动物肝脏中DNA的提取及检测
一、前言
脱氧核糖核酸
脱氧核糖核酸〔DNA,为英文Deoxyribonucleic acid的缩写,又称去氧核糖核酸,是脱氧核糖核酸染体的主要化学成分,同时也是组成基因的材料。有时也被称为"遗传微粒",原因是在繁殖过程中,父代会把它们自己DNA的一部分复制传递到子代中,从而完成性状的传播。
DNA是高分子聚合物,DNA溶液为高分子溶液,具有很高的粘度,可被甲基绿染成绿。DNA对紫外线〔260nm有吸收作用,利用这一特性,可以对DNA进行含量测定。当核酸变性时,吸光度升高,称为增效应；当变性核酸重新复性时,吸光度又会恢复到原来的水平。较高温度、有机溶剂、酸碱试剂、尿素、酰胺等都可以引起DNA分子变性,即DNA双链碱基间的氢键断裂,双螺旋结构解开—也称为DNA的解螺旋。桂林工学院学报
在细胞内,DNA能与蛋白质结合形成染体,整组染体则统称为染体组。对于人类而言,正常的体细中含有46条染体。染体在细胞分裂之前会先在分裂间期完成复制,细胞分裂间期 大派用场的意思
又可划分为：G1期-DNA合成前期、S期-DNA合成期、G2-DNA合成后期。对于真核生物,如动物、植物及真菌而言,染体主要存在于细胞核内；而对于原核生物,如细菌而言,则主要存在于细胞质中的拟核内。染体上的染质蛋白,如组织蛋白,能够将DNA进行组织并压缩,以帮助DNA与其他蛋白质进行交互作用,进而调节基因的转录。
脱氧核糖核酸的结构
DNA的结构： DNA的结构一般可划分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构四个水平。
DNA是一种长链聚合物,组成单位为四种脱氧核苷酸,即腺嘌呤脱氧核苷酸〔dAMP 脱氧腺苷、胸腺嘧啶脱氧核苷酸〔dTMP 脱氧胸苷、胞嘧啶脱氧核苷酸〔dCMP 脱氧胞苷、鸟嘌呤脱氧核苷酸〔dGMP 脱氧鸟苷。而脱氧核糖〔五碳糖与磷酸分子借由酯键相连,组成其长链骨架,排列在外侧,四种碱基排列在内侧。每个糖分子都与四种碱基里的其中一种相连,这些碱基沿着DNA长链所排列而成的序列,可组成遗传密码,指导蛋白质的合成。读取密码的过程称为转录,是以DNA双链中的一条单链为模板转录出一段称为mRNA〔信使RNA的核酸分子。
DNA是由许多脱氧核苷酸按一定碱基顺序彼此用3’, 5’-磷酸二酯键相连构成的长链。大多数DNA含有两条这样的长链,也有的DNA为单链,如大肠杆菌噬菌体φX174、G4、M13等。DNA有环形DNA和链状DNA之分。在某些类型的DNA中,5-甲基胞嘧啶可在一定限度内取代胞嘧啶,其中小麦胚DNA的5-甲基胞嘧啶特别丰富。在某些噬菌体中,5-羟甲基胞嘧啶取代了胞嘧啶。40年代后期,查加夫〔E.Chargaff发现不同物种DNA的碱基组成不同,但其中的腺嘌呤数等于其胸腺嘧啶数〔A=T,鸟嘌呤数等于胞嘧啶数〔G=C,因而嘌呤数之和等于嘧啶数之和,一般用几个层次描绘DNA的结构。
2019未来科学大奖浓盐法从动物组织中提取DNA
核酸和蛋白质在生物体中常以核蛋白〔DNP/RNP的形式存在,其中DNP能溶于水及高浓度盐溶液,但在0.14 M的盐溶液中溶解度很低,而RNP则可溶于低盐溶液,因此可利用不同浓度的NaCl溶液将其从样品中分别抽提出来。将抽提得到的DNP用SDS处理可将其分离DNA和蛋白质,用氯仿-异戊醇将蛋白质沉淀除去可得DNA上清,加入冷乙醇即可将其呈纤维状析出。
asp 2.0
肝脏细胞
肝脏是由肝细胞组成,肝细胞极小,肉眼看不到,必须通过显微镜才能看到。人肝约有25亿个肝细胞,5000个肝细胞组成一个肝小叶,因此人肝的肝小叶总数约有50万个。肝细胞为多角形,直径约为20-30/加<微米>,有6-8个面,不同的生理条件下大小有差异,如饥饿时肝细胞体积变大。每个肝细胞表面可分为窦状隙面、肝细胞面和胆小管面三种。肝细胞里面含有许许多多复杂的细微结构:如肝细胞核、肝细胞质、线粒体、内质网、溶酶体、高尔基氏体、微粒体及饮液泡等组成。 二、实验目的
1.掌握浓盐法从动物组织中提取DNA的原理与技术
三、实验原理广告销售老鸟成长记
核酸和蛋白质在生物体中常以核蛋白〔DNP/RNP的形式存在,其中DNP能溶于水及高浓度盐溶液,但在0.14 M的盐溶液中溶解度很低,而RNP则可溶于低盐溶液,因此可利用不同浓度的NaCl溶液将其从样品中分别抽提出来。
系统部署方案
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议