一、选择题
1．荧光分析法是通过测定( )而达到对物质的定性或定量分析。 A、激发光 B、磷光
C、发射光 D、散射光
A、紫外一可见分光光度法 B、荧光分析法
C、磷光分析法 D、化学发光分析法
3．荧光发射光谱含有( )个发射带。队列队形变换
A、1 B、2 C、3 D、不一定
4．下列关于荧光光谱的叙述错误的是（ ）
B、荧光光谱与激发光谱一般是对称镜像
C、荧光光谱属于分子的受激发射光谱
D、荧光激发射光谱与紫外吸收光谱重合
5．下列叙述错误的是（ ）
A、荧光光谱的最长波长和激发光谱的最长波长相对应
B、荧光光谱的最短波长和激发光谱的最长波长相对应
C、荧光光谱的形状与激发光波长无关
D、荧光波长大于激发光波长
6．激发态分子经过振动弛豫回到第一电子激发态的最低振动能级后，经系间窜越转移至激发三重态，再经振动弛豫降至三重态的最低振动能级，然后发出光辐射跃迁至基态的各个
振动能级，这种光辐射称为( )。
A、分子荧光 B、分子磷光
C、瑞利散射光 D、拉曼散射光
7．关于振动弛豫，下列叙述中错误的是( )。
A、振动弛豫只能在同一电子能级内进行
B、振动弛豫属于无辐射跃迁
硫化锌 C、通过振动弛豫可使处于不同电子激发态的分子均返回到第一电子激发态的最低振动能级
D、振动弛豫是产生Stokes位移的原因之一
8．荧光寿命指的是( )。
A、从激发光开始照射到发射荧光的时间
B、受激分子从第一电子激发态的最低振动能级返回到基态所需的时间
C、从除去激发光光源至分子的荧光熄灭所需的时间
D、除去激发光源后，分子的荧光强度降低到激发时最大荧光强度的1／e所需的时间 9．关于荧光效率，下面叙述不正确的是（ ）
A、具有长共轭的π→π﹡跃迁的物质具有较大的荧光效率
B、分子的刚性和共平面性越大，荧光效率越大
C、顺式异构体的荧光效率大于反式异构体
D、共轭体系上的取代基不同，对荧光效率的影响不同
10．采用下列( )措施可使物质的荧光效率提高。
A、适当降低溶液浓度 B、降低溶剂极性
C、金龟车贺比加入重氮化合物 D、剧烈搅拌
11．下列化合物中，哪种物质的荧光效率最大（ ）
A、苯 B、联苯 C、萘 D、蒽
12．萘在下列( )溶剂中的荧光强度最强。
A、1一氯丙烷 B、1一溴丙烷
C、1一碘丙烷 D、1，2一二氯丙烷
13．苯胺在( )条件下荧光强度最强。
A、pH=1 B、pH=3 C、pH=10 D、pH=13
14．荧光素钠的乙醇溶液在( )条件下荧光强度最强。
A、0℃ B、-10℃ C、-20℃ D、-30℃
15．一般要在与入射光垂直的方向上观测荧光强度，这是由于( )。
A、只有在与入射光垂直的方向上才有荧光
B、荧光是向各个方向发射的，可减小透射光的影响
C、荧光强度比透射光强度大
D、荧光发射波长比透射光波长长
16．荧光法测定硫酸奎宁时，当激发光波长为320nm时, Raman光波长为360nm；当激发光波长为350nm时，Raman光波长为400nm。若最大发射波长为448nm，则进行荧光测定时应选择( )。
A、λex=320m，λem=400nm B、λex=320nm，λem=360nm
C、肥料登记管理办法λex=350nm，λem=448nm D、λex=320nm，λem=448nm
17．荧光分光光度计常用的光源是( )。
A、空心阴极灯 B、氙灯 C、氘灯 D、硅碳棒
18．用波长为320nm的入射光激发硫酸奎宁的稀硫酸溶液时，将产生320nm的( )。
西元国际广场A、荧光 B、磷光 C、Rayleigh光 D、Raman光
19．激发光波长和强度固定后，荧光强度与荧光波长的关系曲线称为（ ）
A、吸收曲线 B、激发光谱 C、荧光光谱 D、工作曲线
20．采用激光作为荧光光度计的光源，其优点是（ ）
A、可以有效消除散射光对荧光测定的干扰
B、可以提高荧光法的选择性
C、可以提高荧光法的灵敏度
D、可以避免荧光熄灭现象的产生
二、填空
1．荧光光谱的特征是--------、---------和-----------。
2.激发态分子经过--------回到第一电子激发态的最低振动能级后，以-----发射光量子跃迁回到基态的任一振动能级，这时所发射的光量子称为荧光。
3．荧光物质的------和--------是鉴定物质的依据，也是定量测定时最灵敏的条件。
4．荧光物质的激发光谱可能含有-----吸收带，但其发射光谱却只含有------吸收带。
5．能够发射荧光的物质应具备的两个条件是：物质分子有强的------和---------。------、--------具有较高的荧光效率
三、简答题
1．哪些因素会影响荧光波长及强度?
