高中生物实验方法及试剂总汇

高中生物实验方法及试剂汇总
1.实验方法
  实验方法是整个实验设计的精髓,是做好实验设计的关键所在。现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总如下:
 (1)化学物质的检测方法:
①淀粉——碘液
②还原糖——斐林试剂、班氏试剂
③CO2——Ca(OH)2溶液酸碱指示剂
④乳酸——pH试纸
⑤O2——余烬复燃
⑥无O2——火焰熄灭
⑦蛋白质——双缩脲试剂
⑧染体——龙胆紫、醋酸洋红溶液
⑨DNA——二苯胺试剂
⑩脂肪——苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染
 (2)实验结果的显示方法:
①光合速率——O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量
②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量
③原子途径——放射性同位素示踪法
④细胞液浓度大小——质壁分离
⑤细胞是否死亡——质壁分离
⑥甲状腺激素作用——动物耗氧量,发育速度等
⑦生长激素作用——生长速度(体重变化,身高变化)
⑧胰岛素作用——动物活动状态
⑨菌量——菌落数或亚甲基蓝溶液褪程度
⑩大肠杆菌——伊红—美蓝琼脂培养基
 (3)实验条件的控制方法:
①增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿植物
②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境
蔡晓伟
渠道联盟⑤除去叶片中叶绿素——酒精隔水加热
⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光
⑦如何得到单光——棱镜散或彩薄膜滤光
⑧血液抗凝——加入柠檬酸钠
⑨线粒体提取——细胞匀浆离心
⑩骨的脱钙——盐酸溶液
⑩灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌,对不同材料,灭菌方法不同:培养基用高压蒸气灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌;双手用肥皂洗净,擦干后用75%酒精消毒;整个接种过程都在实验室无菌区进行。 
 (4)实验中控制温度的方法:
①还原糖鉴定:水浴煮沸加热
②酶促反应:水浴保温
③用酒精溶解叶中的叶绿素:酒精要隔水加热污水排放标准
④DNA的鉴定:水浴煮沸加热
⑤细胞和组织培养以及微生物培养:恒温培养
2.斐林试剂、班氏试剂与尿糖试纸
  这三种物质均可用来检验含醛基的有机物的存在,在医学上用来检验糖尿病,其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化,但成分略有不同:
 斐林试剂:即硫酸铜、氢氧化钠和酒石酸钾钠组成的蓝混合溶液。分为斐林试剂A和斐林试剂B,A为CuSO4溶液,B为氢氧化钠和酒石酸钾钠的混合溶液,使用时将A、B等体积混合即成斐林试剂。
 班氏试剂:即硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠组成的混合液,又叫本尼迪克特(Benedict)试剂,它与醛反应的结果是与斐林试剂一致的,只是比斐林试剂更稳定,所以在临床化验中更常使用。
 尿糖试纸:又叫硫酸铜试纸,呈白,带蓝斑点,用于糖尿病患者的尿糖测试。每片含
硫酸铜20毫克,枸橼酸300毫克,碳酸钠80毫克,氢氧化钠235毫克。尿糖试纸法快速、方便,试纸的正确使用方法为:将试纸条放在尿液中浸湿,一秒钟后取出,在一分钟内观察试纸的颜,并与标准板对照,根据不同的颜来确定尿糖阳性的程度。
3.斐林试剂和双缩脲试剂的比较
 相同点:①都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成;
     ②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.1g/mLNaOH溶液。
 不同点:①CuSO4溶液浓度不一样:斐林试剂乙液为0.05g/mLCuSO4溶液,双缩脲试剂B为0.01g/mLCuSO4溶液。
     ②配制比例不一样。
     ③使用方法不一样:斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用,双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后,再加入试剂B。
     ④鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。
     ⑤反应本质及颜反应不一样。
4.苏丹Ⅲ染液与苏丹Ⅳ染液的比较
  都是用来鉴定脂肪。苏丹Ⅳ染液更易溶于脂肪,所以染更深,同时要求染时间更短。
生物学中常用的试剂: 
1、斐林试剂: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红。 
2、班氏糖定性试剂:为蓝溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红沉淀。用于尿糖的测定。 
3、双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫。 
4、苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘黄(被苏丹Ⅳ染成红)。 
5、二苯胺:用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝。 
鉴定DNA的试剂——二苯胺试剂
A液:1.5g二苯胺溶于100mL冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸,用棕瓶保存。
B液:乙醛的体积分数为0.2
配制:将0.1mLB液加到10mLA液中,现配现用。
 
6、甲基绿:用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿。(甲基绿使DNA呈现绿,吡罗红使RNA呈现红。)
7苔黑酚——乙醇溶液(用于RNA的鉴定)
    硅酸铝耐火纤维毡溶解6克苔黑酚于是100毫升95%乙醇中,(可在冰箱中保存1个月)
850%的酒精溶液:在脂肪鉴定中,用苏丹Ⅲ染液染,再用50%的酒精溶液洗去浮。
975%的酒精溶液:用于杀菌消毒,75%的酒精能渗入细胞内,使蛋白质凝固变性。低于这个浓度,酒精的渗透脱水作用减弱,杀菌力不强;而高于这个浓度,则会使细菌表面蛋白质迅速脱水,凝固成膜,妨碍酒精透入,削弱杀菌能力。75%的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。
微分方程模型
1095%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。 
 
11、龙胆紫溶液:(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml)用于染体着,可将染体染成紫,通常染3~5分钟。
(也可以用醋酸洋红染冰醋酸45ML+55ML蒸馏水+0.5克洋红
    先将洋红溶于蒸馏水中,再加入冰醋酸充分摇匀后,加热煮沸 10分钟,待冷却后,即可使用。
12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶) 
13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。 
14、碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。 
15、丙酮:用于提取叶绿体中的素。 
16、层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用未来的冲击93号汽油)可用于素的层析,即将素在滤纸上分离开。 
17、二氧化硅:在素的提取的分离实验中研磨绿叶片时加入,可使研磨充分。 
18、碳酸钙:研磨绿叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的素受破坏。
 
19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验。 
20、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液:与鸡血混合,防凝血。 
21、班氏试剂:
    溶85克柠檬酸钠及50克无水碳酸钠于400毫升水中。另溶8.5克硫酸铜于500毫升热水中。将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠——碳酸钠溶液中,边加边搅拌。如有沉淀可过滤, 此混合液可长期使用。
22氯化钠溶液:①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、 0.015mol/L时DNA的溶解度最高,在氯化钠浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度最高。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。
23、有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1:16的比例混合 配成染液。
24、有丝分裂细胞解离液
    38%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成解离液。
24、卡诺氏固定液(用于细胞有丝分裂根尖的固定)
    酒精:冰醋酸=3:1(体积比)
25、20%肝脏研磨液
1份肝脏4份水。用剪子迅速将肝脏剪碎,先加少量的水研研磨,用剩余的水冲洗。
26、鉴定CO2试剂——澄清石灰水(Ca(OH)2溶液);酸碱指示剂。
取饱和石灰水澄清过滤,密封备用。

本文发布于:2024-09-22 23:37:55,感谢您对本站的认可!

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