农学硕士联考化学-7
(总分:105.00,做题时间:90分钟)
一、{{B}}选择题{{/B}}(总题数:34,分数:34.00)
1.CM-cellulose______。
∙ A.是一种羧甲基纤维素
∙ B.是一种阴离子交换剂
∙ D.A,B
(分数:1.00)
A. √
B.
C.
D.
解析:[考点] 阳离子交换剂。[解析] CM-cellulose,即羧甲基-纤维素,是一种阳离子交换剂,常用作蛋白质分离柱层析介质。CM-cellulose含有羧基,能解离出阳离子(如H+),和带正电荷的蛋白质发生交换,使带正电荷的蛋白质结合在层析介质从而得以分离。由于其孔径较大,只适合分离蛋白质,而不适于氨基酸分离、分析。分离氨基酸的离子交换介质常用离子交换树脂。 2.凝胶过滤______。
∙ A.是借助特殊滤膜进行的旨在除去杂质的高级过滤技术
∙ C.小分子物质易过滤
∙ D.B,C
(分数:1.00)
A.
B. √
C.
D.
解析:[考点] 蛋白质凝胶过滤原理。 [解析] 凝胶过滤特指分子筛层析,是基于分子大小进行分离的一种蛋白质层析技术,并非一般意义上的过滤。通过凝胶介质时,比凝胶网孔小的蛋白质容易进入凝胶颗粒内部,受到的阻滞作用大,经过的路径长。
3.桑格反应______。
∙ A.可用来鉴定多肽链羧基末端氨基酸
∙ B.主要试剂为2,4-二硝基苯
∙ C.为烃基化反应
∙ D.B,C
(分数:1.00)
A.
B.
C. √
D.
解析:[考点] 桑格反应实质。 [解析] 桑格反应为烃基化反应。在弱碱性反应条件下,2,4-二硝基氟苯与氨基酸的α-氨基反应,生成黄2,4-二硝基苯基氨基酸。
4.利用紫外分光光度计测定某些生物分子含量,是根据______。
∙ A.它们在紫外区有光吸收
∙ B.它们在近紫外区有吸收峰
∙ C.它们在特定波长下的光吸收值与其浓度有正相关
∙ D.B,C
(分数:1.00)
A.
B.
C.
D. √
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解析:[考点] 生物分子特征吸收。
5.蛋白质盐析______。
∙ A.是利用蛋白质在低盐溶液中发生沉淀的原理
∙ B.可用于除去蛋白质溶液中的盐成分
∙ C.可对蛋白质进行分级分离
同义词词林∙ D.可用于蛋白质缓冲液的更换
(分数:1.00)
A.
B.
C. √
D.
解析:[考点] 蛋白质盐析的原理与应用。 [解析] 盐析是指蛋白质在高浓度中性盐中发生沉淀的现象。大量中性盐的加入会使蛋白质溶液中水的活度降低,这不仅使大部分水转变为盐离子的水化水,而且蛋白质分子表面的水化层也被破坏,使蛋白质分子表面的疏水残基充分暴露,从而发生聚集而沉淀下来。盐析常用于目标蛋白的初级分离和蛋白质浓缩。
6.SDS-PAGE______。
∙ A.可以测定氨基酸的分子量
∙ B.可以测定天然蛋白质分子量
∙ C.可以测定蛋白质亚基分子量
∙ D.可以测定蛋白质亚基数
(分数:1.00)
A.
B.
C. √
D.
解析:[考点] SDS-PAGE的用途。 [解析] SDS-PAGE为蛋白质变性电泳,用于测定蛋白质亚基分子量。如果一个蛋白质含的亚基大小差异不大,SDS-PAGE无法将它们分开。
7.进行SDS-PAGE时,蛋白质______。
∙ A.由负极向正极移动
∙ B.特殊条件下由正极向负极移动
∙ C.移动方向取决于蛋白质的大小
∙ D.移动方向取决于组成蛋白质的氨基酸性质
(分数:1.00)
A. √
B.
C.
D.
