标签抗体(Tag Antibody)可用于检测和纯化各种商品化表达载体上的标签序列,籍以分析检目的蛋白的表达含量及其功能。其原理是抗原—抗体反应,这些标签抗体可以高度特异地结合对应的标签融合蛋白。 亲和性标签
亲和标签大都有特异性的配基,利用这些配基可以方便的用亲和层析的方法对融合蛋白进行分离和纯化。
共同特点:
● 纯化方便,一般通过一步纯化就可以获得纯度和质量比较好的融合蛋白;
● 标签对目的蛋白的三维结构或是生物学活性影响很小;
● 标签易于切除;
● 离子交换层析纯化过程中可以对目的蛋白进行简单而精确的测量;
● 适用于大量不同蛋白质的表达。
Flag标签
Flag标签是由八个亲水氨基酸构成的一段寡肽,序列为Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,可用于蛋白纯化及检测。
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免疫宿主:小鼠
应用范围:WB,IP
工业设备应用说明:WB: 1:500 ~ 1:10000, IP: 1:200 ~ 1:2000
Lane 1: Flag Tagged Protein (0.80 μg)
Lane 2: Flag Tagged Protein (0.50 μg)风雨张居正下载
Lane 3: Flag Tagged Protein (0.10 μg)
M: Western Blot Marker
Using Anti- Flag antibody
His标签
往来业务核算
His-tag由人工合成的组氨酸首尾相连构成,通常由6个氨基酸(HHHHHH)组成,也有3个和8个的情况。另外,也存在一种由19个组氨酸构成的天然多聚组氨酸标签(HAT-tag)。
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神狐海域
Lane 1: C-His融合蛋白
Lane 2:N-His融合蛋白
Lane 3:Internal-His融合蛋白
稀释比例:1:3000
HA标签
HA融合蛋白也是一种小肽,由9个氨基酸组成( YPYDVPDYA),其来源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇。对外源目的蛋白的空间结构影响较小,容易构建成标签蛋白融合到N端或者C端。易于用抗HA抗体检测和ELSA检测。
c-myc标签
C-myc标签即人原癌基因产物myc蛋白表位,是一个由11个氨基酸残基构成的小标签,其序列为 GIu-GIn-Lys-eu- le-Ser-Glu-Glu-ALeu。这11个氨基酸作为抗原表位在不同的蛋白质框架中仍可识别其相应抗体。其对应单抗既可用于C-myc融合蛋白的免疫印迹和免疫沉淀,还可用于流式细胞术分析。C-myc标签也已广泛用于在酵母、细菌、昆虫及哺乳动物等表达体系中重组蛋白的检测和鉴定。
GST标签
GST即谷胱甘肽-S-转移酶,具有解毒作用,可将谷胱甘肽中的硫基转移至含硝基或卤化物的复合物中。其天然大小为26KD。
非亲和标签
非亲和标签的作用不是用来纯化重组蛋白,而是用于检测重组蛋白的表达、分布,帮助重组蛋白正确折叠以及保护融合蛋白免受宿主细胞降解等。
绿荧光蛋白( green fluorescent protein,GFP)
guardiumGFP是发光生物体内广泛存在的一类蛋白质,不需要激发即可发出一定波长的荧光,因此被广泛用于蛋白质在活细胞体内的空间定位、运动变化等的研究。