纤维蛋白原FIB测定简介
用途
概述和解释
纤维蛋白原降解见于：
a)获得性低纤维蛋白血症或无纤维蛋白血症
获得性纤维蛋白原缺乏见于凝血酶（凝血病理性消耗，如产科术后），蛇毒或纤溶酶（链激酶或尿激酶或tPA产生的原发性纤维蛋白溶解亢进）引起血管内纤维蛋白原水解。而且，中度低纤维蛋白原血症见于合成减低（急性或慢性肝病），血容量降低（如腹水或急性出血，红斑症）或降解增加（休克或肿瘤）。 b)先天性低纤维蛋白原血症和无纤维蛋白原血症
纤维蛋白原水平暂时升高见于纤维蛋白原作为“急性相蛋白”时：
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a)一过性高纤维蛋白原血症可见于手术、创伤、心脏病发作和感染。
b)持续性高纤维蛋白原血症可见于肿瘤和慢性感染性疾病。
纤维蛋白原水平随年龄轻度增高。
纤维蛋白原水平增高有心血管疾病危险性。
方法学原理
纤维蛋白原是一种蛋白质，因凝血酶的作用使可溶性蛋白质转换成不溶性多聚体，形成纤维蛋白凝块。稀释血浆的凝血酶凝固时间与纤维蛋白原血浆含量成反比。根据此原理，Clauss建立了一种简单的定量纤维蛋白原方法，即加入过量的凝血酶测量稀释血浆的凝固时间。然后，与纤维蛋白原标准品的凝固时间进行比较。 试剂成分
凝血酶试剂：冻干的牛凝血酶（约100NIH单位/ml）制剂，含稳定剂和缓冲液。
屈服极限
纤维蛋白原标准品：枸橼酸抗凝血浆（人），含HEPES缓冲液，稳定且冻干。纤维蛋白原含量采用可凝固蛋白测定方法。瓶标签上注明标准品浓度。
缓冲液：2.84×10-2M钠溶解于1.25×10-1M氯化钠溶液中，pH7.35±0.1。
警告和注意事项
1.仅适用于体外诊断。
2．纤维蛋白原标准品含有人源性物质。当作感染性物质处理。每位供血者或供血个体都经EU或FDA认可的体外诊断检测方法检测，皆为HIV1、HIV2、HBV及HCV阴性。因为至今仍没有一种方法可以完全排除传染性抗原的存在，因此所有人源性的血制品都应该谨慎处理。
非人类
3．缓冲液不能用于人体或动物体内或体外使用。多次移液时应避免制品的污染。制剂内可见微生物污染就不能使用。
标本的收集与准备
混合9份新鲜病人血液和1份枸橼酸钠抗凝剂（普通血液采集系统）。
采集后，血液标本尽快按1500×g，至少离心10分钟。关于血液采集的可选方案，见CLSI文件H21-A5。如果立即进行试验，血浆可留在压积细胞表面或分离出来。为了分离血浆，采用塑料移液器，取出血浆到塑料试管中，冷藏保存，以备测试。不能放在冰上。虽然研究证明，贮存在4℃血浆标本在72小时内纤维蛋白原无显著变化，但是推荐标本采集后尽快完成测试。
操作步骤
手工法：
用缓冲液作1：10稀释病人和质控血浆。
用缓冲液按1：4至1：32比例稀释纤维蛋白原标准品。每次采用清洁移液头，小心混合，然后丢弃移液头。
***每个标准稀释度的纤维蛋白原含量与1:10稀释有关，通过乘以纤维蛋白原标准品浓度的相近的转换因子。试验中替代标准稀释的是1：10稀释的病人或质控血浆。在双对数纸上，点上5个浓度的平均凝
固时间。在x轴上记录纤维蛋白原浓度，在y轴上记录时间，秒数。连接各点制成参考曲线。
注：推荐每个纤维蛋白原标准品每个稀释度和病人标本和质控血浆一样进行双份测定。
在更换设备或新批号凝血酶试剂时应重新计算参考曲线。
内部质量控制
每次校准和每天每8小时应运行2种质控物（1份为正常范围，另一份为病理范围）。质控物必须和标本一样处理。每个实验室应建立自身质控范围，即采用厂商提供的质控物的靶值和范围的均值，或者实验室建立的均值和可信范围。如果质控测定值超出可信范围，应核查试剂、校准曲线和凝血分析仪。
建议在报告病人结果前，记录纠正和排除问题的每步操作。
结果计算（手工方法）
病人血浆中纤维蛋白原含量测定以g/L报告，通过1：10稀释血浆凝固时间制作的校准曲线得出。若纤维蛋白原值超过8g/L：任何病人出现极短的凝固时间，血浆作1：20倍稀释（0.1ml＋1.9ml 缓冲液）替代1：10稀释。曲线上读取的结果乘以稀释因子2。
行政职务举例：
凝固时间为6.0秒，在给定校准曲线上指示纤维蛋白原浓度约为4g/L。若作1：20稀释，则读数应乘以2：
4g/L×2＝8g/L
若纤维蛋白原值低于0.5g/L：1:10稀释的病人血浆的凝固时间延长，作1:5（0.2ml＋0.8ml缓冲液）或1:2（0.4ml＋0.4ml缓冲液）稀释。曲线上读取的结果除以稀释因子（1：5倍稀释用2，1：2倍稀释用5）。
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举例：
若采用1：5稀释，读数除以2：
0.9g/L÷2＝0.45g/L
夺命连线
病人血浆用1:2仍未凝固，提示纤维蛋白原浓度小于0.15g/L或纤维蛋白原异常。
操作的局限性
结果受病人血浆中肝素或纤维蛋白（原）降解产物的影响。这些物质的水平增加会导致假性低纤维蛋白原水平。
检测结果须结合患者病史、临床表现及其他症状作出合理解释。
预期值
1.8～3.5g/L
每个实验室必须建立自身标本体的参考范围，因为不同实验室之间正常值不同。
详细的性能特征
参用凝血酶凝固时间方法显示与其他常用纤维蛋白原定量方法有很好相关性。
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