质 粒：1. 已纯化质粒大于20ul，溶于超纯水浓度大于100ng/ul；
2．大质粒必须注明载体长度;
菌 液：1. 请提供１ml以上过夜培养新鲜无污染菌液，用Ependorf管装，并注意封口，以免污染．保存时间较长的甘油菌，请重新摇菌后送样．
2．培养基和抗生素：本公司提供LB培养基和胺卞青霉素、卡那青霉素、氯霉素三种抗生素。若您的菌株培养时有其他要求，请你提供4～5ml培养好的新鲜菌液或沉淀下来的菌体。
3．请提供质粒的名称、抗性、插入片段的长度，指定确切的通用引物。 PCR产 物：1. 样品检测标准：上样3～5ul，琼脂糖电泳鉴定，为清晰可见的单一亮带。
2．不接受样品小于150bp、电泳检测有弥散的，多带的样品，非单一条带样品，建议克隆后测序。
3．未纯化的PCR产物样品，体积大于50ul，浓度大于50ng/ul；已纯化PCR产物体积为20ul，浓度大于50ng/ul，可取2ul样品电泳检测条带清晰PCR产物明亮，长片段需加浓度。不管测序是否成功，本公司都将收取纯化费用。
4．若您自己纯化，请一定要进行Agarose凝胶电泳方式纯化回收，溶解在超纯水中（勿用TE溶解），浓度＞30 ng/ul ，同时提供PCR引物。
5．长度超过1kb，需要2个以上的测序反应才能测通的PCR样品，建议克隆后测序，否则单覆盖难以得到包括PCR引物序列在内的完整序列号。
6．引物请提供20ul，浓度大于3μM。
二、免费提供通用引物列表：
T7；SP6；M13F；M13R；M13F（-47）；M13R（-48）；M13（-96）；T7TER；T3；S.TAG；A-FACTOR；PBV220F；PBV220FR；5’AOX；
3’AOX；PGEX-5’；PGEX-3；PEGFP-C-5’；PEGFP-C-3’；PEGFP-N-5’；PEGFP-N-3’；PCDNA3.1F；PCDNA3.1R
三、注意事项:
1．客户样品编号请用数字、英文字母（大写）或下划线，不超过5个字符；E-Mail要用大写字母填写，并要求字迹规范、工整、清楚。
2．T载体请注明是PGEM-T还是PMD18T、PUC18、PUC19。
3．M13＋/－请注明是M13F，M13R，还是M13F（-47），M13R（-48）。
4．一般测序样品浓度要求：100ng/ul。
5．若临时变更测序，请尽快电话，E-Mail通知无效，对于通知前已经安排的反应，照常收费。
6．超过3K需要测通的样品，请客户自己提供引物进行测序。
7．简并引物和随机引物不宜用于测序。
8．样品如需返还请填写备注栏，无特殊要求不返还。
9．所送样品及引物，我们将免费保存一个月，超过一个月后如客户无特殊要求，样品自动被销毁。
10．由于自带引物问题或样品本身原因（复杂结构，高级结构等）造成测序失败照常收费，非样品原因造成测序失败免费。
11．对于选择E-mail发送报告的，如对结果有异议，请在接到报告后3天内用电话联系我公司，未联系的则认为您接受结果与费用。
测 序 定 单
客户姓名： 必填 上位机软件 手机： 必填 科室电话： 必填 E-Mail（1）: 必填
单位科室： E-Mail（2）:
收样日期： 年 月 日 时 总反应数：
编 号 | 样 品 情 况 | 引 物 情 况 | 测 序 要 求 | 备 注 |
客 户 编 号 | 羞耻心公司编号 | ① 菌液 ② 质粒 ③PCR原液 ④PCR已纯化 | 插入片段长度（bp） | 抗生素 | 载 体 | 浓度 （ng/ul） | 体积 (ul) | ①自带引物 ②通用引物 | 名称 | 自带引物浓度 | ①正向 ②反向 ③双向 ④测通 | 特殊结构，GC rich， 我所认识的蔡孑民先生重复序列 |
必填 | | 必填 | 必填 | ①②样品必填 | ①②样品必填 | | | 必填 | 必填 | 必填 | 必填 | 必填 | 教学论坛
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总反应数：
客户签字：
豫公网安备41160202000603
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