• 694 •医学临床研究2021年5月第38卷第5期J Clin Res，May 2021，Vol 38, N〇5 •论著•LncRNA M IN C R表达对失代偿期肝硬化患者预后的评估价值 张雪艳1吴建平〃
(1.子长县人民医院消化内科，陕西延安717300;2.陕西省咸阳市武功县武功中心卫生院内科，陕西咸阳712200)
[摘要]【目的】探讨LncRNA M IN C R表达对失代偿期肝硬化患者预后的评估价值。【方法】选取2017
年1月至2018年1月本院住院的失代偿期肝硬化患者120例，依据随访生存状态分为生存组与死亡组。采 用实时荧光定量聚合酶链反应（q R T-P C R)检测LncRNA M IN C R的相对表达量。用P e a rs o n法分析Ln
cRNA MINCR 和肝硬化患者临床特征的相关性。采用 受试者工作特征曲线（ROC) 分析各指标对失代偿性
肝硬化预后的诊断性能。采用C O X回归分析影响患者预后的独立危险因素。【结果】P e a rs o n分析显示，Ln
cRNA MINCR 表达水平与总胆红素（TBil)、国 际标准化比值（IN R)、CTP 评分、终末期肝病模型（M ELD)评
分呈正相关（P<0.05)，与白蛋白（A lb)、肌酐（C r)及N a+相关性不显著（P>0.05)。R O C曲线分析表明，
LncRNA M IN C R预测肝硬化患者死亡的最佳临界点为2.32，灵敏度为96.71%，特异度为90.50%，ROC：曲线
下面积（A U C)为0.973。多因素C O X回归分析表明，LncRNA M IN C R是失代偿肝硬化患者死亡的独立危
险因素（ 1.13; 95%CJ : 1.07〜1.19 )。【结论】LncRNA M IN C R对判断失代偿期肝硬化患者病情及预后
具有一定价值，检测方法简便易行，值得推广。
[关键词]肝硬化/病理生理学；肝硬化/；结果
Prognostic Value of Expression of LncRNA MINCR in Patients with Decompensated Cirrhosis Z H A N G Xue-yan ^ W U J ia n-p in g{ D epartm ent o f Gastroenterology，Z ichang County Peoples
Hospitals Yanan717300)
[A bstract]!O bjectivelT o investigate the prognostic value of expression of LncRN A MINCR in patients
with decompensated cirrh o sis.【M ethods】Fr〇m January 2017 to January 2018，120 patients w ith decompensat-
ed cirrhosis were selected and divided into survival group and death group according to the follow-up survival
status. The relative expression of LncRNA MINCR was detected by real-time fluorescence quantitative poly
merase chain reaction (qR T-P C R). Pearson method was used to analyze the correlation between LncRNA
MINCR and the clinical characteristics of patients with cirrhosis. ROC was used to analyze the diagnostic per
formance of each index for the prognosis of decompensated cirrhosivS. Cox regression analysis was used to ana-
lyze the independent risk factors influencing the prognosis of p a tie n ts.【R esults】Pearson analysis showed that
the expression level of LncRNA MINCR was positively correlated with TB IL, INR» C T P and MELD ( P<C
0.05)，but not with A LB，Cr and Na ( P〉0.05). ROC curve analysis showed that the best critical point of
LncRNA M INCR for predicting death in patients with cirrhosis was 2.32, the sensitivity was 96.71%, the
公民社会理论specificity was 90.50% , and the area under AUC curve was 0.973. M ultivariate Cox regression analysis showed
that LncRNA M INCR was an independent risk factor for death in decompensated cirrhosis ( H R：1.13；95%C/
:1.07-1.19).【Conclusion】LncRNA M INCR has a certain value in judging the condition and prognosis of pa-
tients with decompensated cirrhosis. The method is simple and easy to use, which is w orth popularizing.
