第一线集团综述与专论?
2008年第32卷第7期第314页
貉学进履3142008,V o1.32,No.7
ProgressinPharmaceuticalSciences
用于蒜氨酸含量和有关物质测定的方法
袁耀佐，杭太俊，陈坚，张正行
(1.江苏省药品检验所，江苏南京210008;2.指纹检材是什么意思
3.新疆医科大学药学院药物分析教研室，新疆
中国药科大学药物分析教研室，江苏南京210009;
乌鲁木齐,830054)
[摘要】蒜氨酸是大蒜的功效成分大蒜辣素的前体.大蒜辣素极不稳定，无法直接制成制剂应用于临床，故从 鲜蒜中分别提取化学性质相对稳定的蒜氨酸和蒜酶，制成蒜氨酸/蒜酶复合制剂的方法是目前大蒜高效制剂开发
的主要思路.为配合蒜氨酸的质量研究，综述了近年来蒜氨酸含量和有关物质的测定方法，包括紫外法，薄层谱
扫描法，气相谱法，高效毛细管电泳法，生物传感器法，液相谱法，并讨论了各方法的优点和局限性. [关键词]蒜氨酸；含量测定；有关物质弹性纤维
[中图分类号】R917[文献标识码】A[文章编号]1001—5094(2008)07—0314—05 AReviewonDeterminationMethodsofContentandRelated
SubstancesofAIliin
YUANY ao.ZUO,HANGTaijun,CHENJian,ZHANGZheng—xing
(1.JiangsuInstituteforDrugContro1.Nanfing210008China;2.DepartmentofPharmaceuti cal
Analysis,ChinaPharmaceuticalUniversity,Nanfing210009,China;3.DepartmentofPhar macy,Xinjiang
MedicalUniversity,Urumqi830054,China)
【Abstract】Alliinistheprecursorofallicinwhichisconsideredasoneofthemainbiologicallyactive componentsofgarliccloves.Owingtotheinstabilityofallicin,thepresentdevelopmentstrate gyisto extractalliinandalliinasewhicharerelativelystablefromfreshgadic,andthentomaketheco mplex
preparationofthem.Thedeterminationmethodsofcontentandrelatedsubstancesofalliinwe rereviewed,
includingUV,TLC,GC,HPCE,biosensorsandHPLC.Theadvanmgesandlimitationsoftho semethods
werediscussedindetail.
【Keywords]Alliin;Contentdetermination;Relatedsubstances
大蒜的功效成分是蒜酶(alliinase,EC4.4.1.4)
催化裂解蒜氨酸(alliin，化学名：一烯丙基一L半胱氨
酸亚砜,S—allyl—L—cysteinesulfoxide)产生的大蒜辣素
(allicin)，阿霍烯(~oene)等一系列含硫有机化合
物，这些功效成分的分离，提取或人工合成十分困
难，且化学性质极不稳定，易分解，无法长期保
存…，现有技术尚不能将其直接制成药物制剂应用
[接受日期]2008-04-29
于临床，因此目前国内外的研究思路是从鲜蒜中分
别提取化学性质相对稳定的蒜氨酸及蒜酶，然后科
学组方，制成蒜氨酸/蒜酶复合制剂，使其在体内释
放大蒜辣素，阿霍烯等有效成分，充分发挥疗效，即
蒜氨酸是高效大蒜制剂的前体药物.
目前对蒜氨酸含量测定方法的报道很多，主要
有:1985年张维勤采用的苯腙法(《中草药》)，茚三酮通讯作者：杭太俊，教授;
研究方向：药物分析;
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2008,V o1.32,No.7315 ProgressinPharmaceuticalSciences
药学进展
法J，紫外法，薄层谱扫描法，气相谱法，高效毛
细管电泳法，生物传感器法，高效液相谱法等.除
高效液相谱法可用于蒜氨酸含量测定和有关物质检查外，其余方法均只限于含量测定，苯腙法，茚三酮反应法准确度较差，已很少使用，本文不予介绍，现对其它几种方法作一综述.
