绝对计数分析
周丽达， 姚怡婷， 杭 晨， 谭美玉， 孙寒晓， 盛慧明
（上海市同仁医院 上海交通大学医学院附属同仁医院检验科，上海 200050）
关键词：淋巴细胞亚绝对计数；流式细胞术；传染性单核细胞增多症；儿童
作者简介：周丽达，女，1987年生，学士，主管技师，主要从事分子生物学检验工作。通信作者：盛慧明，E-mail ：。
文章编号：1673-8640（2021）05-0572-02 中图分类号：R446.1 文献标志码：B DOI ：10.3969/j.issn.1673-8640.2021.05.023
传染性单核细胞增多症（i n f e c t i o u s mononucleosis ，IM ）是EB 病毒（Epstein-Barr virus ，EBV ）感染导致的一种急性传染性疾病，好发于儿童和青少年。IM 主要依据临床症状（发热、咽峡炎、皮疹和淋巴结、肝、脾肿大）和实验室检查[外周血异型淋巴细胞>10%、聚合酶链反应（polymerase chain reaction ，PCR ）检测咽部分泌物EBV DNA 阳性、血清特异性EBV IgM 阳性]确诊[1-2]。由于IM 症状 、体征的多样化和临床上不典型病例的逐渐增多，IM 的误诊率较高。本研究采用流式细胞术对外周血淋巴细胞亚进行绝对计数辅助诊断1 例IM 患儿，现报道如下。1 病例资料
患儿，男，7岁，无明显诱因发热伴咽痛，至上海市同仁医院就诊。门诊查体：体温38.9 ℃，白细胞（white blood cell ，WBC ）计数11.23×109/L ，中性粒细胞百分比（the percentage of neutrophil ，NEUT%）19.4%，淋巴细胞百分比（the percentage of lymphocyte ，LYMPH%） 63.8%，C 反应蛋白（C-reactive protein ，CRP ）9.73 mg/L 。临床拟诊“急性化脓性扁桃体炎”，予头孢呋辛静脉滴注抗感染，右旋布洛芬口服退热，病情无好转，仍有反复发热，为进一步，以“急性化脓性扁桃体炎？”收治入院。2 体格检查、实验室检查结果及预后
入院查体：体温38 ℃；见双侧颈部及多个肿大淋巴结，其中左侧最大约2 cm ×2 cm ，无压痛；咽部黏膜充血，扁桃体Ⅱ度肿大，见白渗出；肝肋下1.5 cm ，脾未及肿大。
由于患儿入院前抗感染无效，且肝肿大
不符合“急性化脓性扁桃体炎”的表现。怀疑病毒感染，患儿“发热、淋巴结肿大、肝肿大”三大临床体征提示IM ，因此对患儿进一步完善相关实验室检查。血常规：WBC 计数11.28×109/L ， NEUT% 14.8%，LYMPH% 69.7%，淋巴细胞绝对数（the absolute value of lymphocyte ，LYMPH#）7.9×109/L 。EBV 抗体检测：EBV 衣壳抗原（viral capsid antigen ，VCA ）-IgM 抗体 10.43 AU/mL
（+）。外周血细胞形态学检查：异常淋巴细胞12%。T 淋巴细胞亚：CD4+细胞百分比13.1%（降低，参考区间为28.2%～62.8%），CD8+细胞百分比69.6%（升高，参考区间为10.2%～40.1%），CD4+细胞绝对计数1 067个/μL （正常，参考区间为441～2 156个/μL ），CD8+细胞绝对计数5 685个/μL （升高，参考区间为125～1 312个/μL ）。排除其他异常，根据患儿临床症状，结合实验室检查（EBV VCA-IgM 抗体阳性，异常淋巴细胞12%）确诊为IM 。更换方案，给予阿昔洛韦静脉滴注抗病毒，停用抗菌药物。10 d 后复查相关实验室指标。血常规：WBC 计数5.79×109/L ，NEUT% 21.9%，LYMPH% 67.7%，LYMPH# 4.0×109/L 。外周血细胞形态学检查：异常淋巴细胞1%。T 淋巴细胞亚：CD4+细胞百分比19.2%（降低），CD8+细胞百分比56.0%（升高），CD4+细胞绝对计数 849 个/μL （正常），CD8+细胞绝对计数 2 481个/μL （升高）。患儿临床症状和体征均明显好转，扁桃体渗出消失，淋巴结、肝、脾肿大缩小，予带药出院，嘱门诊随访复查。本例患儿急性期（发病第3～5天）、恢复期（发病约15 d ）及正常儿童CD8+细胞流式散点图[4]见图1。
