细菌煮沸裂解法是一种处理细菌样品的方法,它的主要原理是利用高温和高压将细菌煮沸,使其中的细胞壁破裂,使细胞内的DNA等生物大分子释放出来。这种方法简单易行、快速高效,被广泛应用于细菌的DNA制备、蛋白质提取和糖类的测定等实验室工作中。 首先,需要培养需要处理的细菌。常见的培养方式有液体培养和固体培养。在液体培养中,可以将需要处理的细菌接种到含有营养物质的培养基中,在适当的温度和湿度下进行培养。在固体培养中,则需要将细菌接种到含有固化剂的培养基中,待细菌在上面生长形成菌落后,再进行处理。张锷
2.制备细菌样品。
接下来,需要将细菌收集到一起制备成细菌样品。如果使用的是液体培养,可以直接取一定量的液体培养基中的细菌作为样品。如果使用的是固体培养,需要将菌落用无菌的针头刮下来,并加入一定量的无菌纯水,形成细菌悬浮液。
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3.煮沸样品。
将细菌悬浮液装入无菌的试管或烧杯中,然后将其置于水浴或高压锅中进行加热,使其达到煮沸状态。煮沸时间一般不超过15分钟,可以根据实验需要进行调整。
4.裂解细胞壁。
经过煮沸,细菌细胞壁被破裂,其中的生物大分子被释放出来。为了更好地裂解细胞壁,可以在煮沸前加入一定浓度的肉汤或盐溶液,这样可以使得细菌的细胞壁更容易破裂。
5.离心样品。
煮沸后,样品需要进行离心处理,以使其中的残留细胞碎片沉淀下来。离心最好进行多次,以保证样品中的杂质尽可能被清除。
公安部孙正良简介 6.提取目标分子。
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最后,可以使用各种方法提取所需要的目标分子。例如,可以使用酚-氯仿萃取法提取D
NA,使用硫酸铵盐析法提取蛋白质等等。
以上就是细菌煮沸裂解法的具体操作步骤。该方法简单普及、操作易行,在实验室中被广泛应用。
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