[Key words] Liver Cirrhosis /P P; Liver Cirrhosis /T H；Treatm ent Outcom e
[中图分类号]R575.2 [文献标识码] A [doi:10.3969/_j.issiU671-7171.2021.05.016][文章编号]1671-7171(2021)05-0694-04通讯作者，E-mail:***************
医学临床研究2021年5月第38卷第5期J Clin Res，May 2021, Vol 38, N q5• 695 •
肝硬化是各种肝损伤因素长期影响导致的慢性肝病晚期阶段。在我国，嗜肝病毒感染仍是导致肝硬化的主要原因[1]。患者代偿期无明显临床症状，一旦进人失代偿期则预后恶劣。有研究报道，代偿期肝硬化患者中位生存时间约12年，而失代偿期患者仅有2年目前，临床上有多种针对失代偿期肝硬化患者病情评估及预后预测的模型，如C h ild-P u g h评分及M E L D~N a评分。由于模型参数受主观因素及非肝病因素影响，其预测准确性不甚理想[3]。长链非编码R N A(L n c R N A)是一类由超过200个核苷酸组成的无编码功能R N A。L n c R N A 的功能在近年来受到广泛重视，其在基因翻译转录调控中
发挥重要作用[<]。L n c R N A M I N C R是M Y C相关的长链非编码R N A。近年来研究发现，L n c R N A M I N C R与肝脏肿瘤的发生发展密切相关，调控肝脏细胞的代谢与增殖，并参与肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等过程[5]。本研究拟探讨L n c R N A M I N C R作为一种新型生物标记物对失代偿期肝硬化患者预后的评估价值。
1资料与方法
1.1研究对象选取2017年1月至2018年1月本院住院的失代偿期肝硬化患者120例，依据随访生存状态分为生存组与死亡组。失代偿期肝硬化依据病理组织学检查确诊，或根据病史、临床表现、实验室检查及影像学检查诊断。纳人标准：年龄>18岁；失代偿期肝硬化诊断明确[6]；签署研究知情同意书。排除标准：合并肝脏或其他器官恶性肿瘤；合并急性肝衰竭；临床资料不完整。本研究方案得到医院伦理委员会审核批准。
1.2外周血指标检测所有患者晨起空腹时采集肘静脉血3 m L于乙二胺四乙酸（E D T A)抗凝管中，采血后30m i n内处理。在4-C离心机内以4500r/ m i n离心8 m i n，取上清置于E P管中，保存于—80°C冰箱备用。严格按照说明书标准流程使用TR-I z o l试剂提取总R N A，采用实时荧光定量聚合酶链反应（q R T-P C R)检测血浆L n c R N A M I N C R表达水平。R N A定量采用N a n o D r o p lO O O(T h e r m o F i s h e r S c i e n t i f i c，U S A)进行，并采用D N a s e祛除D N A污染。c D N A合成采用
P r i m e S c r i p t R T r e ag e n t k it W i t h g D N A E r a s e r，反转录试剂盒购自日本T a k a r a公司（P e f e c t r e a l t i m e)。转录合成后冷却至4"C，采用无R N A酶水按1 :20的比例稀释后保存。取cDNA 1p L、正向和反向引物各1y L、反应缓冲液1
2.5 pL 混合，在 ABI Prism7300 (ABI，USA)系统内进行实时荧光定量聚合酶链反应检测，以U6为内参。采用相对定量法计算，用2_AACT法计算LncRNA M IN C R的相对表达量。
1.3观测指标①收集患者人口统计学数据包括
性别、年龄；②临床资料包括病因、实验室检查，如总胆红素（TBil)、血清白蛋白（ALB)、谷草转氨酶(A L T)、谷丙转氨酶（A S T)、国际标准化比值(INR)、凝血酶原时间（P T)、肌酐（Cr)、血清钠离子(Na+ )。③计算Child-Turcotte-Pugh (C T P)评分[7]，模型指标包括肝性脑病、腹水、白蛋白、总胆红素和凝血酶原时间。④计算终末期肝病模型（model for end-stage liver disease，MELD)评分，模型指标包括血清胆红素、肌酐、国际标准化比值及肝脏病因或血清钠，具体为 M ELD= 3.78 X&i[TBil(mg/ dL)] +11.2 X i n(INR)+ 9.57 [ Cr(mg/dL)] + 6.43 X病因（胆汁性或酒精性为0，其他为1)，结果取整数W。
1.4随访采用电话结合门诊的方式进行随访，每间隔3个月随访1次，随访截止日期为2019年6月1日。总体生存时间定义为纳人时间到患者死亡时间（未发生死亡事件则取最后一次随访时间）。
