质量监管
54 2020年11月（上）/ 总第272期
现有一种荧光染料称为荧光增白剂（f l u o r e s c e n t brightener），也被叫为白染料，是一种复杂的有机化合物。它能激发入射光线从而产生荧光，对于染的物质可以得到荧石般的闪闪发光的效应，让人肉眼看上去会使物质很白，从视觉上达到增白的效果。现在市场上荧光增白剂约有多种结构，大概二百多种化合物，一千多种扥商品。常用荧光增白剂的品种主要产品见表1。 西方国家对荧光增白剂的毒性已经进行了研究，发现多种荧光增白剂对动物具有光毒和光敏的作用，这会导致致癌和肿瘤的形成。经研究得出，荧光增白剂中还有一些活跃分子，易迁移到角质层或血液里，对人体的免疫力会有大大的影响。荧光增白剂可能会对皮肤黏膜有刺激作用，可能会出现红肿瘙痒、感染出血和溃烂等症状，严重点会引发变态反应性皮炎或接触性皮炎等疾病[1,2]。 荧光增白剂VBL 主要用于纤维素织物和纸张的增白，浅纤维素织物增艳，以及拔染印花白地增白等。还广泛用于肥皂、合成洗涤剂中以增加被洗涤物的白度。荧光增白剂VBL 的上染性能基本与染料相似，可用食盐、硫酸钠等无机
■周 佳1,2 汤 娟1,2 富 薇3 丁友超1 钱 凯1 董绍伟1 曹立华1
（1.南京海关工业产品检测中心（原江苏出入境检验检疫局工业产品检测中心）；
2.南京金检检验有限公司；
3.中国合格评定国家认可中心）
摘 要：建立了牙膏中荧光增白剂的高效液相谱（HPLC-FLD）的检测方法。牙膏样品经无水硫酸钠搅拌后，由甲醇超
声提取。采用Waters XBridge TM -C18（150 mm×4.6 mm×5μm）为谱柱进行分离，以水为流动相A、甲醇为流动相B，进行梯度洗脱，激发波长是：350 nm、发射波长是：430 nm。荧光增白剂在短时间内完成谱分离，检出限（LODs，S/N=3）和定量限（LOQs，S/N=10）分别为0.03～0.65 mg/L 和 0.1～2.0 mg/L，荧光增白剂相关系数（r 2）均不小于0.999。以阴性牙膏样品为基质，添加了3个不同浓度的荧光增白剂，其平均回收率分别为89.4%～98.3%，相对标准偏差（RSD）是4.7%～6.7%（n=6）。本方法简单、快捷，解决了牙膏不好分散的问题，为牙膏的质量安全监控提供了参考。
关键词：高效液相谱；荧光增白剂；牙膏
表1 常用增白剂的相关信息
序号名称
相关标准14,4’-双[(6-苯胺基-4-甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)氨基]二苯乙烯-2,2’-二磺酸二钠盐（MST）
HG/T 3967-20072二苯乙烯双三型荧光增白剂勃兰克福（ABP）
血红蛋白浓度HG/T 3727-200334,4’-双[(4-苯胺基-6-羟乙基氨基-1,3,5-三嗪-2-基)氨基]二苯乙烯-2,2’-二磺酸二钠盐（VBL）GB/T 10661-201042,2’-[(1,1’-联苯)-4,4’-二基二-2,1-乙烯二基]双苯磺酸二钠盐（4BK）
HG 3726-200652,2’-(1,2-亚乙烯基)二[5-[[4-[二(2-羟乙基)氨基]-6-(苯氨基)-1,3,5-三嗪-2-基]氨基]]苯磺酸（CBS）HG/T 3725-200364,4’-双[(4-苯胺基-6-吗啉基-1,3,5-三嗪-2-基)氨基]二苯乙烯-2,2’-二磺酸二钠盐（CXT）HG/T 3675-2000
71-(对磺酸钠苯基)-3-对氯苯基-5-苯基-4,5-二氢吡唑啉（WG）-81,2-双(5-甲基-2-苯并噁唑基)-乙烯（DT）HG/T 2556-199397-二乙氨基-4-甲基香豆素（SWN）
HG/T 4034-2008
102,2’-(2,5-二苯基硫代)双[5-(1,1-二甲基乙基)]苯并恶唑（OB）
-112-[4-[2-[4-(2-苯并恶唑基)苯基]乙烯基]苯基]-5-甲基苯并恶唑（KSN）-121,4-双(2-氰基苯乙烯基)苯（ER-Ⅰ）HG/T 2950-2000131-邻氰苯乙烯基-4-对氰苯乙烯基苯（ER-Ⅱ）HG/T 2950-2000
142,2-(1,4-亚萘基)双(苯并恶唑)（KCB）
-154,4’-双[2-(2-甲氧基苯基)亚乙基]-1,1’-联苯（OB-Ⅰ）HG/T 3703-2009
16
冬眠疗法2,2’-[1,2-亚乙基二(4,1-亚苯基)]双(5-甲基苯并恶唑)（OB-Ⅱ）
-
