14种肠道菌选择培养基(大连医科大学版本)

肠道菌分离培养
1大肠杆菌培养基EMB (伊红美兰琼脂——成品培养基):蛋白胨 10g、乳糖5 gK2HPO4浓缩铀 2g、伊红Y 0.4g、美兰0.065g、水 1000mlPH 7.2
DHL培养基:成分及调整方法:Meat extrct 3100g,蛋白胨20g,乳糖南京广播学院10g, 蔗糖10g,脱氧胆酸钠1gSodium thiosrlfate 2.30g,柠檬酸氨1g, 柠檬酸钠1g,中性红0.03g,琼脂15g,蒸馏水1000ml,pH7.4,将以上成分加温溶解,倒平板。培养基长期放置(3 周以上),分注前有必要灭菌。
2链球菌培养(TATAC)蛋白胨15g、胰蛋白胨10g 酵母浸膏10g、蔗糖 1g、七叶苷1g 琼脂16g、蒸馏水1000mlPH 7.67.8,马血清50ml
TATAC 添加І  22m lTA TAC 添加液Ⅱ 20m l将马血清及各添加液以外的成分加温溶解 将其pH 调整至7.6 - 7.8121.3 20min 灭菌。待其冷至50℃左右加入马血清及各添加液充分混合后分注于平皿中。
添加液І:叠氮钠0.45g,谷氨酸钠30g,蒸馏水100ml
溶解:100 30min煮沸,冷藏
添加液Ⅱ吖啶橙 0.01gTTC 0.1g、结晶紫(0.65%液)1.0ml1.65g,蒸馏水100ml,溶解后冷藏
3葡萄球菌培养基BP 营养琼脂粉41g、氯化理5g、苯乙醇2.5ml、卵黄液50ml、精制水1000ml。(10%—15%NaCl
将卵黄液以外的成分加温溶解后,121.3 20 分钟灭菌。待其冷至50℃左右加入卵黄液充分混合后分注于平皿中。
葡萄球菌选择性培养基(Mannitol salt agar 高盐甘露醇)牛肉膏 1.0 g、蛋白胨10.0gNaCl 75.0g、甘露醇 10.0g、酚红0.025g、琼脂15.0g、蒸馏水1000mlPH 7.5
4酵母菌选择性培养基土豆浸出液4.0g、葡萄糖20.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1000mlPH 6.0,制作方法:加热溶解—PH调整灭菌、加入10%酒石酸14ml
5Lbs LC(乳杆菌培养基):琼脂 25g,蛋白胨 10g,肉膏10g,酵母浸膏5g,葡
萄糖20g,吐温-80 lmlK2HPO4 2g,醋酸钠5g柠檬酸三氨2gMgSO4·7 H兰州石化研究院2O 200mgMnSO4·4 H2O 50mg,醋酸3.7ml,精制水1000ml 加热溶解修正PH6.06.5121.3℃,20分钟灭菌。待冷至50℃左右,加入醋酸。充分混合后,分注于平板。
6优杆菌选择性培养基(CS培养基):成分及调整方法基础EG培养基1000ml, CS 添加液50mlL-半胱氨酸·HCl·H2O 0.5g,马血(羊血)50m l。充分混合后分注于平皿中。
CS 添加液丙酸钠30g,用约80ml 的灭菌蒸馏水溶解。将硫酸新霉素0.4g、粘菌素0.02g、硫酸链霉素1.0g、蒸馏水100ml溶解后加入烧瓶中。再用灭菌蒸馏水将液体的总量补至100ml
7VS(韦荣氏小球菌):胰胨5g,酵母浸膏 3g,硫乙醇酸钠075g ,煌绿(0.1%)lml,吐温-80 1g50%乳酸钠25ml,琼脂20g夹竹桃霉素(1%)3ml,羊血50mlPH7 5。后两者后加,倒成平板。
8PMS(消化球菌、巨球形菌选择培养基):EG琼脂培养基1000mlPMS添加液 10ml
PMS添加液:结晶紫70mg,无粘菌霉素50mg,溶于100ml精制水内。
9Bds(类杆菌选择性培养基):
配方一EG琼脂培养基 1000mlBds+添加液 50ml
EG琼脂培养基:牛心浸液930ml,胰胨10g,酵母浸膏5 gNa2HPO4 4g,葡萄糖0.5g,可溶性淀粉0.5gL-半胱氨酸0.2g(预先用智勇大冲关2009 110N HCl溶解)琼脂20gL一半胱氨酸HCIH2O 0.5g,羊血50mlpH7.67.8
L一半胱氨酸及羊血以外的成份,加热溶解修正PH121.320分钟灭菌,冷至 50C时,加 L-半胱氨酸及血。
Bds添加液:牛磺胆酸钠 5g,加入 80ml温水中使之溶解,然后加 0.5%煌绿水溶液 l ml和新霉素1g,再以10NaOHPH使液体呈透明的绿为止。最后用精制水加至100ml
配方二:
10梭状芽孢杆菌选择性培养基
NN培养基):蛋白胨40gNa2HPO4gKH2PO4 1.0gNaCl 2.0gMgSO4 0.1g、葡萄糖2.0g、琼脂25g、蒸馏水1000mlPH 7.6
制作:加热溶解——PH调整——灭菌
添加液:纯卵黄液50ml、硫酸新霉素(2%)10ml混匀
11梭菌选择性培养基(Clostrisel琼脂)李博祥
Cd’RCN)(梭菌选择性培养基):EG琼脂 1000ml,吐温80 0.5g1%利福平(RifamPicin0.5ml1%粘杆菌素(Colimycin l ml 1%新霉素 20 ml pH7.6
除血、抗菌素外,加热溶解,冷至 50℃时,再加血及抗菌素。
制备:水浴中加热溶解,调PH7.0121.3℃灭菌15分钟
12EC(肠球菌培养基):胰胨2g,酵母浸膏0 05g ,葡萄糖0.2g Na2HPO4 004gKH2PO4 0.04g,琼脂2g,精制水100mlPH74。加热溶解修正PH815分钟灭菌,冷至45℃-50℃时加NaN3TTCNaN3 40mg04mgml)和TTC10mg0.1mgm
l)。
13BS(改良法)双歧杆菌选择培养基西红柿汁(500g西红柿加1000ml水,熬成粘稠汁,纱布过滤,而后滤纸过滤,高压灭菌,4℃保存)200ml,蛋白胨15g,酵母浸膏6g,葡萄糖20gNaCl 5g,吐温80 1g,可溶性淀粉0.5g,琼脂20g,精制水800ml 溶解后,冷至 50C左右时,加 BS添加液 50ml,倒平板,PH6.8
BS添加液:丙酸钠 30g 90ml水,充分溶解,然后加新霉素400mg,巴龙霉素100mg,氯化理6g,最后加精制水至100ml,冰箱内保存。
14、FS(梭杆菌选择性培养基):EG 1000mlFS 添加液 10ml
FS添加液:结晶紫 70mg,万古霉素 50mg,硫酸新霉素 300mg,溶于弱碱性水中,总量100ml
15、稀释液配制:KH2PO4 4.5g  Na2HPO4 6g L-半胱氨酸马俏0.5g,吐温-80 0.5g,琼脂 1g,精致水1000ml121.3 20分钟灭菌,备用。

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