1.5统计学方法采用SPSS2
2.0软件。计量资料才用I士△表示，组间比较采用两独立样本r检验或非参数检验；分类型资料采用率（％)表示，组间比较采用X2检验。采用Pearson法分析LncRNA MIN-C R和肝硬化患者临床特征的相关性。采用受试者工作特征曲线（ROC)及其曲线下面积（A U C)分析各指标对失代偿性肝硬化预后的诊断效能。采用C O X回归分析影响患者预后的独立危险因素。P <〇.〇5为差异有统计学意义。
2结果
2.1 _般情况患者平均年龄（60.17±8.76)岁，其中男性77例，女性43例。嗜肝病毒感染为主要病因（乙型肝炎病毒感染57例，丙型肝炎病毒感染21例），酒精性肝硬化16例，原发性胆汁性肝硬化20例，其他原因肝硬化6例。随访过程中，死亡36例，生存组及死亡组间性别、A L T及A S T无显著差异(P>0.05)。死亡组患者外周血LncRNA MINCR 表达水平显著高于生存组。此外，两组间年龄、TBil、Alb、Cr、Na+、INR、CTP评分及 MELD 评分
• 696 •医学临床研究2021年5月第38卷第5期J Clin Res,May 2021，Vol 38, N q5
差异均具有统计学意义（p <〇.〇5)，见表1。
表1两组基线特征比较
临床特征
总体
(n =120)
生存组
(n =84)
死亡组
(n =36)
t/X2P
年龄（岁）60.17 士8.7657.14 士7.6467.24 土7.31-6.721<0.001性别（男/女，例）77/4354/3023/130.0020.967 TBiK/imol/L)28.84 土5.2127.14 士4.3832.81 士4.16—6.595<0.001 ALB(g/L)28.74 士6.4130.94 士6.2123.61 士5.97 5.993<0.001 ALTOJ/L)35.03 士7.0434.97 士6.8435.17 士6.73—0.1470.883 ASTOJ/L)45.92 士9.4344.92 士9.1348.25 士8.96-1.8410.068 CrC/im
ol /L)71.06 士12.4664.38 土11.2186.65 士10.73—10.099<0.001 Na+ (mmol/L)142.14 士24.65 146.25 土21.65 132.55 士22.3331.1470.002 INR 1.42 士0.38 1.36 士0.21 1.56 士0.17-5.048<0.001 CTP(分）8.73 士2.187.42 士1.9611.79 士1.87—11.344<0.001 MELD(分）12.16 土6.249.41 士3.8218.58 士5.74-10.284<0.001 LncRNA MINCR 2.17 士0.94 1.43 士0.63 3.90 士0.81-18.014<0.001 2?2 相关性分析P earso n分析显系，LncRNA MINC.R表达水平与 TBil、I N R、CTP 评分、MELD 评分呈正相关（P <〇.〇5)，与Alb、C r及N a相关性不显著（P >0.05)，见表2。
表2 L n c R N A M I N C R表达水平与临床指标相关性
变童r P
TBiKpmol/L)0.7310.004
Alb(g/L)-0.5610.032
Cr(；imol/L)0.1680.317
在遥远的时空中N a+ (mmol/L)0.2160.184
INR0.6450.027 CTP(计分）0.7160.001
MELD(计分）0.6970.018
2.3 R O C曲线分析R O C曲线分析表明，LncRNA MINCR预测肝硬化患 者死亡 的最佳临界点为2.32，灵敏度为96.71%，特异度为90.50%，AUC 为0.973，见图1。
图1LncRNA M IN CR对肝硬化患者的预后的诊断效能
2.4 C o x生存分析以生存状态为因变量，将年龄、TBil、ALB、C r、Na+、INR、C T P W*、M E L D if 分及LncRNA M IN C R表纳人多因素C O X回归分析，结果显示TBil、MELD 评分、LncRNA MINCR 是失代偿肝硬化患者死亡的独立危险因素（P <0.05)，见表 3。
表3失代偿肝硬化患者预后多因素生存分析
因素SE W ald X2P HR95%C/
年龄0.1040.09711.0530.199 1.110.74 〜1.18
TBil0.1430.08420.2660.009 1.15 1.08 〜1.23
ALB0.1520.12110.3820.239 1.160.86〜1.28
秋天的雨教学实录
Cr0.1370.10312.9140.115 1.150.96 〜1.24
Na+0.1480.11411.3880.181 1.160.73〜1.26
