细菌鉴定 实验方法

芽孢菌菌种鉴定部分实验
1、好氧性-半固体琼脂穿刺
半固体琼脂0.5-0.6%,
  一般培养培养基
伯杰氏手册
2、V-P实验(测定培养物终pH)
(科大微生物)按培养液一半的量加入6%萘酚酒精液,摇匀,再按培养液1/3量加入40%氢氧化钾溶液,充分摇匀。呈现红者为V-P阳性,不呈现红为阴性,后者放培养条件下继续培养4h再观察判定。
3、柠檬酸盐
4、D-木糖、D-甘露醇
5、葡萄糖产酸产气
糖发酵培养基(科大微生物实验):
大胆爱小心偷      牛肉膏 0.5%
      蛋白胨 1%
      氯化钠 0.3%
小鸟配气球
      Na2HPO4.12H2O 0.2%
      0.2%溴麝香草酚蓝溶液1.2%(体积分数)
蒸馏水配制,pH7.4
方法:葡萄糖发酵管按上述成分配好后,加入0.5%葡萄糖,分装于有一个倒置杜氏管的试管内,121℃灭菌15min。其他糖分别配成10%溶液,无菌吸管吸取0,5mL加入10mL培养基内。蔗糖不纯,加热时会自行分解,采用过滤除菌法。乳糖发酵无牛肉膏。
    紫培养基变黄者,利用葡萄糖产酸;培养基变黄,杜氏管中又有气泡,产酸产气,气泡似小米粒,产酸微量产气
6、酪素水解及酪氨酸水解
酪素水解试验(酪蛋白水解  牛奶平板的制备:取5g脱脂奶粉加入50mL蒸馏水中(或用50mL脱脂牛奶),另称1.5g琼脂溶于50mL蒸馏水中,将两液分开灭菌。待冷至45-50时,将两液混匀倒平板,即成牛奶平板。将平板倒置过夜,使表面水分干燥,然后将菌种点接在平板上,每皿可点接3-5株菌。适温培养1、3、5天,记录菌落周围和下面酪素是否已被分解而呈透明。
    配制该培养基时,切勿将牛奶和琼脂混合灭菌,以防牛奶凝固。
 酪氨酸水解  穿过骨头抚摩你将酪氨酸0.5g悬浮于10mL蒸馏水中,115℃,三次函数20分钟灭菌,然后于100mL无菌的营养肉汤琼脂混合,倾倒平板,待凝固后,将测试菌接种于平皿上,培养7到14d,记录酪氨酸结晶是否被水解而变透明。钢芯铝绞线
7、苯丙氨酸脱氨酶
8、卵黄卵磷脂酶
9、硝酸盐还原到亚硝酸盐实验
10、0.001%溶菌酶抗性实验
滤纸片 抑菌圈实验
11、吲哚反应
蛋白胨水培养基:蛋白胨(或胰蛋白胨)20g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL;121,15min。
欧波试剂:将1g对甲氨基苯甲醛溶于95mL乙醇(95%)中,然后缓慢加入浓盐酸20mL。
取培养好的试管,加入约0.5mL乙醚,振摇均匀后静置分层,再沿管壁加入约1.5mL的吲哚试剂。阳性者在上层的乙醚层呈玫瑰红,否则为阴性。
12、淀粉水解
折射率13、接触酶反应

本文发布于:2024-09-23 08:20:19,感谢您对本站的认可!

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