作为一个生物相关专业的学生:经常有一些搞不懂的生物学常识6

作为一个生物相关专业的学生:经常有一些搞不懂的生物学常识6---细胞质粒
1.分子生物学实验室常见的细胞有哪些,英文名称是什么,使用哪些培养基,培养条件?
常见的细胞株如下(按字母顺序排列):
1)A549 - 人类肺腺癌细胞 (ATCC® CCL-185),使用 DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)培养基,37℃,5% CO2。
2)BHK-21 - 仓鼠肾细胞 (ATCC® CCL-10),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
3)CHO - 中国仓鼠卵巢细胞 (ATCC® CCL-61™),使用 F-12K (Kaighn's) Medium培养基,37℃,5% CO2。
4)COS-7 - 绿猴肾细胞 (ATCC® CRL-1651™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
5)HeLa - 人类子宫颈癌细胞 (ATCC® CCL-2™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
6)HepG2 - 人类肝细胞癌细胞 (ATCC® HB-8065™),使用 MEM(Minimum Essential Medium)培养基,37℃,5% CO2。
7)HL-60 - 人类白血病细胞系 (ATCC® CCL-240™),使用 RPMI 1640(Roswell Park Memorial Institute)培养基,37℃,5% CO2。
细胞生长肽
8)Jurkat - 人类淋巴细胞系 (ATCC® TIB-152™),使用 RPMI 1640 培养基,37℃,5% CO2。
9)MCF-7 - 人类乳腺癌细胞系 (ATCC® HTB-22™),使用 DMEM/F-12(Dulbecco’s Modified Eagle Medium/Nutrient Mixture F-12)培养基,37℃,5% CO2。
10)MDCK - 犬肾细胞 (ATCC® CCL-34™),使用 MEM 培养基,37℃,5% CO2。
11)NIH/3T3 - 小鼠成纤维细胞 (ATCC® CRL-1658™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
12)PC12 - 大鼠嗜铬细胞瘤细胞系 (ATCC® CRL-1721™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
13)RAW264.7 - 小鼠巨噬细胞系 (ATCC® TIB-71™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
14)SH-SY5Y - 人类神经母细胞瘤细胞系 (ATCC® CRL-2266™),使用 DMEM/F-12 培养基,37℃,5% CO2。
15)SK-BR-3 - 人类乳腺癌细胞系 (ATCC® HTB-30™),使用 McCoy’s 5A(Modified)Medium培养基,37℃,5% CO2。
16)THP-1 - 人类单核细胞系 (ATCC® TIB-202™),使用 RPMI 1640 培养基,37℃,5% CO2。
17)U2OS - 人类骨肉瘤细胞系 (ATCC® HTB-96™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
18)Vero - 绿猴肾细胞 (ATCC® CCL-81™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
19)293T - 人类肾上皮细胞 (ATCC® CRL-3216™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
20)HCT116 - 人类结肠癌细胞系 (ATCC® CCL-247™),使用 McCoy’s 5A 培养基,37℃,5% CO2。
21)HeLa S3 - 人类子宫颈癌细胞系 (ATCC® CCL-2.2™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
22)HepaRG - 人类肝癌细胞系 (ATCC® HB-8065™),使用 William's Medium E培养基,37℃,5% CO2。
23)MDA-MB-231 - 人类乳腺癌细胞系 (ATCC® HTB-26™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
24)MEF - 小鼠胚胎成纤维细胞 (ATCC® SCRC-1040™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
25)Neuro-2a - 小鼠神经母细胞瘤细胞系 (ATCC® CCL-131™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
太中银26)PANC-1 - 人类胰腺癌细胞系 (ATCC® CRL-1469™),使用 DMEM 培养基,37℃,5% CO2。
27)RPE-1 - 人类视网膜素上皮细胞系 (ATCC® CRL-4000™),使用 DMEM/F-12 培养基,37℃,5% CO2。
厦门px事件28)Saos-2 - 人类骨肉瘤细胞系 (ATCC® HTB-85™),使用 McCoy’s 5A 培养基,37℃,5% CO2。