周佳，汤娟，富薇等：牙膏中荧光增白剂的检测
盐促染，用匀染剂作缓染剂，温度和时间也影响上染程度。4BK主要用于合成洗涤剂、香皂和肥皂的增白，也可用于棉麻丝锦纶羊毛和纸张的增白；适用于棉、涤棉混纺织物的增白以及棉混纺织物的一浴增白；广泛用于洗涤剂、漂染、造纸、染料等行业。国家安全生产监督管理总局制定的《职业病危害因素分类表》中，将荧光增白剂定为定性的化学毒物。目前，荧光增白剂的检测一般是纸张[3,4]，包装材料[5-7]，洗涤用品[8]等，荧光增白剂的相关专利见表2。
牙膏是我们经常用到的日用品，牙膏是直接接触我们人体的口腔，存在了吞到人体内部的风险，因此牙膏的安全性对于我们来说至关重要。本研究针对牙膏这种特殊的基质，建立牙膏中荧光增白剂的检测方法，对牙膏中的质量安全的监控提供一定的检测依据。
1 实验部分
1.1仪器、试剂与材料
1200型高效液相谱仪，配备F L D检测器（美国Agilent公司）；Milli-Q去离子发生器（美国Sigma公司）；PL602-L和ML54型电子天平（感量0.01 g和0.0001g，梅特勒-托利多上海有限公司）；KQ-250DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
甲醇、乙腈和乙醇（谱纯，德国Merck公司）；无水硫酸钠（分析纯，南京化学试剂股份有限公司）。
荧光增白剂标准品信息见表3。
表3 2种荧光增白剂标准品的详情
No.Name CAS C.I.Manufacturer Purity/% 1VBL12224-06-585Transfar98.0
24BK27344-41-8351SIGMA99.0
所有样品均来自超市购买与日常检测样品。
实际样品：239个牙膏样品样品均由南京海关工业产品检测中心提供。
1.2标准溶液的配制
标准储备液：根据各标准品纯度换算，分别准确称取一定量的荧光增白剂标准品，分别用甲醇溶解并定容至10 mL，配制成质量浓度均为1000 mg/L的单一标准储备液，于4 ℃冷藏保存。如有需要，稀释至需要的浓度。
1.3 样品前处理
称取1.0 g（±0.01 g）样品于带盖玻璃试管中，加入10g 无水硫酸钠进行搅拌，搅拌至牙膏和无水硫酸钠完全融合，这时样品变成含有牙膏的无水硫酸钠晶体，之后加入20 mL 甲醇溶液，加盖，在70 ℃水浴中超声30 min，冷却至室温后，分离出清液，重复上述步骤一次，合并清液，并定容至50 mL，取部分上述溶液经0.22 μm 滤膜过滤，进HPLC检测。
1.4 仪器条件
谱柱：Phenomenex Gemini 5u C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：A-水，B-甲醇。梯度洗脱程序见表4；流速：1.0 mL/min；进样体积：10 μL；柱温：30 ℃；激发波长：350 nm，发射波长：430 nm。
表2 荧光增白剂检测的相关专利
专利号专利名Int.CI. 200710027950.3一种快速检测纸张及纸板中荧光增白剂的方法及装置G01N 21/64(2006.01)
200710054256.0卷烟用纸中荧光增白剂VBL、ABP的定量测定方法G01N 30/06(2006.01) G01N 30/02(2006.01)
200720118163.5便捷式荧光增白剂速测仪G01N 21/64(2006.01) 200810107169.1食用菌荧光增白剂检测仪G01N 21/64(2006.01) 200820113334.X食用菌荧光增白剂检测仪G01N 21/64(2006.01)
201010561153.5一种鉴定水溶性二苯乙烯双三嗪类荧光增白剂的谱定性检测方法G01N 30/06(2006.01) G01N 30/02(2006.01)
201110402220.3生活用纸制品荧光增白剂现场检测仪G01N 21/64(2006.01)
201110423640.X一种卫生纸荧光增白剂自动检测纸筒A47K 10/22(2006.01) G01N 21/64(2006.01)
201120529318.0一种卫生纸荧光增白剂自动检测纸筒A47K 10/22(2006.01) G01N 21/64(2006.01)
201210011466.2荧光增白剂现场检测仪G01N 21/64(2006.01)
201210107018.2透明外图层组合物及其使用和检测方法G01N 21/64(2006.01) C09D 11/02(2006.01)
