课程试卷(含答案)
__________学年第___学期 考试类型:(闭卷)考试
考试时间: 90 分钟 年级专业_____________
金浩振
学号_____________ 姓名_____________
1、分析题(5分,每题5分)
1. 写出从组织中抽取RNA的关键步骤,并解释如何判断RNA质量。
答案: (1)从组织中提取RNA的步骤如下: ①将组织在液氮中磨碎,每50~100mg组织加入1ml TRIzol裂解液溶解样品,充分吹打混匀。 ②每1ml TRIzol加入2.0ml氯仿,剧烈震荡15s,室温放置5min。 ③4℃,10000g离心15min,此时RNA主要集中在水相中。 ④将水相转移至新的离心管中,加入等体积异丙醇,室温放置10min。 ⑤4℃,10000g离心10min,此时可在离心管底部观察到白沉淀,即为RNA。 ⑥用75冷的乙醇洗涤沉淀,4℃,7500g以下,离心5min,弃上清。 ⑦超净台中吹干,加入无RNase的水溶解。 (2)检测RNA质量的方法如下: ①凝胶成像:取适量RNA溶液加入电泳缓冲液后,跑琼脂糖凝胶电泳,如果28S和18S条带明亮、清晰,并且28S的亮度在18S条带的两倍以上,则认为RNA的质量是好的。 ②吸光度检测:使用紫外分光光度计检测RNA样品在260nm、280nm处的吸光度,若两者的比值在1.8~2.0时,可认为RNA纯度良好,蛋白质等其他物质的污染可以接受。 解析:
2、判断题(80分,每题5分)
1. 具有回文结构的DNA分子的碱基序列是镜像对称的。( ) 答案:错误
解析:具有回文结构的DNA分子的碱基序列不是镜像对称的。
2. 荧光原位杂交(FISH)可以把同一个基因定位到特定的染体位置上去。( )
答案:正确
澳门特别行政区区徽解析:荧光原位杂交是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术,是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,可以把同一个基因定位到特定的染体位置上去。 中小学资产管理系统3. 真核生物利用polyA聚合酶在新转录出的mRNA3′端加上polyA尾巴形成polyA+的mRNA。( )
答案:正确
单循环赛
解析:DNA序列中没有多聚T的序列,说明转录后加上了3′尾巴。加工过程首先是3′末端一些过剩的核苷酸被核酸外切酶切去,然后由多聚腺苷酸聚合酶催化,以ATP为底物,在mR
NA3′末端逐个加上腺苷酸,形成polyA尾巴。
4. RNA聚合酶Ⅲ识别RNA的双螺旋区。
答案:错误
解析:RNA聚合酶Ⅲ主要合成小RNA,如5SrRNA、tRNA等,合成过程中RNA聚合酶Ⅲ识别的主要为单链RNA。
5. 一染体DNA经内切酶SalⅠ切割后,产生了若干个具有黏性末端的DNA片段,将这些片段分别在T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环,然后导入受体细胞,都可以进行独立地复制。( )
答案:错误
解析:在T4 DNA连接酶的作用下,若干个具有黏性末端的DNA片段自身连接成环,导入受体细胞后,并不是都可以进行独立的复制。
盂兰盆节6. RNARNA双链和DNA双链具有不同的二级结构,DNA双链为右手螺旋,而RNARNA双
链为左手螺旋。( )
答案:错误
解析:RNA一般为单链长分子,不形成双螺旋结构。天然RNA只有局部区域由于RNA单链分子通过自身回折使得互补的碱基对相遇,通过氢键结合形成反平行右手双螺旋结构(称为茎)。这些双链结构是ADNA类型的结构。
7. DNA修复系统的作用是保证DNA序列不发生任何变化。( )
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