缩略词表
英文缩写英文全称中文全称
AD APP PS1 NFT AβDMSO cGAS STING TBK1 IRF3 IFN-βTNF-αIL-6 IL-1βAlzheimer’s Disease
Amyloidprecursor protein
Presenilin1
Neurofibrillary tangles
Beta amyloid
Dimethyl sulfoxide
Cyclic GMP-AMP Synthase
Stimulator of IFN Gene
TANK-binding kinase1
极端主义
Interferon regulatory Factor3
interferon-β肉肉更健康
Tumor Necrosis Factor-α
Interleukin-6
Interleukin-1β
阿尔茨海默病
淀粉样前体蛋白基因
早老素1基因
β淀粉样蛋白
二甲基亚砜
网友世界环状GMP-AMP合成酶
干扰素刺激基因
TANK结合激酶1
β干扰素
全称肿瘤坏死因子-α
白介素-6
白介素-1β
目录
MiR-24-3p/STING通路调控阿尔茨海默病模型小鼠神经炎症的作用和机制 (2) 摘要 (2)
Abstract (4)
前言 (6)
材料与方法 (8)
结果 (20)
玛吉阿米的留言簿讨论 (29)
小结 (31)
创新点 (31)
综述 (37)
阿尔茨海默病中的神经炎症 (37)
附录一攻读学位期间发表的文章情况 (58)
附录二攻读学位期间参加国际国内学术会议情况 (59)
致谢 (60)
MiR-24-3p/STING通路调控阿尔茨海默病模型小鼠神经炎症的作用
和机制
摘要
背景：阿尔茨海默病是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病，
病因迄今未明。其病理学特征为细胞外过度产生的β-淀粉样蛋白（Aβ）所形成的斑块和携带过度磷酸化的tau蛋白的神经原纤维缠结（NFT），目前大多数研究 围绕这两个经典病理特征展开。但是越来越多的研究表明，神经炎症在阿尔茨海默病的发病中起重要作用。STING通路是一条经典的免疫学通路，与癌症、自
身免疫病等多种疾病密切相关。本研究中，我们发现STING通路在阿尔茨海默
病模型小鼠大脑中的小胶质细胞内过度激活，促使小胶质细胞产生多种炎症因子，加重神经炎症。MicroRNA(miRNA)是一类内生的、长度约为20-24个核苷酸
的小RNA，其在细胞内可以通过调控基因表达而产生重要作用，与包括阿尔茨 海默病（AD）在内的多种神经退行性疾病有着密切的联系。我们通过生物信息
学分析预测出了可能对STING进行调控的microRNA，最终通过一系列的实验，筛选出miR-24-3p这一能够通过调控STING表达而参与神经炎症反应的microRNA。miR-124/STING通路可能被作为AD患者的新靶点。
目的：探讨通过调控小胶质细胞内的miR-24-3p/STING通路，减轻阿尔茨
海默病大脑中的神经炎症。
方法：本实验采用9月龄AD模型鼠APP/PS1和野生型C57/BL6鼠。用western blot检测了小鼠海马组织内STING通路的激活，用ELISA检测脑内多种炎症因子的含量。培养原代小胶质细胞，体外给予Aβ处理，模拟AD脑内Aβ
病变。采用9月龄的P301S小鼠及对照鼠，western blot检测海马组织内STING
通路的激活。在细胞内过表达tau蛋白检测对STING的影响。采用生物信息学的方法筛选可以对STING进行调控的miroRNA，用qPCR做进一步的筛选。确定miR-24-3p后，用FISH确认其在AD模型鼠脑内
的表达。用双荧光素酶验证miR-24-3p与STING的结合。转染miR-24-3p的激动剂mimic和抑制剂inhibitor 及相应的对照control验证其对STING的调控。在原代小胶质细胞中给予
miR-24-3p的激动剂mimic，用qPCR和ELISA检测炎症因子的转录和表达。通过上述实验可以证实miR-24-3p/STING通路可以调控AD小鼠脑内的神经炎症。
结果：9月龄AD模型鼠APP/PS1脑内STING通路明显激活，其下游的各种炎症因子，包括IFN-β、TNF-α、IL-6和IL-1β的含量均显著升高。在APP/PS1小鼠脑内，STING与小胶质细胞共定位增加。培养原代小胶质细胞，体外给予Aβ处理后，STING通路明显激活，下游炎症因子含量显著升高。9月龄的P301S 小鼠脑内STING通路无明显激活。在N2a细胞内过表达tau蛋白，对STING的含量无明显影响。双荧光素酶验证miR-24-3p与STING可以结合。在N2a细胞中转染miR-24-3p的激动剂mimic可以下调STING的表达，而转染抑制剂inhibitor则可以上调STING的表达。在原代小胶质细胞中给予miR-24-3p的激动剂mimic，各类炎症因子的含量均显著降低。通过上述实验证实miR-24-3p/STING 通路可以调控AD小鼠脑内的神经炎症。
结论：Aβ会促使小胶质细胞中miR-24-3p的表达量下调，进而引起STING 通路的过度激活，炎症因子IFN-β、TNF-α、IL-6和IL-1β的表达量升高，引发神经炎症。而上调miR-24-3p的表达，可以减轻炎症因子的产生，起到神经保护的作用。本课题研究结果显示miR-24-3p/STING通路在AD相关的神经炎症中起到重要作用。
关键词：miR-24-3p；STING；阿尔茨海默病；神经炎症
Role and Mechanism of MiR-24-3p/STING Pathway Regulating Neuroinflammation in Alzheimer's Disease Model Mice
Abstract
同类相食
Background:MicroRNAs(miRNAs)are a class of endogenous small RNAs of approximately20-24nucleotides in length that can play an important role in the regulation of gene expression in cells,including Alzheimer's disease(AD).A variety of neurodegenerative diseases are closely related.Alzheimer's disease is a progressive degenerative disease in which the etiology has not been known.The pathological features of AD are plaques formed by extracellularly producedβ-amyloid(Aβ)and neurofibrillary tangles(NFT)with hyperphosphorylated tau,and most studies focus on these two Classical pathological features.However,more and more studies have shown that neuroinflammation plays an important role in the pathogenesis of Alzheimer's disease.In this study,we found that the classical inflammatory pathway STING pathway is over-activated in microglia in the brain of Alzheimer's disease model mice,prompting microglia to produce a variety of inflammatory factors, leading to neuroinflammation.We screened microRNAs that may regulate STIN
G through bioinformatics analysis.Finally,through a series of experiments,we found miR-24-3p,a microRNA that mediates neuroinflammatory responses by regulating STING expression.The miR-124/STING pathway may be a new target for the treatment of AD patients.
Objective:To investigate the neuroinflammation in the brain of Alzheimer's disease by regulating the miR-24-3p/STING pathway in microglia.
Methods:This experiment used9-month-old AD model mouse APP/PS1and wild type C57/BL6mice.Western blot was used to detect the activation of STING pathway
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议