解析:[考点] SDS在电泳中的作用。 [解析] SDS,即十二烷基硫酸钠,常用作蛋白质变性剂。在β-巯基乙醇存在下,蛋白质亚基分离,二硫键断裂,多肽链充分伸展,SDS以其烃链与蛋白质分子的侧链通过疏水相互作用结合成复合体。由于SDS是阴离子,被大量引入SDS的蛋白质分子便带上大量负电荷,在电泳时必然由负极向正极移动。
8.用凝胶过滤柱层析分离蛋白质时______。
∙ A.亚基分子量差别越大,越容易分离
∙ B.蛋白质天然分子量差异越大,越容易分离
∙ C.变性蛋白质比活性蛋白质更容易被分离
∙ D.纤维状蛋白质比球状蛋白质更容易被分离
(分数:1.00)
A.
B. √
C.
D.
解析:[考点] 凝胶过滤的应用对象。 [解析] 凝胶过滤是基于天然蛋白质分子大小进行分离的一种柱层析技术。变性蛋白质通常为沉淀物,不易分离;纤维状蛋白质由于可能部分进入凝胶网孔中,也无法按照分子大小分离。凝胶过滤最适合球状蛋白质的分离。
9.下列哪种方法适合植物种子全蛋白质含量测定?
∙ A.茚三酮反应
∙ B.凯氏定氮
∙ C.Folin-酚法
∙ D.双缩脲反应
(分数:1.00)
A.
B. √
C.
D.
解析:[考点] 不溶性蛋白质的含量测定。 [解析] 种子蛋白有的可溶于水,有的不溶。凯氏定氮法是通过测定全氮量,然后根据蛋白质含氮比例16%,粗略计算蛋白质含量的。除了凯氏定氮法,其他三种均用于可溶性蛋白质的定量分析。
10.利用葡聚糖凝胶过滤分离蛋白质过程中,柱填料中出现许多气泡______。
∙ A.将提高分离效果和分离速度
∙ B.将提高分离效果
∙ C.将降低分离效果
∙ D.表明柱填料不干净,蛋白质有可能已经发酵
(分数:1.00)
A.
B.
C. √
D.
解析:[考点] 凝胶过滤技术。 [解析] 一个合格的葡聚糖凝胶柱床,不应该出现气泡、分层、裂缝等,它们的出现会降低蛋白质分离效果。干燥葡聚糖在溶胀处理过程中如果吸水不充分很容易出现气泡。装柱过程出现干燥也会导致气泡产生。
11.利用密度梯度分离蛋白质时常用______作为离心介质。
∙ A.蔗糖
∙ B.NaCl
∙ C.氯化铯
∙ D.硫酸铵
(分数:1.00)
A. √
B.
C.
D.
解析:[考点] 密度梯度离心介质。 [解析] 离心介质必须满足两个基本条件:一是具有化学性质稳定性,不会影响蛋白质结构和性质;二是能形成比较稳定的密度梯度,且黏度合适,在一定离心力场下,允许密度不同的蛋白质颗粒以不同速度下沉。蔗糖密度很适合蛋白质密度梯度离心分离,此外,还有聚蔗糖(商品名称为Ficoll)或其他合成材料。NaCl和硫酸铵溶解度大,易扩散,无法形成比较稳定的密度梯度。氯化铯适合作为核酸超离心密度梯度介质。
12.下述哪些方法不能用于蛋白质浓缩?
∙ A.硫铵沉淀
∙ B.超滤
∙ C.透析
∙ D.聚乙二醇法
(分数:1.00)
A.
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D.
解析:[考点] 蛋白质浓缩技术。 [解析] 蛋白质稀溶液可以浓缩,常见技术有:超滤、硫酸铵盐析、聚乙二醇法、冷冻干燥法等。透析是根据分子大小、利用半透膜选择性除去某些小分子物质的技术。蛋白质溶液透析后往往浓度降低。
13.鉴定溶液中微量抗原的有效方法是______。
∙ A.免疫荧光标记
∙ B.免疫金标
∙ C.酶联免疫吸附测定
∙ D.紫外分光光度计
(分数:1.00)
A.
B.
C. √
D.
