序列技术在现代生物学研究中发挥着越来越重要的作用。在进行序列分析之前,需要先选择合适的引物,以确保检测到所需的目标序列,并避免检测到不必要的杂交或引物间的相互杂交。本文将介绍主要使用的引物及其序列。 1. 基因测序引物
基因测序引物是用于测序DNA或RNA的引物。这些引物通常包括一个DNA或RNA序列和一个与之匹配的引物序列。常用的基因测序引物包括以下几种: - M13引物
M13引物是一种通用的测序引物,用于测序单链DNA。其序列为:5'-GTAAAACGACGGCCAGT-3'。
- T7和SP6引物
T7和SP6引物用于测序DNA文库中的克隆DNA。其中T7引物的序列为:5'-TAATACGACT
CACTATAGGG-3',SP6引物的序列为:5'-ATTTAGGTGACACTATAG-3'。
- M13F和M13R引物
桂林工学院学报 M13F和M13R引物也用于测序单链DNA。M13F引物的序列为:5'-GTAAAACGACGGCCAGT-3',M13R引物的序列为:5'-CAGGAAACAGCTATGAC-3'。
- T3和T7引物
T3和T7引物与RNA兼容,并用于测序RNA和RNA-DNA杂交分子。T3引物的序列为:5'-AATTAACCCTCACTAAAGGGA-3',T7引物的序列为:5'-TAATACGACTCACTATAG-3'。徐中波
2. PCR引物
PCR引物是用于荧光定量PCR、数字PCR、标准PCR等技术的引物。以下是几种常用的PCR引物:
湖北科技学院学报 - GAPDH引物
GAPDH引物用于检测人体组织中的GAPDH基因表达水平。其序列为:5'-GAAGGTGAAGGTCGGAGT-3'(前引物)、5'-GAAGATGGTGATGGGATTTC-3'(后引物)。
- 16S rRNA引物
16S rRNA引物用于检测细菌中的16S rRNA基因。其序列为:5'-CCAGCAGCCGCGGTAATA-3'(前引物)、5'-ACGGCATGTCTCCACG-3'(后引物)。
- 18S rRNA引物
微笑图书室 18S rRNA引物用于检测真菌和其他原生生物中的18S rRNA基因。其序列为:5'-GCAATTATTCCCCATGAACG-3'(前引物)、5'-GGTCGATCGAGGTCCTCAAA-3'(后引物)。
3. 其他引物
除了上述基因测序引物和PCR引物之外,还有其他一些引物用于特定的应用场景。以下是几种常用的引物:
- pUC/M13-m13-21引物
美国十次宜春院 pUC/M13-m13-21引物用于扩增pUC和M13噬菌体文库中的插入DNA。其序列为:5'-TGTAAAACGACGGCCAGTGAATTG-3'。
- GFP引物
GFP引物用于检测绿荧光蛋白(GFP)和其变体的表达。其序列为:5'-GGGAGGAGCTGTTCACCGGG-3'(前引物)、5'-GGCGGATCTTGAAGTTCACCTTGAT-3'(后引物)。
- β-actin引物
β-actin引物用于检测哺乳动物细胞中的β-actin基因表达水平。其序列为:5'-CCTTCCTGGGCATGGAGTC-3'(前引物)、5'-AGGTCTTTACGGATGTCAACG-3'(后引物)。
总结来说,选择适合的引物对于分子生物学实验的成功非常重要。以上列出的引物都是
广泛使用的方法,而且其序列也是经过验证的。根据您所研究的物种和应用场景选择合适的引物将有助于您获得最佳的实验结果。杨静雅