INR0.1640.12610.3300.243 1.180.87 〜1.30
C T P评分0.1720.11712.5650.128 1.190.68〜1.31
M ELD评分0.1640.08124.9960.002 1.18 1.10 〜1.26 LncRNA MINCR0.1210.07223.3410.003 1.13 1.07 — 1.19
3 讨论
失代偿期肝硬化是多种肝脏疾病的终末期表现，患者预后恶劣，1年及2年中位生存率仅为61%和54%[2]。我国是肝病大国，仅乙型肝炎病毒相关慢性肝病患者即有2000〜3000万例，由此所导致的肝硬化患者体巨大，造成了严重的社会和经济负担[9]。因此，识别高危预后不良肝硬化患者并进行优化，是改善患者预后的关键手段之一。目前，临床上广泛采用C T P分级及MELD评分评估患者病情严重程度及预后状况。但有研究发现，C T P评分系统对肝硬化后肝脏储备功能具有较好评估价值，但与预后相关性不佳；而MELD评分虽采用客观指标，但其计算复杂，且仅预测患者短期死亡率[1°’11]。
目前，许多研究探索简便、高效的临床指标以预测失代偿性肝硬化患者预后。梁利民等[12]提出中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR)可以预测患者1年死亡率，且与MELD评分相关性较好。王昀等[13]报道肝脏面积与腹部面积比（liver to abdominal area ratio, LAAR)在预测患者存活方面具有与MELD评分类似的敏感性和特异度。本研究发现，肝硬化患者外周血LncRNA MINCR表达水平与患者预后密切相关。多因素Cox生存分析显示，LncRNA MINCR是失代偿性肝硬化患者死亡的独立危险因素。
关于L n c R N A M I N C R在肝脏疾病中的作用机制尚待研究。L n c R N A M I N C R是M Y C相关的长链非编码R N A。M YC核蛋白家族是调节转录因子的原癌基因，参与细胞增殖、分化和凋亡的调控机制[14]。W a n g S H等[15]发现胆囊癌组织中L n c R N A M I N C R 的异常表达与胆囊癌细胞的生物学侵袭行为有关，高表达L n c R N A M I N C R患者的总体生存时间比低表达患者短。L i a n J等[1S]发现原发性肝癌组织中L nc R N A M I N C R的表达水平明显高于癌旁组织，提示L n c R N A M I N C R
在肝癌的发生和发展过程中起重要
医学临床研究2021年5月第38卷第5期J Clin Res,May 2021, Vo丨38, N P5• 697 •
作用，且与T N M分期、淋巴结转移和肝硬化相关。此外，LncRNA MINCR的过表达可能促进CDK2 mR-
N A的表达，而CDK2通过与细胞周期蛋白结合形成
蛋白激酶复合物，促进R B的磷酸化，从而加速细胞周
期进程，促进细胞分裂，提示LncRNA-MINCR的表达
在肝细胞异常增殖中可能具有积极的调控作用[17]。
综上所述，LncRNA MINCR表达水平是失代偿
期肝硬化患者预后不良的独立预测因素。考虑到本
研究为单中心小样本研究，其结果尚需要前瞻性大样
本研究进一步验证。
[参考文献]
[1]中华医学会肝病学分会.肝硬化腹水及相关并发症的诊疗指
南[J].临床肝胆病杂志，2017,33(10): 158-174.
[2] D AMICO G.GARCIA-TSAO G,PAGLIARO L . Natural
history and prognostic indicators of survival in cirrhosis：A
systematic review of 118 studies [J]. J Hepatol，2006» 44
(1)：217-231.
[3]徐小元，丁惠国，李文刚，等.肝硬化诊治指南[J].临床肝胆病
杂志，2019,35(11) :2408-2425.
[4]赵志国，张力平.miRNA和IncRNA相互作用与恶性肿瘤相
关性的研究进展[J].现代肿瘤医学，2018,26(18):2991-2994. [5]曹金玉.长链非编码RNA MINCR调控肝细胞肝癌增殖迁移
和侵袭[D].南昌大学，2018.
[6]中国中西医结合学会消化系统疾病专业委员会.肝硬化中西
医结合诊疗共识[J].中国中西医结合消化杂志，2011,19:277-
279.
[7] FORTUNE B E,GARCIA-TSAO G, Maria C, et al .Child-
turcotte-pugh class is best at stratifying risk in variceal hem-
orrhage[J]. J Clin Gastroenterol ^2017, 51(5) ：446-453.
