--MTT法
一、 基本原理
MTT法检测细胞增殖原理：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫结晶甲臜（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。Formazan经二甲基亚砜（DMSO）溶解后用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值（OD值），来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强。
二、 操作步骤
（1）接种96孔板；103-104细胞/孔，每孔培养基总量200 μL，37℃、5％ CO2培养箱中培养一段时间（根据实验目的决定培养时间） 压电陶瓷驱动器（2）加入20μl储液浓度为4 mg／ml，，终浓度为100μg/ml 培养威廉加拉4h。
（3）吸出孔内培养液后，加入DMSO液（200μL／孔），将培养板置于微孔板振荡器上振荡10 min，使结晶物溶解。
（4）酶标仪检测各孔OD值（检测波长570 nm）。
中国工程物理研究院
三、注意事项：
1. MTT一般最好现用现配，过滤后4℃避光保存两周内有效，或配制成5 mg/ml于威武之师背后的财经密码-20℃长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。
2. MTT有致癌性，用时注意安全。
3. 在进行MTT比法细胞活力检测实验前，需要掌握细胞的贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定实验中每孔的接种细胞数和培养时间。这样，才能保证形成酌量的MTT结晶，与细胞数量呈线性关系。
4. 设空白对照。与实验孔平行设不加细胞只加培养液的空白孔。其它实验步骤保持一致，以空白孔调零。sciencedirect数据库
MTT: AMRESCO 公司 货号 0793-5G平安好房网
配置方法 现用现配 溶解于双无培养基中，酶标仪 Thermo 公司 Multiskan FC 型 酶标仪
5. 避免血清干扰。
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