57320215365 注：（a ）正常儿童；（b ）本例患儿急性期；（c ）本例患儿恢复期。
图1 本例患儿急性期（发病第3～5天）、恢复期（发病约15 d ）及正常儿童CD8+细胞的流式散点图
（a ）（b ）
（c ）
3 讨论
有研究结果显示，外周血淋巴细胞亚对评估IM 患儿的免疫功能状况、疾病的诊断以及疾病严重程度均有重要的临床价值[3]。本研究采用FACS Canto Ⅱ流式细胞仪（美国BD 公司）及配套FACSDiva 软件检测IM 患儿的外周血淋巴细胞亚，首次检测时患儿处于疾病急性期，CD3+细胞比例增加，提示机体细胞免疫系统被激活。当EBV 侵入人体后，B 细胞首先被感染，激发T 细胞出现强烈的免疫应答反应。具有细胞毒性作用的CD8+细胞大量增殖，以清除被EBV 感染的B 细胞，因此CD8+细胞百分比和绝对计数均升高；CD4+细胞百分比降低，但绝对计数并无明显改变，提示CD4+细胞百分比降低可能是由CD8+细胞的大量增殖导致的。本例患儿急性期和恢复期CD8+细胞数量均明显高于正常儿童，且急性期CD8+细胞数量显著增多；在恢复期，CD8+细胞百分比及数量均降低，且数量的下降程度较百分比明显。因此，CD8+细胞绝对计数对IM 疗效监测的价值更大。CD8+细胞数量下降提示体内失衡的免疫功能正在逐渐逆转，但尚未恢复正常，因此淋巴细胞亚绝对计数对IM 有一定的诊断价值。
IM 是儿科常见的感染性疾病，一般由EBV 感染引起。由于IM 患儿症状、体征的多样化和不典型病例的存在，易被误诊。目前，诊断IM 的实验室指标特异性不尽如人意。嗜异性抗体对IM 的诊断有重要价值，但由于儿童的免疫系统发育尚不完善，且疾病初发时抗体滴度较低，存在假阴性的可能；采用PCR 检测咽部分泌物EBV DNA 的特异性可达98%，但由于采样时患儿的依从性较差，因此受采样因素影响较大，存在假阴性的可能，且检测成本较高，限制了其在临床上的普
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及。外周血异常淋巴细胞检测是目前诊断IM 常用的方法，但外周血异常淋巴细胞的出现时间和持续时间均不固定，且其他病毒如巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等感染也可引起外周血异常淋巴细胞增多，在检测时还存在人工镜检的误差，因此外周血异常淋巴细胞检查的特异性较低[5]。本例患儿在恢复期复查时，虽然外周血异常淋巴细胞已降至1%，但从CD8+细胞绝对计数结果可以看出，患儿的免疫系统并未完全恢复正常。因此，在IM 病情动态监测方面，淋巴细胞亚检测的临床价值优于外周血异常淋巴细胞检查。
综上所述，临床可通过监测外周血淋巴细胞亚绝对计数的变化，结合临床体征及其他实验室检查结果，快速诊断IM ，还可为评估患儿机体的免疫状态提供参考。由于本例患儿只进行了2次淋巴细胞亚检测，未持续监测，且患儿出院后也未随访，因此外周血淋巴细胞亚检测在IM 过程中的变化及在预后评估中的作用还有待进一步研究。玩具滑翔机制作
参考文献
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（收稿日期：2020-01-28）
（本文编辑：龚晓霖）
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