流式细胞术分析比较癌症患者新鲜和冻存复苏后外周血淋巴细胞亚的实验研究作者：魏天雪 于鸿 何春莹 刘玉侠来源：《中国现代医生》2015年第29期 [摘要租借法案] 目的 建立标准化的实验和分析方法，采用流式细胞术比较分析癌症患者新鲜和冻存复苏后的外周血淋巴细胞亚的差异。 方法netspy>中国防痨协会 于2014年6～12月收集肺恶性肿瘤患者静脉血样本（2 mL/岷山之夜样本），每个样本取300 μL全血用于淋巴细胞亚分析；剩余全血经裂解红细胞后冻存 （40%或90%胎牛血清）。30 d后复苏细胞，流式细胞术分析淋巴细胞亚变化。 结果 复苏并培养24 h后，癌症患者PBMC的存活率分别为（67.70±2.80）%（90% FCS） 和（80.47±3.32）% （40% FCS，P=0.0069）。新鲜和冻存的的外周血六龄童章宗义CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD16+56+、CD3+CD16+56+和CD4+CD25+ T细胞的百分率之间无显著差异（P>0.05，n=8，40%FCS）。 结论 短期冻存癌症患者的PBMC可用于后续检测T淋巴细胞亚，尤其对于晚期癌症患者而言，可避免多次采血造成的负担同时提高实验的一致性。此外，本实验建立的方法也可用于临床抗肿瘤免疫和其他免疫监测。
[关键词] PBMC；细胞冻存和复苏；淋巴细胞亚；流式细胞术
[中图分类号] R329.2；R697.3 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2015）29-0029-03
Comparative analysis of lymphocyte subsets between fresh and frozen cancer patients PBMC by flow cytometry
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