3.1 产品规格及其划分说明
250ml/瓶、500ml/瓶、
3.2 性能指标
3.2.1 外观
乳光或微乳光液体。
水土保持监测3.2.2 澄清度
比重1.077 – 1.080 g/mL
3.2.3 pH值（每升标示量/L）
pH要求为7.1～7.3，允许偏差范围为±企业家天地0.30。
3.2.4 渗透压/（m0sm/kgH2O）
渗透压为280～340 m0sm/kgH2O
3.2.5 细菌内毒素/（EU/ml）
﹤0.5
3.2.6 无菌检查
3.2.6.1 细菌数
不得检出
3.2.6.2霉菌数
不得检出
3.2.7 细胞分离实验
3.2.7.1 细胞形态
正常。
3.2.7.2细胞分离数量及存活率
数量：90%-95%；存活率：95%-98%
3.2.8 安全性检验项目
抗生素：不得检出。
3.3 检验方法
3.3.1外观检测方法
肉眼观察为乳光或微乳光液体
3.3.2 澄清度的测定
按中华人民共和国药典2010年版二部附录Ⅸ B进行。
3.3.3 pH值的测定
按中华人民共和国药典2010年版二部附录Ⅵ H进行。
3.3.4 渗透压的测定
按中华人民共和国药典2010年版二部附录Ⅸ G进行。
取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的5℅。
3.3.5 细菌内毒素的测定
按中华人民共和国药典2010drifts年版二部附录Ⅺ E细菌内毒素检查法中的凝胶法进行。
3.3.6 无菌检查
按中华人民共和国药典2010年版二部附录Ⅺ H无菌检查法进行，检查项目为细菌数、霉菌数。检测法采用平皿法。
3.3.7 人周边血淋巴细胞分离计数及存活率检测实验 3.3.7.1 人周边血细胞分离实验
3.3.7.1.1方法提要
1）本实验所用容器具及溶液均为无菌，实验操作过程均为无菌操作。
2）分离外周血，并计数分离所得细胞及细胞存活率
3.3.7.1.2 实验试剂和材料
1）人外周血：新鲜血5ml(加肝素抗凝20u/ml)
2）分离液：本产品样品
3）1640无血清培养液
4）10%NCS
5）3%冰醋酸
6）台盼蓝染细胞存活率检测试剂盒
3.3.7.1.3 仪器
1）医用超级洁净工作台：洁净级别为百级。
2）二氧化碳恒温培养箱：能通二氧化碳气体并且保持二氧化碳体积分数为（5±正交多项式0.1）℅，能在（37±1）℃恒温。
3）细胞培养瓶：T25型、无菌。
4）玻璃试管
5）血球计数板
6）盖玻片：无水乙醇浸泡并擦干。
7）水平离心机
3.3.7.1.4 实验步骤
1）分离人周血淋巴细胞
A 新鲜血（肝素抗凝20u/ml）＋1640（无血清）培养液按照1：1 稀释
B 在10ml玻璃试管中预先加入淋巴细胞分离液，使分离液：1640：新鲜血=1:1:1(最好用玻璃试管，分离液的量可以增加些 ）
C 小心的将稀释后的血液加到分离液的上面，开始的加入一定一定要慢，要尽量的贴近液面加。
D 离心：
转速 ：1500/分
温度：20℃－28℃
时间：20分钟
（注意：不要刹车，这个很重要，不然由于急剧的减速度，会把已经分离的单个核细胞 层又弄混了，加速度也最好不要太大)
E取出试管，看看是不是分为好几层,顺次为血浆---单个核细胞淋巴细胞层－－分离液－－红细胞
F用毛吸管吸取上面的血浆层，注意无菌，保存好，备用
G用毛吸管，吸出单个核细胞层（白白的那一层），重悬于（2—5倍体积的不完全培养液
中）
H离心。 转速：2000－2300r/min （转速一定要提高，不然淋巴细胞很难与分离液分开)
时间：10分钟
温度：4℃
I震荡后，用培养液重悬至1ml
J 取100ul重悬液放于96孔板中留着计数用，然后将剩余细胞悬液在离心机上离心
2）计数细胞：计数细胞用的细胞计数板的结构是四个角有4个大正方形，每个正方形有16个小正方形解子征竹粉.
a. 取96板中的细胞悬液10ul，用3％冰醋酸稀释到原来的4倍（这样既能溶解红细胞，又保证细胞浓度不是很大，方便计数）
b. 从上面的稀释悬液中取9ul于细胞计数板上，开始计数细胞
c.计数原则：对于压线的细胞，只说左边的和上边的。总共数4大正方形
d.计算细胞浓度：4大格细胞的平均数x 104 x 4 得到的就是细胞的浓度
e 细胞总数是：细胞浓度x1ml
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议