黄烜裕、黄琳然
一、实验原理
双缩脲反应原理:
NH2—CO—NH—CO—NH2 +英文文献
双缩脲试剂(A液:0.1g/mlNaOH溶液; 紫络合物结构式
B液:0.01g/mlCuSO4溶液) ==紫络合物蛋白质中与双缩脲有类似的结构:肽键 —CO—NH— (至少
含有两个肽键才能进行双缩脲反应),因此使用可用双缩脲试剂检测蛋白质。
二、实验器材与试剂
岐山县中医医院
待测实验材料:氨基酸溶液、鸡蛋清稀释液、牛奶
器材:电子天平、称量纸、100mL烧杯2个、50mL烧杯、10mL量筒、5mL量筒、标签纸若干、试剂瓶2个、吸管2支、玻棒、试管若干
试剂:固态NaOH、无水CuSO4
三、实验步骤
1、配制双缩脲试剂:A液:质量浓度为 0.1g/mL NaOH ,取5g固态NaOH加蒸馏水溶解,稀释至50ml;B液:质量浓度为0.01g/mL CuSO4,取0.5g无水CuSO4溶于蒸馏水,稀释至50ml。
2、取二苯乙烯4支试管分别贴上标签,分别加入①蒸馏水②氨基酸溶液③鸡蛋清稀释液 ④牛奶 各2mL。
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3、分别向试管①~④试管加入双缩脲试剂A液2mL,振荡摇匀。
4、分别在①~④试管滴入4滴双缩脲试剂血管集束征B液,振荡摇匀。
5、观察并记录试验现象
四、预期实验结果:
① ② 号试管溶液呈蓝(无反应,Cu+溶液呈蓝)
③ ④青岛大学医学院学报 号试管溶液呈紫(双缩脲反应生成紫络合物)