班级：09生科3班 学号：200900140157 姓名：俞华军 时间：2011/03/17
一、实验目的
1. 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
2. 掌握估测、比较各类物质进入细胞速度的方法。
二、实验原理
将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的溶质不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以促使水分进入细胞，引起溶血。由于溶质渗入速度不相同，因此溶血时间也不相同。因此，溶血现象可以可用于粗略判定物质穿膜的速度快慢和时间。 影响物质穿膜能力大小的因素主要有三个：一是物质脂溶性的大小，因为膜骨架是有脂双层分子构成的，所以脂溶性物质易于穿过细胞膜；二是分子体积大小，较小的分子易穿过细胞
膜；三是物质带电状况，因为细胞表面一般带电，不带电的物质易进入细胞。
判定细胞溶血不溶血的方法：溶血的溶液红的程度更高，且溶液发亮，透明度也更高。二是可以在显微镜下观察细胞的形态。细胞破裂后细胞形态并没有发生很大的变化，而是膜结构上有一个小口，膜还是有结构的，只不过体积变小了。
需要说明的等渗溶液中细胞也会是破裂的，因为生活状态下膜两侧不断交换物质，代谢产物的积累使细胞渗透压的平衡破坏，同时有些代谢物质对细胞是有毒性的，所以长时间放置会使细胞破裂，所以做等渗实验时间不宜超过1h。
三、实验材料
试剂：鸡血，0.85%氯化钠溶液，0.0085%氯化钠溶液，0.8mol/L甲醇，0.8mol/L丙三醇，6%葡萄糖溶液，2%Triton X-100
用具：显微镜、粗天平、载破片、盖玻片、滴管2支、离心管2支、离心机、9试管、磁力搅拌器。
四、实验步骤
1、 取鸡血2-3ml，加0.85%氯化钠溶液4ml，在1000r/min大脑肥胖症条件下离心5min（RBC压积量应不少于0.3ml，否则应补加鸡血）
2、 将上述离心的红细胞按沉淀量配成50%浓度，总体积量应不少于0.6ml
3、 每组取6支试管分别加入如下溶液各3ml
（1）0.85%氯化钠溶液
（2）0.0085%氯化钠溶液
（3）0.8mol/L甲醇
（4）0.8mol/L丙三醇
（5）6%葡萄糖溶液
（6）2%Triton X-100
4、向上述6试管中分别加入50%红细胞悬液1滴，用吸管吸打均匀。观察各管是否有溶血
现象发生（观察时间一小时）。记录溶血时间并于显微镜下观察各溶液中细胞。
五、实验结果
1.实验结果记录表
表一 不同低渗溶液下的溶血现象
试管编号 | 是否溶血 | 时间 | 结果分析 |
1、3ml0.85%氯化钠溶液+1滴稀释鸡血 | 否 | | 因为是等渗溶液，细胞失水吸水达到平衡，所以未发生溶血作用 |
2、3ml0.0085%氯化钠溶液+1滴稀释鸡血 | 是 | 3min | 0.0085%是极低的低渗溶液，显著低于鸡红细胞细胞液的浓度，使大量的水进入鸡红细胞，从而使鸡红细胞溶血 |
3、3ml0.8mol/L甲醇+1滴稀释鸡血 | 是 | 45s | 由于甲醇是脂溶性物质，且浓度高，所以甲醇分子迅速扩散进入鸡红细胞内，从而使红细胞迅速胀破 |
4、3ml0.8mol/L丙三醇+1滴稀释鸡血 | 部分溶血 | 35min | 由于丙三醇水溶性高，又加分子量相对甲醇更大，所以丙三醇分子进入细胞的速度较慢，发生溶血所需时间久，甚至有细胞不发生溶血 |
| 周朴园 5、3ml6%葡萄糖溶液+1滴稀释鸡血 | 部分溶血 | 43min | 葡萄糖易溶于水，且分子量比丙三醇更加大，所以葡萄糖分子进入细胞的速度比丙三醇更慢，溶血时间也更久，或不发生溶血 |
6、3ml2%Triton X-100+1滴稀释鸡血 | 是 | 2min | Triton X-100虽然是高聚物，但是由于它是非离子分子，且它有溶解部分膜蛋白的功能，使细胞膜的渗透性增加，所以也导致水迅速进入鸡红细胞，使红细胞发生溶血 |
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2．实验结果图
图一 肉眼观察六种溶液中鸡红细胞溶血状况
结论：①—⑥为试管编号，从左至右为溶血程度由小至大。
导电复合材料
1 号试管为：3ml0.85%氯化钠溶液+1滴稀释鸡血 不溶血
2 号试管为：3ml0.0085%氯化钠溶液+1滴稀释鸡血 溶血
3 号试管为：3ml0.8mol/L甲醇+1滴稀释鸡血 溶血
4 号试管为：3ml0.8mol/L丙三醇+1滴稀释鸡血 半溶
5 号试管为：3ml6%葡萄糖溶液+1滴稀释鸡血 半溶
6 号试管为：3ml2%Triton X-100+1滴稀释鸡血 溶血
图3 ①号试管中未发生溶血的细胞局部放大图
图2 ①号试管中未发生溶血的细胞（10x40）
图4 ④号试管中的细胞（10x40）
图6 ④号试管中的细胞局部放大图（圈内的细胞发生溶血）
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图4中华人民共和国外交部声明 ⑤号试管中的细胞（10x40）
图6 ⑤号试管中的细胞局部放大图（圈内的细胞发生溶血）
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六、实验分析及结论
1. 离心机使用时,要将配平后的离心管对称放置在离心机内,禁止未配平就放入离心机和非对称放置离心管。
2. 试管中有红细胞和测试溶液时,不应强力摇晃,以免造成人为的红细胞破裂。
3.对于溶血较快的试管，用显微镜观察时要注意滴加血液后立即镜检，否则将会因为细胞溶血太快而看不到细胞。
4.即使细胞在等渗溶液中短时间内未发生溶血现象，但是细胞长时间处于等渗溶液中也会发生溶血现象。
5.发生溶血的细胞从形态上看，膜结构上有一个个口，膜还是有结构的，但是细胞比正常细胞小。
6.由于甲醇等溶液中细胞溶血发生过快，未能在显微镜下观察到。
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