201210281660.2荧光增白剂VBL检测试剂盒及其制备方法G01N 33/543(2006.01) G01N 33/577(2006.01) G01N 33/545(2006.01)
201210281736.1荧光增白剂CBS-X检测试剂盒及其制备方法G01N 33/543(2006.01) G01N 33/577(2006.01) G01N 33/545(2006.01)
201210579988.2纺织品上荧光增白剂的快速检测方法G01N 21/64(2006.01)
201220392612.6检测荧光增白剂VBL的试剂盒
G01N 33/577 (2006.01)
G01N 33/543 (2006.01)
2020年11月（上）/ 总第272期55
周佳，汤娟，富薇等：牙膏中荧光增白剂的检测
表4 LC梯度洗脱程序
时间/min A/%B/%
07525
27525
52575
102575
117525
147525
1.5 仪器谱图
图1 标准物质的谱图
2 结果与讨论
2.1样品分散
由于牙膏基质的特殊性，需要将牙膏先进行打散之后再进行样品的测试，如果样品未打散就进行前处理，有可能会出现目标物提取不完全的可能。因此，先用无水硫酸钠进行预处理，一方面对牙膏进行打散，另一方面对牙膏中的水分进行去除，从而达到保护仪器的作用。化工学报
2.2谱柱的选择
比较了常用的4种谱柱对荧光增白剂的分离情况，即Kromasil 100-5C18，Agilent Eclipse XDB-C18、Waters XBridgeTM C18和Phenomenex Gemini 5u C18。结果表明，VBL在Waters柱上不能够顺利出峰，Kromasil、Agilent、和Phenomenex柱能使荧光增白剂达到基线分离，但综合比较，Phenomenex柱的分离效果更佳，因此本次研究选用Phenomenex Gemini 5u C18作为分离谱柱。
2.3方法的线性范围和定量限
将上述的荧光增白剂配成混合工作液进仪器分析，再按1.4仪器分析条件进行分析。荧光增白剂采用外标法定量，以各分析物的浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，各分析物的线性方程、线性范围、相关系数以及以信噪比为10（S/N=10）计算得到荧光增白剂的定量限见表5，由表可
知，相关系数均不小于0.999。
表5 17种荧光增白剂的线性范围、回归方程、相关系数（r）
及定量限(LOQ)
化合物
线性范围
/mg/L
回归方程r
LOQ
/mg/kg VBL0.1-20Y=178.6366X+2.48280.9992 2.0
4BK0.005-1Y=164.6022X+4.42910.99960.1
2.4 方法精密度及回收率
根据研究对象的来源，选择阴性的牙膏为样品基质进行加标回收和精密度实验。根据每种分析物的定量限，在上述样品中分别作不同的3个添加水平，每个作6次平行，实验所得回收率及精密度见表6。牙膏1荧光增白剂的平均回收率为89.4 %~96.6 %，RSD在4.7 %~6.7 %之间，牙膏2中荧光增白剂的平均回收率为90.9 %~98.3 %，RSD在4.8 %~6.3 %之间。
结 论
本文采用FLD检测器建立了高效液相谱测定牙膏中荧光增白剂的方法，并对牙膏前处理进行了优化，解决了牙膏难分散，过滤难等问题。结果表明，该方法操作简单，线性关系良好，重复性好，具有较高的准确度和灵敏度，对牙膏中的质量安全的监控提供一定的检测依据。
参考文献棕树蛇
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表6 牙膏中7种荧光增白剂的加标回收率及相对标准偏差（n=6）
样品化合物添加水平
/mg/kg
回收率
/%
RSD/%样品化合物
添加水平
/mg/kg
回收率
/%
RSD/%
牙膏1VBL
589.4 4.8
牙膏2
大河茶馆VBL
592.3 5.4 1096.6 6.71090.9 6.3
2095.3 5.92095.6 5.8 4BK
0.291.5 5.2
4BK
0.294.2 4.8
193.7 4.7196.7 5.2
292.8 6.3298.3 5.1
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