着重要意义。
参考文献
〔1冉兴无，李秀钧・餐时血糖调节剂-瑞格列奈国外医学(内分泌学分册)9000905)：225-22&
〔2〕张倩，朱余兵•瑞格列奈药效学研究进展〔J〕.中国医药导报, 2013,1(22)：21-23,26.
〔〕穆艳修.瑞格列奈与二甲双肌2型糖尿病的临床效果分析〔J〕.吉林医学,201,40(11)：2593-25941
〔4〕GreX W,Humaps R,Ghss G,et aU RepagliniUc and relate)hypovlyce-mic benzoic vein derivatives[J.8Me)Chem9998,41(26):4219-52460
〔5〕马红玲.瑞格列奈片的处方工艺及质量标准研究〔D〕.中南大学，2030
[6]ReUdy M,Espamian S,TrippapacOva M’d al.Polymorphic forms of
(S)-Pepaglmine and the processes for preparation there of U.S.Patexi Application1/647,249〔P].2003CC5.
〔7〕朱伊婷，陈英杰，夏媛媛，等.甲磺酸普依司他油水分配系数的测定〔〕•广东化工901595(1)：37C5.
〔8〕伍红年，谭诗涵，王元清，等•肉桂酸与桂皮醛的平衡溶解度及表观油水分配系数的测定〔〕•中国药师901891(05)：801-304l 〔9〕GB/T21853-2008化学品分配系数(正辛醇-水)摇瓶法试验〔S〕.
2008.
〔10〕熊婧9长涛9午明哲，等.平衡溶解度实验基本程序和技术要求〔〕•中国药学杂志,2019,52(17)：1349N354•
[11]CDER./wDA.GuiUaacc for Industm:Waivca of in vive Bioavvilabilith
and Bioepuivalexcc StuPics for ImmeUiate-Release Solin Oral Dosage Forms Base)on A BionParmaceutics Classification System〔EB/OL〕.
〔2018-12-05-.6ttp：//w””.ft/gcv/Dmas/GuinadceCompnadce-RequlatomPformatioa/GuiUaaces/6efaulo htm
[12]htty:2/www.dayg ory.ca/6mg/116453
〔1〕杨秀丽，孙进9可仲贵•格列毗嗪油水分配系数和平衡溶解度的测定〔〕•中国药剂学杂志90099(3)：121R20l
〔1〕熊耀坤，梁爽，杜焰，等-HPLC法测定洋川芎内酯I的平衡溶解度和表观油水分配系数〔〕0药物分析杂志，2012，32(09):1644 1047.
〔15〕高会乐，蒋新国•新型药物递释系统的研究进展〔〕•药学学报, 261792(62)：181-188l
〔1〕王丽亮•提高难溶物生物利用度方法研究进展〔〕•继续医学教育,201097(1)：13-14.
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