免疫组化染方法(SP法和SABC法)

免疫组化染方法(SP法和SABC法)
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寻隐者不遇教学设计免疫组化染方法(SP法和SABC法)
关键词:染免疫免疫组化染SP法SABC法
SP法
1)脱蜡、水化;
2)PBS洗2~3次各5分钟;
述职报告格式3)3%H2O2(80%甲醇)滴加在TMA上,室温静置10分钟;
4)PBS洗2~3次各5分钟; 5)抗原修复;
6)PBS洗2~3次各5分钟;
7)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。
8)滴加Ⅰ抗50μl,室温静置1小时或者4℃过夜或者37℃1小时。
9)4℃过夜后需在37℃复温45分钟。
10)PBS洗3次各5分钟;
11)滴加Ⅱ抗40~50μl,室温静置,或37℃1小时;
12)II抗中可加入0.05%的tween-20。
13)PBS洗3次各5分钟;
14)DAB显5~10分钟,在显微镜下掌握染程度;
15)PBS或自来水冲洗10分钟;
16)苏木精复染2分钟,盐酸酒精分化;
17)自来水冲洗10~15分钟;
18)脱水、透明、封片、镜检。
SABC法
1)脱蜡、水化。
2)PBS洗两次各5分钟。
3)用蒸馏水或PBS配置新鲜的3%H2O2,室温封闭5~10分钟,蒸馏水洗3次。
4)抗原修复。
5)PBS洗5分钟。
6)滴加正常山羊信息安全保护血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。
7)滴加Ⅰ抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时(4℃过夜后在37℃复温45分钟)。
8)PBS洗三次每次2分钟。
9)滴加生物素化二抗,20℃~37℃20分钟。
花儿为什么这样香10)PBC洗3次每次2分钟。
11)滴加试剂SABC,20℃~37℃20分钟。
东丰二中12)PBS洗4次每次5分钟。
13)DAB显:DAB显试剂盒或者自配显剂显(镜下掌握显程度)。
公共地役权14)蒸馏水洗。苏木素复染2分钟、盐酸酒精分化。
15)脱水、透明、封片、镜检。

本文发布于:2024-09-21 17:39:18,感谢您对本站的认可!

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标签:室温   染色   显色   滴加   盐酸
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