[8] KAMATH P S,WIESNER R H,MALINCHOC et al .A
(上接第693页）
[3] NISHIMURA Y,JINGU K,ITASAKA S, et al .Clinical out
comes of radiotherapy for esophageal cancer between 2004 and
2008: the second survey of the Japanese Radiation Oncology
Study Group (JRO SG)[J]. lnt Clin Oncol,2016,21 (1) ：88-
94.
[4]张晖，任刚，夏廷毅•等.18F-FDGPET/CT标准摄取值对胰腺
癌螺旋断层调强放射预后的评估[J].中国医学装备，
2016,13(4):57-60.
[5]李建成，孙伟杰，陈少兴，等.18F-FDG PET-CT代谢参数对食
管癌近期疗效预测价值研究[J].中华肿瘤防治杂志，2017,24
(16)：1157-1161.
[6] HONG J H,KIM H H.HAN EJ, ^al .Total Lesion Glycoly
sis Using 18F-FDG PET/CT as a Prognostic Factor for Locally
Advanced Esophageal Cancer[J]. J Korean Med Sci, 2016,31
(l)：39-46.
model to predict survival in patients with end-stage liver dis-
ease[J], Hepatology ^2001» 33(2) ：464-470.
[9]中华医学会感染病学分会，中华医学会肝病学分.慢性乙型肝
炎防治指南（2019年版）[J].临床肝胆病杂志.2019.35 (12):
2648-2669.
[10] RAMANATHAN S,KHANDELWAL N,KALRA N, et al .
Correlation of HVPG level with CTP score, MELD score, as
cites, size of varices, and etiology in cirrhotic patients [J].
Saud J Gastroenterol ^2015, 22(2) ： 109-115.
[11]吴吉圆，张冬琴，刘菲菲，等.病毒性肝炎肝硬化失代偿期患
者评分系统对短期预后的分析[J].中国肝脏病杂志（电子
版），2017,9(1):54-58.
[12]梁利民，徐鹤翔•郑吉顺，等.中性粒细胞与淋巴细胞比值对
失代偿期肝硬化患者预后的评估价值[J].临床肝胆病杂志，
2019, 35(04)：96-101.
[13]王昀，杨永成.肝脏面积与腹部面积比评估失代偿期肝硬化患
者预后的价值[J].中国肝脏病杂志（电子版），2019,11(03):
47-51.
[14] SHACHAF C M . Tumor dormancy and MYC inactivation：
pushing cancer to the brink of normalcy [J]. Cancer Res,
2005, 65(ll)：4471-4474.
[15] WANG S H, YANG Y, WU X C, et al .Long non-coding
RNA MINCR promotes gallbladder cancer progression
through stimulating EZH2 expression [J ]. Cancer letters»
高远圣工2016, 380(1):122-133.
[16] LIAN J,ZHANG X,LU Y, et al .Expression and significance
of LncRNA-MINCR and CDK2 mRNA in primary hepatocel
lular carcinoma[J]. Comb Chem High Throughput Screen♦
2019, 22(3):201-206.
亲密关系经历量表[17] SENGUPTA S, WILLIAM HENRY R. Regulation of the ret-
inoblastoma-E2F pathway by the ubiquitin-proteasome system
深圳市龙华区基础教育
[J]. Biochim Biophys Acta »2015,1849(10)： 1289-1297.
[7] 丁重阳，郭喆，吴宇霖.等.18F-FDG PE T/C T在局限期小细胞
肺癌预后评估中的价值[J].中华核医学与分子影像杂志，
2017,37(11)：694-699.
[8]林虹霄，钱立庭，潘博，等.FDG PET-CT显像代谢参数与食管
癌放疗预后相关性研究[J].中华放射肿瘤学杂志，2017,26
(12)：1394-1398.
[9] HSIEH H Y,YEH H L,HSU C P, et al .Feasibility of inten
sity-modulated radiotherapy for esophageal cancer in definite
chemoradiotherapy[J]. 7 Chin Med Assoc,2016,79 ( 7 ) ： 375-
381.
[10] ONG L T,DUNPHY M,FOSTER A, et al .Prognostic Value
of Pre radiotherapy 18F-FDG PET/CT Volumetries in Limited-
stage Small Cell Lung Cancer[J]. Clin Lung Cancer,2016,17
(3)：184-188.
(本文编辑：王沪湘）[收稿日期]2021-01-13
(本文编辑：詹道友）[收稿日期]2020-09-29
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议