遗传学实验报告
刘乐乐 生计11.3 2013年12月2日黎祥
一、实验目的:
1、通过对PTC味盲基因频率的分析,了解体基因频率测算的一般方法;
2、理解遗传平衡定律,了解改变体平衡的因素。
二、实验原理
PTC即苯硫脲,是一种无毒无副作用的化合物,人体对苯硫脲(PTC)尝味的能力是由一对等位基因(T)所决定的遗传性状,其中T对t为不完全显性。在不同人中对该物质的尝味能力不同。利用这一原理,将PTC配制成各种浓度的溶液,由低浓度到高浓度逐步测试尝味能力,由此可区分出味盲(隐性纯合体)、高度敏感(显性纯合体)和介于二者之间的人(杂合体)。据此可对人中味盲基因的频率进行分析。 正常尝味者的基因型为TT,能尝出1/750,000~~1/6,000,000的PTC溶液的苦味;具有基因Tt的人尝味能力较低,只能尝出1/48,000~~l/380,000的PTC溶液的苦味;基因型为tt的人只能尝出>1/24,000的PTC溶液的苦味,甚至对PTC的结晶物也尝不出苦味来,在遗传学上被称为味盲。
哈迪一温伯格定律也称遗传平衡定律,是由英国数学家哈迪(G.H.Hardy)和德国医生温伯格分别于1908年和1909年各自提出的。 两个等位基因的哈迪一温伯格定律的公式为:(p+q)2=p2+2pq+q2=1。 其中p代表一个等位基因(如A)的频率,q代表另一个等位基因(如a)的频率, p2代表一个等位基因纯合子(如AA)的频率,q2代表另一个等位基因纯合子(如aa)的频率,2pq代表杂合子(如Aa)的频率 。
三、实验材料
PTC溶液的配制
1、原液:取PTC结晶l.3g,加蒸馏水1000ml,在室温(20℃左右)下l-2日即完全溶解。
2、原液的PTC浓度约为1/750,原液稀释1倍为2号液,2号液稀释1倍为3号液,以此类推,
直至配成14号液,浓度为1/6,144,000。
3、将配好的14种PTC溶液分别置于消毒好的滴瓶中(见表一)。
表 1 各组PTC的浓度及对应的基因型
四、实验步骤
1、用滴管滴4~5滴溶液于受试者舌根部,让受试者品味,然后用蒸馏水作同样的试验。初始浓度不能太高。 2、询问受试者能否鉴别此两种溶液的味道,若不能鉴别或鉴别不准确,则依次用更高浓度溶液重复试验,直至能明确鉴别出PTC的苦味为止。
3、当受试者鉴别出某一号溶液时,应当再用此号溶液重复尝味三次,三次结果相同时,才是可靠的。
4、测定时应将PTC溶液与蒸馏水反复交替给受试者,且不能让受试者知道溶液浓度,排除心理暗示作用以免影响结果的准确性。
五、结果分析
对全班同学的同学基因型进行分析,根据哈代温伯格定律计算出T及t的基因频率,假设班级体是一个遗传平衡体,计算出平衡体中的tt、Tt、TT的理论基因频率,并进行χ2 检验。数据结果见表2。
| TT | Tt | tt | 总计 |
实际频数(O) | 15 | 硅谷期刊18 | 2 | 35 |
基因频率 | pT= 68.6% qt=31.4% |
理论频数(C) | Np2=16.5 | N2pq=15 | Np还俗方丈2=3.5 | N=35 |
阿尔比派(O-C)2/C | 0.073 | 0.600 | 安徽教育科研 0.643 | 1.316 |
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表 2 PTC味盲基因频率的实验数据汇总及结果分析
查表可以知道,在自由度为2的情况下,χ0.05=5.99,而我们班中χ=1.316。故χ<χ0.05,说明实际频数和理论频数之间有关联性,即在α=0.05的水准下,我班T、t基因的分布符合遗传平衡体系。实际上,χ0.90野马车友会=0.211,χ0.50=1.36,p>0.50>>0.05,我们班是遗传平衡体系。
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