探究斐林试剂和双缩脲试剂的使用条件作者:郭卫华来源:《中学生物学》2016年第01期 人教版高中生物必修1的“生物组织中还原糖、蛋白质的鉴定”实验对“斐林试剂”和“双缩脲试剂”的使用作了要求:① 斐林试剂鉴定还原糖时,必须将甲液和乙液混合均匀后使用,切勿分别加入生物组织样液中进行检测。② 双缩脲试剂鉴定蛋白质时,先向蛋白稀释液中加入A液(1 mL),均匀,再加入B液3~4滴。针对平时学生实验时反映出的很多问题,笔者进行了探索,旨在探究剂的使用条件,改进实验,确保实验顺利完成。 1 实验目的
尝试探究斐林试剂、双缩脲试剂的使用条件,进一步将本实验完善,为日后教学工作的改进奠定基础。
2 实验原理
可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红的Cu2
O沉淀。
葡萄糖+Cu(OH酷派n68)2葡萄糖酸+Cu2O↓(砖红)+H2O;
蛋白质+双缩脲试剂→紫。
蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫反应。蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+词牌名春作用,产生紫反应。
3 材料、试剂、器具
实验材料:新鲜去皮的梨汁、生豆浆、熟豆浆。
实验试剂:斐林试剂(甲液:质量浓度0.1g/mL NaOH溶液;乙液:质量浓度0.05 g/mL CuSO4溶液)、双缩脲试剂(A液:质量浓度0.1 g/mL NaOH溶液;B液:质量浓度新福林0.01 g/mL CuSO4溶液)、质量分数8%情感与形式的盐酸、蒸馏水等。
器具:试管、试管架、试管夹、烧杯、量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、打火机等。 4 方法步骤及现象(表1、表2)
5 对实验现象的分析
由表1的1、2号试管现象可看出,斐林试剂的使用顺序对实验结果有一定影响,但都能出现砖红沉淀,可能是待测液中的有机酸会中和一些NaOH,使产生的Cu(OH)2不足,所以2号试管砖红沉淀会少些。1、宝能收购万科3号试管现象说明斐林试剂实为新制的Cu(OH)2悬浊液,不需提供酸性环境,加入盐酸会将新的Cu(OH)2分解,致使还原糖无法和斐林试剂反应,所以无砖红沉淀。从1、4中华护理杂志号试管现象可知,加热方式不同对实验结果有一定影响,水浴加热比直接用酒精灯加热更理想,受热更均匀,也更安全。1、5号试管说明只加乙液实验无法进行,即还原糖不能单纯的与Cu2+发生反应并生成砖红沉淀。