标准化操作规程
1 目的
规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2 授权操作人 经培训且考核通过的实验室检验人员。
3 适用范围 本试剂用于体外定量检测人血清中高密度脂蛋白胆固醇的浓度。
4 检验方法
本试剂盒采用直接测试法测定高密度脂蛋白胆固醇的浓度。
5 检验原理
样本中的高密度脂蛋白胆固醇在试剂中表面活性剂的作用下被胆固醇脂酶选择性地催化水解为胆固醇和游离脂肪酸，生成的胆固醇经胆固醇氧化酶氧化生成胆甾-4-烯-3-酮和过氧化氢，
过氧化氢在过氧化物酶的催化下与苯胺类原物质和4-氨基安替比林作用产生水和醌亚胺素，醌亚胺素的生成量与样本中高密度脂蛋白胆固醇的含量成正比，通过测定特定波长处反应最终生成的素量，可以计算出样本中高密度脂蛋白胆固醇的浓度。
高密度脂蛋白胆固醇＋ H2O 胆固醇 ＋ 游离脂肪酸
胆固醇 + O2 胆甾-4-烯-3-酮 ＋ H2O2
H2O2 + 4-氨基安替比林 + 苯胺类原物质醌亚胺素+水
6 检验标本要求
6.1 样本为血清,不得使用溶血、脂血或被污染的样本。
6.2 样本在2℃~8℃可稳定7天，-20℃可稳定1个月。避免样本反复冻融。
7 试剂及配套品
7.1试剂来源
长春迪瑞医疗科技股份有限公司高密度脂蛋白胆固醇试剂盒（直接测试法）7.2
7.2试剂组成
试剂盒组成 | 主要组成成份 | 浓度/含量 |
试剂1（R1） | 4-氨基安替比林 | 1mmol/L |
胆固醇氧化酶 | 1KU/L |
胆固醇酯酶 | 1KU/L |
过氧化物酶 | 4KU/L |
非离子表面活性剂 | 0.5% |
高分子化合物 | 适量angola |
MOPS缓冲液 | 100mmol/L |
试剂2（R2） | DSBmT | 1.2% |
非离子表面活性剂 | 0.5% |
MOPS缓冲液 | 100 mmol/L |
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含非反应性填充物及稳定剂
7.3试剂的稳定性与贮存：
一域多层四四制7.3.1试剂在2℃~8℃条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期为12个月。
7.3.2试剂开封后在2℃~8℃条件下可稳定30天。
8 实验仪器及性能指标
8.1 实验仪器
迪瑞CS系列全自动生化分析仪
8.2试剂性能指标
8.2.1 试剂空白吸光度：A＜0.05。
8.2.2 分析灵敏度：测试1.00mmol/L样本时，吸光度变化△A＞0.04。
8.2.3 线性范围：[0.10，3.80] mmol/L；线性回归系数r≥0.9950；[0.10，0.70] mmol/L范围内，线性绝对偏差应不超过±0.10mmol/L；（0.70,3.80] mmol/L范围内，相对偏差不超过±
10％。
8.2.4 准确度：相对偏差应在±10%范围内。
8.2.5 测量精密度：
重复性：CV≤反间谍4.0%。
批间差：R≤笛卡尔坐标7.0%。
9 校准程序
9.1校准品来源
高密度脂蛋白胆固醇校准品
9.2校准品的存贮使用注意事项
参见高密度脂蛋白胆固醇校准品使用说明书。
9.3 校准程序
建议使用迪瑞公司配套校准品，2点定标：按照配套校准品使用要求，以纯化水和校准品进行2点校准测定，测定后仪器自动拟合成校准曲线。当试剂批号更换或质控失控时，需要重新校准。
10 质量控制
10.1质控品来源
留出你过冬的粮食高密度脂蛋胆固醇白质控品
10.2质控品存贮及使用注意事项
参见高密度脂蛋白胆固醇质控品使用说明书。
10.3 质量控制
建议使用迪瑞公司配套质控品，进行质量控制。实验室应自行建立质控区间和限值。若质控值失控，每个实验室应采取纠正措施。
11操作程序
11.1试剂配制
试剂R1和试剂R2为液体试剂，可直接使用。
11.2 项目参数：
测定温度 | 37℃ | R1用量 | 300μL |
主波长 | 540nm~570nm | R2用量 | 100μL |
副波长 | 660nm | 样本用量 | 4μL |
比杯光径 | 1.0cm | 反应时间 | 300s |
吸光度范围 | 0A~2A | 测定模式 | 两点终点法 |
反应方向 | 正反应 | | |
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11.3样本检测步骤：
11.4 计算方法：
单位换算：mmol/L×38.7=mg/dL。
11.5注意事项：
11.5.1本品仅用于体外诊断。
11.5.2 避免测试中途添加试剂。
11.5.3 试剂和样本用量可根据不同仪器的要求按比例改变。
12结果判断
12.1 样本HDL-C浓度超过检测范围时，请用生理盐水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。浙江同志
12.2 血清中高密度脂蛋白胆固醇浓度的检测只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体症、病史以及其它的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13 参考区间
男性 1.07～1.73 mmol/L
女性 1.26～1.89 mmol/L
引用的参考值范围代表本法的期望值，仅供参考，建议各实验室验证这一参考范围或建立自己的参考值范围。
14临床意义
高密度脂蛋白-胆固醇含量下降是虚血性心疾患的危险因素。HDL-C下降在冠状动脉疾病、高脂血症、抽烟、肥胖、糖尿病、肝疾患等疾病时有反映。摄取酒精、适当的运动可引起高密度脂蛋白胆固醇升高。
15复检操作程序
按仪器使用说明书进行复查操作。
16方法局限性
16.1 检验结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
16.2 当样本中血红蛋白＞5g/L、甘油三脂＞9mmol/L、抗坏血酸＞0.17mmol/L时可能会影响检测结果。
17 注意事项
样本、废液等有潜在生物传染性，操作者应遵守实验室安全操作规定，并按当地医疗废弃物、感染性废弃物、产业废弃物等规定处理废液。
18 个人防护
18.1请把标本当作可能感染HIV、HBV、HCV等的危险物质处置。为了避免或减少相关的传染风险，请使用一次性手套。
18.2若本试剂误入眼内或口中、或接触到皮肤时，请迅速用水冲洗，必要时请接受医生。
19当检测系统不能工作时，所采取的补救措施
当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。
20 参考文献
20.1 Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. AACC Press, 1990。
20.2G. Russell Warnick等，Comparison of Improved Precipitation Methods for Quantification of High-Density Lipoprotein Cholesterol，CLIN. CHEM. 31/2，217-222 (1985)。
20.3 Miyauchi等，Method for Determining the Amount of Cholesterol in a High-Density Lipoprotein，U.S. Pat.5,736,406。
20.4 Kerscher等，Process and Reagent for the Specific Determination of HDL Cholesterol in Serum or Plasma，U.S. Pat.4,851,335。
20.5 NCCLS . Interference Testing in Clinical Chemistry;Approved Guideline, 2005.
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