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各种缓冲液的配制方法_

各种缓冲液的配制方法
Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液
质谱流式细胞技术诺贝尔生理医学奖
PH
0.2mol/LNa2HPO4  (ml)
0.1mol/L柠檬酸钠 (ml)
PH
0.2mol/LNa2HPO4 (ml)
0.1mol/L柠檬酸钠 (ml)
2.2
0.4
19.6
5.2
10.72
9.28
2.4
1.24
18.76
5.4
11.15
8.85
2.6
2.18
17.82
5.6
11.60
8.40
2.8
3.17
16.83
5.8
12.09
7.91
3.0
4.11
15.89
6.0
12.63
7.37
3.2
4.94
15.06
6.2
13.22
6.78
3.4
5.70
14.30
6.4
13.85
6.15
3.6
6.44
13.56
6.6
14.55
5.45
3.8
7.10
12.90
6.8
15.45
4.55
4.0
7.71
12.29
7.0
16.47
3.53
4.2
8.28
11.72
7.2
17.39
2.61
4.4
8.82
11.18
7.4
18.17
1.83
4.6
9.35
10.65
7.6
18.73
1.27
4.8
9.86
10.14
7.8
19.15
0.85
5.0
10.30
9.70
8.0
19.45
0.55
Na2HPO4。2H2O，分子量=178.05  0.2mol/L溶液含35.61g/L
柠檬酸. H2O，分子量=210.14    0.1mol/L溶液含21.01g/L
柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液（0.1mol/L）
PH
0.1mol/L柠檬酸
（ml）
0.1mol/L柠檬酸
钠（ml）
PH
0.1mol/L柠檬酸
（ml）
0.1mol/L柠檬酸钠 (ml)
3.0
18.6
1.4
5.0
8.2
11.8
3.2
17.2
2.8
5.2
7.3
12.7
3.4
16.0
4.0
5.4
6.4
13.6
3.6
14.9
5.1
5.6
5.5
14.5
3.8
14.0
6.0
5.8
4.7
15.3
4.0
13.1
6.9
6.0
2010全国高中数学联赛
3.8
16.2
4.2
12.3
7.7
6.2
2.8
17.2
4.4
11.4
8.6
6.4
2.0
18.0
4.6
10.3
9.7
6.6
1.4
18.6
4.8
9.2
10.8
柠檬酸. H2O，分子量=210.14    0.1mol/L溶液含21.01g/L
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柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/L
醋酸缓冲液（0.2mol/L，18℃）
PH
0.2mol/LNaAC(ml)
0.2mol/LHAC(ml)
PH
0.2mol/LNaAC(ml)
0.2mol/LHAC(ml)
3.6
0.75
9.25
4.8
5.90
4.10
3.8
1.20
8.80
5.0
7.00
3.00
4.0
1.80
8.20
5.2
7.90
2.10
4.2
2.65
7.35
5.4
8.60
1.40
4.4
3.70
6.30
5.6
9.10
0.90
4.6
4.90
5.10
5.8
9.40
0.60
NaAC.3 H2O,分子量=136.09        0.2mol/L溶液含27.22g/L
（1）醋酸盐溶液的配制：
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)
    取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。           
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)
    取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝转变为纯绿，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)
    取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)
      取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。     
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)
      取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。     
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)
      取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克 量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。 将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。 当然若想配制其它的浓度，也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不能配的太稀，否则缓冲能力要下降，太浓的话又浪费试剂。
苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液
PH
0.1mol/LNaOH(ml)
0.2mol/L苯二甲酸氢钾（ml）
加水至(ml)
4.0
0.40
25.00
100.00
4.2
3.65
25.00
100.00
4.4
7.35
25.00
100.00
4.6
ospf12.00
25.00
100.00
4.8
17.50
25.00
100.00
5.0
23.65
25.00
100.00
5.2
29.75
25.00
100.00
5.4
35.25
25.00
100.00
5.6
39.70
25.00
100.00
5.8
43.10
25.00
100.00
6.0
45.40
25.00
100.00
6.2
47.00
25.00
100.00
0.2mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时的苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中，稀释至500ml。
磷酸缓冲液（0.2mol/L）
PH
0.2mol/LNa2HPO4  (ml)
0.2mol/LNaH2PO4 (ml)
PH
0.2mol/LNa2HPO4 (ml)
0.2mol/LNaH2PO4 (ml)
5．8
8.0
92.0
7.0
61.0
39.0
6.0
12.3
87.7
7.2
72.0
28.0
6.2
18.5
81.5
7.4
81.0
19.0
6.4
26.5
73.5
7.6
87.0
13.0
6.6
37.5
62.5
7.8
武汉空气质量指数
91.5
8.5
6.8
49.0
51.0
8.0
94.7
5.3
Na2HPO4 .2 H2O ,分子量=178.05，    0.2mol/L溶液含35.61g/L
NaH2PO4 . 2 H2O ,分子量=156.03，    0.2mol/L溶液含31.21g/L
NaH2PO4 . H2O,分子量=138.03，      0.2mol/L溶液含27.6g/L
Na2HPO4 .12 H2O,,分子量=358.22，  0.2mol/L溶液含71.64g/L
磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法
0.01M PBS
PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)
PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L
称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制：
0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4)的配制：
先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可，如：
0.1M PB（PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCl的话，加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。
另：其它各种另 PH值的 0.2M PB（100ml)配方 ：
pH      0.2M NaH2PO4（ml）        0.2M Na2HPO4（ml）
5.7            93.5                          6.5
5.8            92                            8           
5.9            90                            10
6.0            87.7                          12.3
6.1            85                            15
6.2            81.5                          18.5
6.3            77.5                          22.5
6.4            73.5                          26.5
6.5            68.5                          31.5
6.6            62.5                          37.5
6.7            56.5                          43.5
6.8            51                            49
6.9              45                          55
7.0              38                          62
7.1              33                          67
7.2            28                            72
7.3              23                          77
7.4              19ml                        81ml

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