1、引言:
由于微生物检测的特殊性,因此该例只讨论了单一样品重复测定菌落总数不确定度的评估。 2、技术说明:
该技术说明简单描述了菌落总数测定过程以及单一样品重复测试与其他所依赖的参数的关系。 测定过程;检样做成几个适当倍数的稀释液选择2—3个适宜稀释度,各以1ml分别加入灭菌平皿内每皿内加入适量营养琼脂(36±1°C、48±2h)菌落计数报告计算;做平板菌落计数时,用肉眼观察,在记下平板的菌落数后,求出稀释度的各平板平均菌落总数。
3、不确定度来源和量化;
校准(1ml移液管):根据标准查到A级1ml±0.007 ml移液管的不确定度(假设三角形分布)
0.007 ml/√6=0.0028 ml
由于该例是同一样品单一重复测试的结果,而由于培养引起的不确定度因素在此忽略。由于微生物的 称量是粗称,故由称量引起的不确定度在此也忽略。由稀释起的不确定度分量与计数相比在此贡献较小故也忽略。
稀释和培养
计数
菌落总数
称量
一个样品经过微生物测试后得到下列结果:
3.3×1049.8×10³3.0×105 2.0×105 6.5×104双脉冲发动机
9.6×10³5.0×1048.8×1049.0×10³3.5×105
由微生物学的角度来看,这些结果的差异性并不大。然而将这些数值平均后发现会产生以105为单位之不合理偏差。
算术平均值及log平均值所表示出的不同结果如表1所列:
表1
由以上数值可得到开log后的平均值等于4.7225 具体计算如表2所列;
表2
n (xi-x)2
使用公式S=[ ∑]1/2 (1)
i=1 (n-1)
3.35166
白铜锡S=√ =0.6103
10-1
查表得知于95%信赖区间时t=2.26。此微生物测试以log的方式表示,
2.26×0.6
其结果= 4.7225±= 4.7225±0.4361
√10
这说此结果分布于4.2864及5.1586之间。取antilog的值时,
此测试结果分布于1.9×104及1.4×105之间
范例二:一系列的重复测试
某一项特别的产品,其微生物测试的置信区间可以下列方式决定:
(一)一项产品至少制备15个样品作重复测试,每一个样品必须包含可计算得出数目的微生物。
(二)这些微生物测试应在实验室由不同人员进行一段时间,但重复测试的部份必须由同一位测试人员执行。
(三)必须建立重复测试的步骤,例如样品重复次数、重复样品的均匀性,重复样品稀释。
(1)每组重复样品的测试结果为X l及X2。
(2)每个测试结果的log值计算。
(3)每一组重复测试结果的差值必须计算。
(4)、(3)所得的差值开平方。
(5)每一组差值的平方相加并除以总样品数目得到变异数。
(6)变异数开根号后得到标准偏差。
∑(n i-1)S i2 1/2
i=1
S= (2)
P
[∑n i ]-P
i=1
式中S i:由第i个样品所得的标准偏差(请参考公式(1));n i:第i
p
样品重复测试的数目:∑n i:所有测试数目:p:样品的数目
i=1
p
:[∑n i]-P:自由度。
i=1
对每一组样品其重复次数n均等于2,所以公式(2)可简化为:
1 p
S=[ ∑(X i1-X i2)2]1/2
2P i=1
式中X i1-X i2:每一组重复测试结果的差值。由表3得知:
太阳方位角
0.092219
S= =0.055
中国留守儿童日记
√30
在95%置信区间,此测试方法的不确定度以log的方式表示时,
0.055×2.13
其值=logX = logX±0.083
1.414
如前所述,所得到的结果仍以log的方式表示。
以范例二第—个样品为例,两组结果2300及2900的log值的平均值为3.4121,因此log值的结果为3.412l±0.083,既分布于3.3291至3.4951之间。取antilog的值,其结果分布于2133至3126之间;也就是说,基本测试方法所得的不确定度,其结果可估算为2100至3100之间。同样推理,以第四个样品为例,两组结果57至65的log值的平均值为1.7844,因此取antilog 后,其结果分布于50至74之间。
母系氏族
八方论坛表3 一样品制备15个样品重复测试的结果