2．在什么条件下荧光强度和荧光物质的浓度成正比?
3．分子结构与荧光的关系。
4．为什么在室温下溶液很少呈现磷光?在什么条件下才能检测到磷光?
5．为什么荧光分析法的灵敏度高于紫外一可见分光光度法?
6．哪些物质容易发生电子由单线激发态到三线激发态的体系间跨越？
7．荧光和磷光在产生机制上有何不同？
8．如何测定激发光谱和荧光光谱？
四、计算题
1．用荧光法测定复方炔诺酮片中炔雌醇的含量时，取本品20片(每片含炔诺酮应为0．54～0．66mg，含炔雌醇应为31．5～38．5μg)，研细溶于无水乙醇中，稀释至250mL，过滤，取滤液5mL，稀释至lOmL，在激发波长285nm和发射波长307nm处测定荧光强度。如炔雌醇对照品的乙醇溶液(1．4μg／mL)在同样测定条件下荧光计读数为65，则合格片的荧光计读数应在什么范围?
2．用荧光分析法测定食品中维生素B2的含量：称取2．00g食品，用lOmL氯仿萃取（萃取率100%），取上清液2．00mL，再用氯仿稀释为lOmL。维生素B2氯仿标准溶液浓度为
0．100μg／mL。测得空白溶液、标准溶液和样品溶液的荧光强度分别为：FO=1．5，FS=69．5，FX=61．5，求该食品中维生素B2的含量。（μg／g）
参考答案
一、选择题
1．C 2．A 3．A 4．D 5．A 6．B 7．C 8．D 9．C 10．A
11．D 12．D 13．C 14．D 15．B 16．D 17．B 18．C 19．C 20．C
二、填空题
1．荧光发射波长总是大于激发光波长，荧光光谱形状与激发光波长无关，荧光光谱与激发光谱成镜像关系
2．振动弛豫，辐射形式
3．最大激发波长，最大发射波长
4．几个，一个
5．紫外一可见吸收，一定的荧光效率，长共轭分子、刚性平面结构分子
三、简答题
1．影响荧光波长及强度的因素有温度、溶剂、酸度、荧光熄灭剂、散射光。
2．在低浓度时荧光强度和荧光物质的浓度成正比。
3．分子结构与荧光有如下关系：①长共轭分子具有л→л﹡跃迁的较强紫外吸收，л电子共轭程度越大，荧光强度越大，而荧光波长也长移。②刚性平面结构分子具有较高的荧光效率，在同样的长共轭分子中，分子的刚性和共平面越大，荧光效率越大，并且荧光波长产生长移。③共轭体系上的取代基对荧光光谱和荧光强度也有很大影响。
4．由于荧光物质分子与溶剂分子间相互碰撞等因素的影响，处于激发三重态的分子常常通过无辐射过程失活回到基态，因此在室温下很少呈现磷光，只有通过冷冻或固定化而减少外转换才能检测到磷光。
5．荧光分析法中与浓度相关的参数是荧光物质发射的荧光强度，测量的方式是在入射光的直角方向，即在黑暗背景下检测所发射光的强度信号，因此可采用增强入射光强度或增大检测信号的放大倍数来提高灵敏度。在分光光度法中与浓度相关的参数是吸光度，而吸光度A=lgI0/I,如果增大入射光强度，相应也增大了透射光强度，所以其比值不会变化，如果增大检测器的放大倍数，检测到的入射光强度和透射光强度也同时增大，同样不能提高其比值，也就不能达到提高灵敏度的目的。所以，荧光分析法的灵敏度比紫外分光光度法高。
6．7．8．略
四、计算题
1．解 测定液中炔雌醇的浓度范围在
即1.26～1.54μg／mL之间为合格。
1．4μg／mL 的对照品溶液的荧光计读数为65
由，得合格片的荧光计读数应在58．5～71．5之间。
2．解 Fs-FO =K·Cs， Fx-F0 = K·Cx
将FO=1．5，FS=69．5，FX=61．5，Cs=0．100μg／mL代入方程中解得
Cx=0．088μg／mL
食品中维生素B2的含量=Cx×μg/g=22μg/g
>金基德
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