1紫外法
Miron等和黄雪松等利用蒜氨酸与蒜酶
定量反应生成大蒜辣素及大蒜辣素能与4.巯基吡
啶(4.MP)定量反应(见图1)的特点，问接测定鲜
蒜中蒜氨酸的含量.由图1可见,1分子蒜氨酸可
与1分子4一巯基吡啶定量反应，在324nm波长下测定4一巯基吡啶溶液分别与空白和含大蒜辣素溶液反应后紫外吸收的变化，利用摩尔吸收系数
(文献[3]测得值:1.98x10；文献[4]测得值:
2.064x10)法可计算蒜氨酸的含量.该方法的
优点在于无需对照品即可进行含量测定，解决了
蒜氨酸前期研究无对照品的困难，但专属性较差,
且摩尔吸收系数受环境，吸收波长的波动等影响
较大，影响测定结果的准确性.
劲松六中—.,
2HOOCS一0
H,N
蒜氨酸
L
+
丫H+,p
大蒜辣素
电厂技术改造
jz,\
I
z.
图1大蒜辣素与4-巯基吡啶反应式(Figure1.,I11process ofthereactionofallicinwith4-mercaptopyridine)
2薄层谱扫描法
王岩等建立了测定大蒜中蒜氨酸含量的薄
层谱扫描法.薄层谱条件：硅胶G薄层板；展
开剂为正丁醇一醋酸一水(4:1:1)系统，上行展开，自
然干燥后喷含茚三酮显剂，蒜氨酸斑点显橙红.
扫描条件选择:As=530nm,AR=445nm；扫描
方式为反射法双波长锯齿形扫描；线性参数SX=5,
狭缝:1.2nmx1.2Din，扫描速度为20mm/min.
综述与专论?
2008年第32卷第7期第315页
结果表明，蒜氨酸在860—3010ng范围内与其
峰面积积分值有良好的线性关系,r=0.9950，板内
及板问精密度RSD分别为2.73%和3.80%,2小
时内测定结果稳定,RSD为0.14%(n=5)，回收率
为102.6%,RSD=2.3%(n=6).
3气相谱法
Kubec等对蒜氨酸进行衍生化，以Js.丁基一胱
氨酸亚砜(S.butylcystinesulfoxide)为内标，采用气相
谱法测定不同产地大蒜中蒜氨酸的含量，并用GC.MS法发现了新的物质乙基蒜氨酸[S—ethylcys—teinesulfoxide(ethiin)].
其衍生化步骤为：称取大蒜提取物约30mg，用
心连心艺术团慰问演出乙醇一水一吡啶(32:60:8)0.3mL溶解后，加衍生化
试剂氯甲酸乙酯(ethylchloroformate)100mL，碘化
钠(1g/mL)0.2mL，乙酰氯50及少许氯化亚
锡，反应片刻.而后用二氯甲烷0.4mL萃取，留有
机层溶液，供气相谱检测.
测定条件：采用HP.5或HP.INNOW AX熔融硅
胶毛细管柱(30nlx0.25mm,0.25m)，进样量为
1mL，分流比为1:10，进样口和检测器温度分别为180oC和250oC，以氮气为载气，流速为2ml/L，升
温程序为：从180oC以2~C/min线形升温至220oC, 并保持15min,FID/MS检测器.MS条件：氦气流
速为0.6mL/min,E1离子源(70ev)，离子源温度为
250oC，离子扫描范围(m)为15—425.
4高效毛细管电泳法
马海乐等建立了测定鲜蒜中蒜氨酸含量的
高效毛细管电泳法(CE).测定条件：未涂层石英毛
细管(50cmx50m),30mmol/mL(pH6.0)的磷
酸盐缓冲溶液，分离电压为21kV(一)一(+)，电泳
时问为7min，电泳温度为30℃，以压力进样方式进
样(参数设置：毛细管截面压差为3.45kPa，进样时
问为5s)；柱上检测(检测波长:196nm).清洗程
序：第一次进样前分别以甲醇，双蒸水,0.1mol/L
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