解析:[考点] 酶联免疫吸附测定技术。 [解析] 酶联免疫吸附测定借助抗体反应和酶反应,能更有效地鉴定溶液中的微量抗原。免疫荧光标记和免疫金标适合细胞中目标蛋白质的标记和显微观察;紫外分光光度计测定蛋白质浓度,结果是粗略的,因为其原理建立在芳香族氨基酸残基在“280nm”处有特征吸收的基础上。
14.______在变性牛胰核糖核酸酶(天然蛋白含有4对二硫键)的复性中更有效。
∙ A.高浓度β-巯基乙醇
∙ B.微量β-巯基乙醇
∙ C.高浓度盐酸胍
∙ D.微量盐酸胍
(分数:1.00)
A.
B. √
C.
D.
解析:[考点] 蛋白质复性。 [解析] 变性蛋白质原则上能复性,但需要一定条件。牛胰核糖核酸酶为单条多肽链,分子中有4个二硫键。在变性剂和巯基乙醇存在下,该酶所有的二硫键发生断裂,形成8个巯基。对这样的酶进行复性时,需要残留微量巯基乙醇。其原因是:8个巯基相互之间可形成105种二硫键组合形式,但只有一种是具有完全活性的天然形式;在复性的反应系统中保持微量巯基乙醇,可以为错配的二硫键提供纠错机会,最终形成稳定的天然构象。
15.______可以在蛋白质水平鉴定生物组织器官的基因表达水平。
∙ A.Western blot
∙ B.Southern blot
∙ C.PCR
∙ D.Northern blot
(分数:1.00)
A. √
B.
C.
D.
解析:[考点] 蛋白质免疫印迹技术。 [解析] Western blot,即蛋白质免疫印迹技术,可在蛋白质水平鉴定基因表达水平。Southern blot用于分析DNA;Northern blot用于分析RNA;PCR是聚合酶链式反应,用于基因扩增。
16.______蛋白质胶体溶液不稳定。
∙ A.溶液pH大于蛋白质pI时
∙ B.溶液pH小于蛋白质pI时
∙ C.溶液pH等于蛋白质pI时
∙ D.A和B
(分数:1.00)
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A.
B.
C. √
通讯中断 D.
解析:[考点] 蛋白质溶液稳定性与蛋白质等电点的关系。 [解析] 蛋白质溶液属于胶体溶液。
胶体溶液中的蛋白质分子具有一定的稳定性,一般不会发生聚集而形成沉淀,这是因为:①蛋白质分子表面有许多极性基团,可以吸附水分子,迫使水分子在蛋白质分子表面形成一个连续的水化层,从而阻止蛋白质分子彼此靠近、形成沉淀;②在pH值远离蛋白质pI的溶液中,同种蛋白质分子带有同种电荷,这会增加分子间的彼此排斥,进一步阻止蛋白质发生聚集。如果破坏了蛋白质胶体颗粒的水化层或者使蛋白质溶液处于等电点pH,蛋白质胶体稳定性下降,蛋白质容易发生沉淀。
17.蛋白质处于等电点时______。
∙ A.溶解度最小
∙ B.胶体稳定性增加
∙ C.整个分子所带净电荷增加
∙ D.整个分子所带净电荷不变
(分数:1.00)
A. √
B.
C.
D.
解析:[考点] 蛋白质等电点与溶解度的关系。 [解析] 蛋白质在等电点时溶解度最小。
18.蛋白质胶体溶液呈现稳定性,源于______。
∙ A.蛋白质分子内部的疏水氨基酸残基
∙ B.蛋白质分子表面的水化层
∙ C.蛋白质分子表面的双电层
∙ D.B,C
(分数:1.00)
A.
B.
C.
D. √
解析:[考点] 蛋白质胶体稳定性。 [解析] 正是由于蛋白质分子内部疏水性氨基酸残基的相互聚集,才使得大部分亲水性氨基酸残基位于分子表面而使蛋白质分子出现水化层。在含有低浓度盐离子的蛋白质溶液中,蛋白质分子会出现明显的双电层,从而增加蛋白质稳定性。