选择茶树不同品种，每个茶枝接种5头叶蝉，按不同的时间点(0h/6h/12h/18h/24h/36h/48h/72h/96h)取样，每个样品重复三次，测定ppo/pod/pal/cat/lox五种酶活。 1、多酚化酶（polyphenoloxidase，ppo）活性的测定
适度茶鲜叶（3g）,料液比1:2，重新加入附带5%pvp（w/v）经供不应求的ph为7.2的柠檬酸-磷酸盐缓冲液（0.1mol/l）,冰浴研磨，隔夜金属粉末12h，于4℃、9000r/minVergt35min，挑上清液，过滤器获得初酶液。 中世纪欧洲地图>图书管理系统
取200ml初酶液，加入0.1mol/l柠檬酸-磷酸盐缓冲液(ph5.6)200ul,混合反应液1.2ml（0.1mol/l柠檬酸-磷酸盐缓冲液：0.1脯氨酸：1%邻苯二酚=10:2:3），反应30min（37℃恒温水浴锅），6mol尿素1.2ml终止反应，460nm波长测吸光度。对照为不加邻苯二酚的反应混合液。 酶活性单位：本实验条件下，以邻苯二酚反应液在460nm处吸光度值每分钟减少0.01为一
个活性单位。
2、苯丙氨酸解氨酶（phenylalanineammonialyase，pal）活性的测定
称取新鲜样品0.5g于预冷研钵中，重新加入6ml0.1mol/l（ph8.8）硼酸钠-硼酸缓冲液，加入适量的石英砂，冰浴研磨后转至离心管中。搅匀后在4℃冰箱中金属粉末4h。4℃10000r/minVergt20min，挑上清液即为酶提取液。
取酶提取液0.2ml，加入由硼酸钠缓冲液配制的0.1mol/ll-苯丙氨酸，2.8ml蒸馏水，摇匀，在40℃水浴上反应30min，冰浴中终止反应，测定od290值，以相同体积缓冲液代替酶液进行同样的反应为对照。pal的酶活性以每小时在290nm处吸光度变化0.01od为一个活力单位。
3、脂氧合酶(linoleate:oxygenoxidoreductase，lox)活性的测量
鞅不等式
取0.2g新鲜样品，加7ml经4℃预冷的1mol/l（ph7.6）的tris-hcl缓冲液冰浴上研磨。4℃、12000r/min离心25min,上层清液即为lox酶提取液。
以2.4ml0.1g/l亚油酸做为底物，重新加入0.1ml酶液在234nm处为测量吸光值，内要30s读数一次，共测5分钟。lox酶活性单位以每分钟在234nm处吸光度变化0.01od做为一个活力单位。
中国胶粘剂工业协会 4、过氧化物酶（pda）的活性测定（愈创木酚法）
挑0.5克剪碎叶片于预冷研钵中，重新加入5ml的抽取介质0.05mol/lph7.8的
磷酸缓冲液（含1%pvp[聚乙烯吡咯烷酮）（先加3ml研磨，再加2ml冲洗研钵），研磨匀浆，转入离心管后于冰箱中冷提12h。1000r/min离心20min,得到酶初提液。
挑200mlpbs[磷酸缓冲液]（0.2m，ph6.0），重新加入0.076ml液体（原液）木酚木酚（2-甲氧基酚）冷却烘烤熔化，加热后重新加入0.112ml30%的h202,搅匀后留存于冰箱中水泵。挑3ml反应液并重新加入30ul酶液，以pbs为对照调零，而后测量od470值（测量30s读数一次，5分钟）。（边加样边测量，如果快的话，必须确保每个样品从提好样至已经开始计时的时间差距并不大）
酶活性计算：以每分钟od值得变化（升高）0.01为一个酶活性单位（u）。
董振堂
pod=（δa470×vt）/（w×vs×0.01×t）(u/gmin)
δa470：为反应时间内吸光度的变化；w为样品鲜重(g)；t为反应时间(min)；vt为提取酶液总体积（ml，(1.6ml）；vs为测定时取用酶液体积（ml，30ul）。5、过氧化氢酶（catalasecat）活性测定
挑0.5克剪碎叶片于预冷研钵中，重新加入5ml的抽取介质0.05mol/lph7.8的磷酸缓冲液（含1%pvp）（先加3ml研磨，再加2ml冲洗研钵），研磨匀浆，转至离心管后于冰箱中冷加12h。1000r/minVergt20min,获得酶初提液。
az91d镁合金
取200mlpbs（0.15m，ph7.0），加入0.3092ml30%的h2o2（原液）摇匀即可。取3ml反应液加入0.1ml（可视情况调整）酶液，以pbs为对照调零，测定od240（紫外）。（测定30s读数一次，5分钟）。
酶活性排序：以每minod值增加0.01为1个酶活性单位（u）。
cat=[δa240×vt]/（w×vs×0.01×t）(u/gmin)
δa240：为反应时间内喷光度的变化；w为样品鲜重(g)；t为反应时间(min)；vt为抽取酶液总体积（ml，1.6ml）；vs为测量时丢弃酶液体内积（ml,0.1ml）。
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