液质原理简析

液质联用(LCMS)原理简析
1.质谱
质谱分析是先将物质离子化,按离子的质荷比分离,然后测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。质谱的样品一般要汽化,再离子化。不纯的样品要用谱和质谱联用仪,是通过谱进样。即谱分离,质谱是谱的检测器。离子在电场和磁场的综合作用下,按照其质量数m和电荷数Z的比值(m/z,质荷比)大小依次排列成谱被记录下来,以检测器检测到的离子信号强度为纵坐标,离子质荷比为横坐标所作的条状图就是我们常见的质谱图。
2.质谱仪
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质谱仪由以下几部分组成
数据及供电系统
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进样系统离子源质量分析器检测接收器
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真空系统
质谱仪一般由进样系统、离子源、分析器、检测器组成。还包括真空系统、电气系统和数据处理系统等辅助设备。
(1)离子源:使样品产生离子的装置叫离子源。液质的离子源有ESI,APCI,APPI,统称大气压电离(API)源,实验室常用液质的离子源为ESI源。
电喷雾(ESI)的特点
通常小分子得到[M+H]+ ]+,[M+Na]+ 或[M-H]-单电荷离子,生物大分子产生多电荷离子。
电喷雾电离是最软的电离技术,通常只产生分子离子峰,因此可直接测定混合物,并可测定热不稳定的极性化合物;其易形成多电荷离子的特性可分析蛋白质和DNA等生物大分子;通过调节离子源电压控制离子的碎裂(源内CID)得到化合物的部分结构。
(2)质量分析器: 由它将离子源产生的离子按m/z分开。离子通过分析器后,按不同质荷比(M/Z)分开,将相同的M/Z离子聚焦在一起,组成质谱。
质量分析器有:磁场和电场、四极杆、离子阱、飞行时间质谱、傅立叶变换离子回旋共振等。实验室目前液质的质量分析器类型:三重四极杆(QqQ):
离子源→第一分析器→碰撞室→第二分析器→接收器
MS1                      MS2
Q1          q2          Q3
QqQ仪器可以方便的改变离子的动能,因此扫描速度快,体积小,常作为台式进入常规实验室,缺点是质量范围及分辨率有限,不能进行高分辨测定,只能做到单位质量分辨。
在液质联机中使用的碎片化手段,能量都是以碰撞的形式输送
给分子离子,这个能量足以使得处在能量亚稳态分子中的某些
化学键断裂并使一些特定的分子发生结构重排。
(3)碰撞诱导解离CID质谱:
QqQ检测器中的碰撞反应在CID中进行。选择一定质量的离子作为母体离子,进入碰撞室,室内充有靶子反应气体(本实验室选择高纯氦) ,发生离子—分子碰撞反应,从而产生‘子离子’,再经MS2的分析器及接受器得到子离子质谱,一般称做CID (collision-induced dissociation)谱。
(4)检测器:离子检测器由收集器和放大器组成。打在收集器上的正离子流产生与离子流丰度成正比的信号。
(5)真空系统:质谱仪的离子源、质量分析器和检测器必须在高真空状态下工作,以减少本底的干扰,避免发生不必要的离子-分子反应。所以质谱反应属于单分子分解反应。利用这个特点,我们用液质联用的软电离方式可以得到化合物的准分子离子,从而得到分子量。由机械真空泵(前极低真空泵),扩散泵或分子泵(高真空泵)组成真空机组,抽取离子源和分析器部分的真空。只有在足够高的真空下,离子才能从离子源到达接收器,真空度不够则灵敏度低。实验时要注意观察质谱的真空度状态,如有异常,及时向相关老师汇报。市舶司
3. 质谱仪的联用技术
质谱仪可以与其他仪器联用,如气相谱-质谱联用(GC/MS)、高效液相谱-质谱联用(HPLC/MS);也可以质谱-质谱联用(MS-MS)。(1)G C/MS、HPLC/MS仪:
基于谱和质谱的仪器灵敏度相当,加之使分离效果好的谱成为质谱的进样器,而速度快、分离好、应用广的质谱仪作为谱的鉴定器,使它们成为目前最好的用于分析微量的有机混合物的仪器。
(2)液质联用与气质联用的区别:
气质联用仪(GC-MS)是最早商品化的联用仪器,适宜分析小分子、易挥发、热稳定、能气化的化合物;用电子轰击方式(EI)得到的谱图,可与标准谱库对比。
液质联用(LC-MS)主要可解决如下几方面的问题:不挥发性化合物分析测定;极性化合物的分析测定;热不稳定化合物的分析
测定;大分子量化合物(包括蛋白、多肽、多聚物等)的分析
测定;一般没有商品化的谱库可对比查询,只能自己建库或自
产业综合体己解析谱图。 所以目前液质联用在环境领域主要应用于有标准
物质参照情况下的定性分析。
(3)MS-MS:
质谱-质谱法是70年代后期迅猛发展起来的。这种方法是指用质谱作质量分离的质谱技术(mass separetion-mass spectra
characterization)。 它可以研究母离子和子离子的关系,让大的离子进一步裂解,获得裂解过程及离
阿魏酸子组成的信息。它有几种称呼,如质谱-质谱法(MS-MS或MS/MS),串联质谱,二维质谱法,序贯质谱。本实验室的质谱检测器为三重四极杆检测器,属于MS/MS型质谱检测器。
(4)有机质谱局限性:
异构体,立体化学方面区分能力差。风流变形记
重复性稍差,要严格控制操作条件。所以不能象低场NMR,IR 等自己动手,须专人操作。
有离子源产生的记忆效应,污染等问题。
价格昂贵,分析成本高,操作复杂。
4. 质谱仪性能指标
(1)质量范围:即仪器测量质量数的范围。
(2)分辨率:即表示仪器分开两个相邻质量离子的能力,通常用R表示,实验室内的TSQ Quantum分别率为0.7。
(3)质量测量精度:离子质量测定的精度,一般对质量几百的离子,测量误差应<0.003质量单位。
5.基本术语
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(1)质谱图:质谱图一般都采用“条图”,或称为棒状图。在图中横轴

本文发布于:2024-09-21 11:10:20,感谢您对本站的认可!

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