血
凝
项
目
标
准
操
作
规
程
1．一般注意事项
1.1样品采集
●静脉抽血；
●穿刺要一针见血，避免淤血，气泡，溶血和组织液污染；
如果从导管取样，则需用生理盐水冲洗管道，前面5ml血不能使用；
●采血量必须准确，如果少于计划量的90%，则不能使用；
●不能在静脉穿刺部位或附近部位采样。
1.2样品处理
●使用3.8%或3.2%(W/V)枸橼酸钠溶液作为抗凝剂；cn-kix
●血样与抗凝剂的比例为9：1，如果血球压积﹤20%或﹥55%，则需调整这个比例，
谐波电流
方法是：0.00815X血液毫升数X(100-压积)=抗凝剂毫升数；
——采样后60分钟内进行；
——离心速度为1000g/10分钟
●盛血浆容器应加塞，防止PH改变；
●血浆应保存在2-8℃；
●血浆存放时间不能太久；
●低温保存的样品，要在37℃迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。
●与样品接触的所有器材（注射剂，样品管，检测杯等）必须采用塑料袋或硅化玻璃材质。
●全部器材均不得含去污剂或清洗液。
●抗凝剂：草酸钠、EDTA、肝素不适于作抗凝剂；
●黄疸，脂血，重度溶血和冰冻血浆影响测定结果不准；
●使用纤溶药物，如双香豆素，链激酶，尿酶等可使凝固时间延长；
●FDP增加使凝固时间延长；渗透率
●某些药物，如口服，雌激素，天门冬酰胺酶，钠络酮等影响测试结果；
数字高程图●样本采集和处理不当，都会使凝固时间缩短或延长；
●妊娠和急性炎症会影响某些测试结果。
1.4干粉试剂及血浆溶解
●保证干粉完全溶解；
●溶解时，轻轻转动容器，避免剧烈震荡；
●确认溶剂种类，一般溶解液包括：蒸馏水/生理盐水/缓冲液/厂家特定溶解液，按说明书选择；
复溶后，室温放置5-10分钟后方可使用
二．具体项目操作注意事项
1.PT凝血酶原时间
I. 概述
凝血酶原时间(Prothrombin Time)测定用来作为外科手术前对某一凝血因子的评价，以及用于监视抗凝，当进行凝血酶原时间测试时，对于正常结果需有2、3级所有因子。因此，该实验对因子I、II、V、VII和X的量减少或不足是很灵敏的。
除了因子IX，凝血酶原时间测试对于其它所有因子缺乏是灵敏的，它已被证明在监视抗凝是有效手段。
凝血酶原时间测定也用于因子II、V、VII和X的定量分析(因子分析)。
II.试剂
进博会成果丰硕
干粉试剂需复溶，液体试剂直接使用，使用前轻轻混合，可使用一些备件如搅拌。使用期间保持适当的悬浮液状态。如质控结果在范围之外，或试剂颜发生变化，可能表明产品变质。然而，差的性能、结果也可能是由于其他因素包括试验系统引起的。
警告：PT-DS试剂含有叠氮钠，勿服、勿接触皮肤和黏膜。
III. 样本收集
3.8%(0.109M)枸橼钠做为抗凝剂。避免溶血和其他组织液的污染。样本体积不得少于所需体积的90%。在3000×g下离心10分钟，如样本在
22—24℃下，须在2小时内测定。有关样本收集和储存的详细资料，请参见NCCLS文件。
IV. 步骤
提供材料PT试剂
另需材料：
①纯化水
②合适的计时器
③精密移液管：0.1ml和0.2ml
④正常和异常质控物，（凝血质控血浆三个水平)
PT适合于手工、仪器、光度计和其它凝固的测定方法。
手工方法
新一代的洗衣粉
A：在37℃预热PT试剂；
B：加0.1ml血浆到比杯中，在37℃下预热；
C: 用力加0.2ml预热的PT试剂到血浆中凝结形成，并记录时间建议至少使用一正常和一异常对照血浆，每40份病人样品至少一次轮换，逐日测定对照血浆，建议每个实验室应做好室内质控范围。
V. 结果
用最近的0.1秒报告每个血浆的凝固时间，所得PT时间结果与正常参考范围值一起列入报告。(勿报告相对于商业质控血浆凝结时间的病人比值。质控仅仅是为了保证试验系统的准确性。)
VI. 局限性
血凝生物化学包含一系列受许多预试验条件影响的反应。这些变异性必须被控制，以获得好的结果：
样本收集
勿延迟血液与抗凝剂的混合；
避免样本产生泡沫；
用塑料或硅硼酸盐玻璃容器；
混浊、溶血、脂血或黄疸的样本，可能会引起错误结果；
冷冻和解冻包含残留细胞血浆，会裂解细胞膜而影响结果；
急性炎症反应由于纤维蛋白原的升高，会缩短PT结果；
红细胞压积在20—55%范围以外，所加抗凝剂需调整比例。
技术：
如果血浆暴露到空气中pH将升高；
PT工作要求37℃±0.5℃。经常检查加热部分的温度。在4—8℃保持的血浆可能会引起冷激活而导致PT缩短；
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