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液相常见6种问题⾊谱峰解决⽅法（有图），你都见过⼏个？
对于每⼀个⾝经百柱的分离纯化研究员来说，液相⾊谱图是他们打开未知物质世界的⼤门，科研中的很多问题都能从⾊谱图中得到很好的反映，有些问题可以通过改变设备参数得到解决，⽽有些问题则必须通过修改操作程序来解决，毕竟，正确选择⾊谱柱和流动相才是得到好的⾊谱图的关键。 1
峰拖尾
1. 筛板阻塞：柱⼦两头的过滤筛板如果堵塞，样品就会在筛板部分受阻⽽形成时间延迟，使得样品在柱后流出时峰型形成拖尾。需要通过反冲⾊谱柱，或者更换筛板。 2. ⾊谱柱塌陷：是指⾊谱柱由于其它原因引起了柱效率丧失，不能对物质形成保留，使得物质不在固定相上保留⽽随流动相流出，但是⼜还有⼀点柱效，因此形成拖尾。需要重新填充⾊谱柱或者更换⾊谱柱。
3. 有污染：即样品不在同⼀起跑线起跑，从后⾯开始跑得到达终点稍晚，表现出拖尾。更换⾊谱柱或者采⽤有机溶剂梯度洗脱1h以上，以冲洗柱⼦。
4. 流动相PH值选择错误：如某PH下有的样品存在分⼦型和离⼦型的动态平衡，离⼦型的陆续向分⼦型转化就会表现出拖尾。调节PH值可抑制分⼦解离，改善拖尾，对于碱性化合物，相对较低的PH值更有利于得到对称峰。
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峰前沿
1. 样品过载：被保留的样品在正常出峰时间前陆续出来，形成前沿峰。降低样品含量。
2. 样品溶剂选择不恰当：当样品溶剂的洗脱能⼒⼤⼤强于流动相时会出现前沿峰，例如，在反相⾊谱中⽤已腈做样品溶
罗马女教皇2. 样品溶剂选择不恰当：当样品溶剂的洗脱能⼒⼤⼤强于流动相时会出现前沿峰，例如，在反相⾊谱中⽤已腈做样品溶剂，⽽流动相的洗脱⼒较弱时会出现前沿峰。选择流动相或者接近流动相的⽐例作为样品溶剂。
3. ⾊谱柱损坏：⾊谱柱柱效损失，不能对物质形成保留。更换⾊谱柱。
4. 在⼤峰前有⼩峰出现，假象前沿峰，即⼤峰前包埋了没有分开的⼩峰。调整流动相洗脱梯度。
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基线漂移
1. 柱温波动：即使是很⼩的温度变化都会引起基线的波动，通常影响⽰差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。使⽤柱温箱，控制好柱⼦和流动相的温度，在检测器之前
使⽤热交换器。
2. 流动相不均匀：流动相条件变化引起的基线漂移⼤于温度导致的漂移。使⽤HPLC级的溶剂，流动相在使⽤前进⾏脱⽓处理。
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3. 流通池被污染或有⽓体：⽤甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以⽤1N的硝酸(不要⽤盐酸)。
4. 流动相配⽐不当或流速变化：更改配⽐或流速，为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。
5. 样品中有强保留的物质：以馒头峰样被洗脱出，从⽽表现出⼀个逐步升⾼的基线。使⽤保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期⽤强溶剂冲洗柱⼦。
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出现宽峰
1.⾊谱柱污染或失效，造成塔板数降低：更换同样类型的⾊谱柱，如果新柱⼦可以提供对称的⾊谱峰，则⽤强溶剂冲洗旧柱⼦。
2.柱⼦与检测器之间的管路太长或管路内径太⼤：更换内径较⼩的短管路。
2.柱⼦与检测器之间的管路太长或管路内径太⼤：更换内径较⼩的短管路。
3.检测器对反应时间或池体积响应过⼤：减少响应时间或使⽤更⼩的流通池。
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基线噪⾳心血漏洞
1. 在流动相、检测器或泵中有空⽓(尖锐峰)：流动相脱⽓，冲洗系统以除去检测器或泵中的空⽓。
2. 漏液：检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪⾳。如有必要，更换泵密封。
3. 流动相混合不完全：⽤⼿摇动使混合均匀或使⽤低粘度的溶剂。
4. 温度影响(柱温过⾼，检测器未加热)：使⽤柱温箱，减少温度差异或加上热交换器。
5. 在同⼀条线上有其他电⼦设备(偶然噪声)：断开LC、检测器和记录仪，检查⼲扰是否来⾃于外部，加以更正。采⽤精密级稳压电源。
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分离度不够
1.流动相梯度洗脱设置不合理：优化梯度洗脱程序。
2.流动相污染或变质(引起保留时间变化)：重新配置流动相。
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3. 保护柱或分析柱阻塞：去掉保护柱进⾏分析，如果必要则更换保护柱；如果分析柱阻塞，可进⾏反冲；如果问题仍然存在⾊谱柱可能被强保留的污染物损坏，建议使⽤恰当的再⽣程序；如果问题仍然存在，进⼝可能阻塞了，更换⼊⼝处的筛板或更换⾊谱柱。
的筛板或更换⾊谱柱。
来源|实验与分析⽹络编辑| 检测公众ID:testbbs
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