29)SF9 - 青蛾卵巢细胞 (ATCC® CRL-1711™),使用 Grace's Insect Medium培养基,27℃。
30)Sf21 - 青蛾卵巢细胞 (ATCC® CRL-1711™),使用 Grace's Insect Medium培养基,27℃。
以上是一些常见的细胞系及其培养条件,每种细胞系的要求可能会有所不同,例如培养基成分、pH值、培养时间等。在进行实验前应仔细了解每个细胞系的特点及其对实验的影响,并严格按照要求进行培养。
2.分子生物学实验室常见的质粒30个文书档案
1)pUC19 - 用于克隆和高效表达目的基因。
2)pBluescript II SK(+) - 用于克隆和测序。
3)pET-28a(+) - 用于高效表达目的基因,并具有His标签。
4)pGEX-6P-1 - 用于高效表达目的基因,并具有GST标签。
5)pET-32a(+) - 用于高效表达目的基因,并具有Trx和His标签。
6)pCMV-Tag2B - 用于表达带有Flag和Myc标签的蛋白。
7)pcDNA3.1(+) - 用于哺乳动物细胞中表达目的基因。
8)pEGFP-C1 - 用于表达带有GFP标签的蛋白。
9)pEGFP-N1 - 用于表达带有GFP标签的蛋白。
10)pEGFP-N2 - 用于表达带有GFP标签的蛋白。
11)pEGFP-N3 - 用于表达带有GFP标签的蛋白。
12)pEGFP-N4 - 用于表达带有GFP标签的蛋白。
13)pEGFP-Nuc - 用于表达带有核定位信号的GFP标签蛋白。
14)pRSET A - 用于高效表达目的基因,并具有6xHis标签。
15)pET-15b(+) - 用于高效表达目的基因,并具有Nus标签。
16)pET-21a(+) - 用于高效表达目的基因。
17)pLenti-CMV-GFP-2A-Puro - 用于慢病毒载体构建,表达带有GFP标签的蛋白。
18)pMD18-T - 用于PCR克隆和测序。
19)pUC57 - 用于基因克隆和DNA合成。
20)pGEM-T Easy - 用于PCR克隆和测序。
21)pQE-30 - 用于高效表达目的基因,并具有His标签。
22)pQE-31 - 用于高效表达目的基因,并具有6xHis标签。
23)pQE-32 - 用于高效表达目的基因,并具有GST标签。
24)pQE-80L - 用于高效表达目的基因,并具有S-Tag标签。
25)pCAGGS - 用于哺乳动物细胞中表达目的基因。
26)pCI - 用于哺乳动物细胞中表达目的基因。
27)pRSFDuet-1 - 用于高效表达目的基因。
28)pETDuet-1 - 用于高效表达目的基因。
29)pACYC184 - 用于质粒复制和高效表达目的基因。
30)pBAD - 用于高效表达目的基因,并受AraC调控。
这些质粒的具体作用包括:
a)克隆:pUC19、pBluescript II SK(+)、pMD18-T、pUC57、pGEM-T Easy
这些质粒主要用于克隆和测序,其中pUC19还可用于高效表达目的基因。
b)高效表达:pET-28a(+)、pGEX-6P-1、pET-32a(+)、pRSET A、pQE-30、pQE-31、pQE-32、pQE-80L、pRSFDuet-1、pETDuet-1、pACYC184、pBAD
这些质粒主要用于在大肠杆菌中高效表达目的基因,其中有些质粒还具有特定的标签如His、GST、Trx、Nus等,以便后续蛋白纯化。
c)标记:pCMV-Tag2B、pEGFP-C1、pEGFP-N1、pEGFP-N2、pEGFP-N3、pEGFP-N4、pEGFP-Nuc
这些质粒主要用于标记目的蛋白,其中pCMV-Tag2B可用于表达带有Flag和Myc标签的蛋白,pEGFP系列质粒可用于表达带有GFP标签的蛋白,pEGFP-Nuc可用于表达带有核定位信号的GFP标签蛋白。
d)慢病毒载体:pLenti-CMV-GFP-2A-Puro
这个质粒用于慢病毒载体构建,以表达带有GFP标签的蛋白。
总之,这些常用质粒在分子生物学实验室中有广泛的应用,可以帮助研究者进行克隆、表达、标记等实验。
2.质粒命名、分类,并举一些例子
质粒是指独立于染体的小环状或线性的DNA分子,在原核生物细胞内自主复制和遗传的DNA分子。根据功能和结构的不同,质粒可以分为多种类型,以下是一些常见的质粒类型及其命名规则:
1)克隆载体:用于DNA片段的克隆和扩增,通常以p开头,后跟克隆载体的信息,如pUC19、pBluescript II SK(+)、pET-28a(+)等。
2)表达载体:用于高效表达蛋白,通常以p或者pcDNA开头,后跟表达载体的信息,如pET-28a(+)、pcDNA3.1(+)、pGEX-6P-1等。
3)标记载体:用于标记蛋白,通常以p或者pCMV开头,后跟标记载体的信息,如pCMV-Tag2B、pEGFP-C1、pEGFP-N1等。
4)RNAi载体:用于RNA干扰实验,通常以p或者pSUPER开头,后跟RNAi载体的信息,如pSUPER、pLKO.1等。
姜斌是谁
洪泽县实验小学5)CRISPR/Cas9载体:用于基因编辑实验,通常以p或者pX330开头,后跟CRISPR/Cas9载体的信息,如pX330-U6-Chimeric_BB-CBh-hSpCas9、pSpCas9(BB)-2A-GFP等。
除此之外,还有一些具有特殊功能的质粒,如慢病毒载体pLenti系列、质粒稳定细胞系构建载体等

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