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ＤＯＩ：１０．１６０９６／Ｊ．ｃｎｋｉ．ｎｍｇｙｘｚｚ．２０２０．５２．１０．０１８
流式细胞术的应用
应用型英语冯睿婷，赵继智
（郑州人民医院，河南郑州 ４５０００３）
［摘要］目的 分析血清Ｔ淋巴细胞亚检测流式细胞术在中的应用价值。方法 选取２０１８年１２月至２０１９年６月于本院就诊并被确诊为的４８例患者作为观察组，并纳入１０例健康受试者为对照组。采用流式细胞术测定两组血清Ｔ淋巴细胞亚指标。比较两组及观察组间不同结核菌性质、病变累及肺野范围Ｔ淋巴细胞亚指标。结果 相比对照组，观察组的ＣＤ８＋较高，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋值较低，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；两组ＣＤ３＋、ＣＤ４＋差异不明显，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；观察组阳性结核菌患者与阴性结核菌患者的各项Ｔ淋巴细胞亚指标，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；＞３肺野患者ＣＤ３＋低于≤３肺野的患者，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论 流式细胞术应用于患者血清Ｔ淋巴细胞亚检测中，对病情及预后具有良好的预测价值。
［关键词］；Ｔ淋巴细胞亚；流式细胞术
［中图分类号］Ｒ５２１ ［文献标识码］Ｂ ［论文编号］１００４－０９５１（２０２０）１０－１１９０－０２
多数携带者一生将会处于稳定的潜伏感染状态，不会发展为活动性结核。因其在接触结核分枝杆菌后可通过自身免疫系统清除或控制细菌发展，故Ｔ淋巴细胞免疫应答在结核分枝杆菌的清除与
控制中起着决定性作用［１］。加强Ｔ淋巴细胞亚检测，对加快推动的与为研究提供理论依据及深入了解患者疾病发生、发展的免疫机制具有重要意义［２］。流失细胞术是通过快速多参数分析与分选处于液流中的细胞和各种其他微粒，来分析细胞及其他特异标志性质的一种技术，是近年来研究生理免疫机理的强有力手段［３］。本研究分析血清Ｔ淋巴细胞亚检测流式细胞术在中的应用价值。现报道如下。
１ 资料与方法
１．１ 一般资料 选取２０１８年１２月至２０１９年６月于本院就诊并被确诊为的４８例患者作为观察组，其中男性３２例，女性１６例；年龄２３～４５岁，平均年龄（３４．５１±３．８４）岁；结核菌性质：阴性１８例，阳性３０例；病变累及肺野范围：≤３肺野２８例，＞３肺野２０例，另外选取１０例健康受试者作为对照组，其中男性７例，女性３例；年龄２４～４８岁，平均年龄（３５．１４±３．９７）岁。对照组性别年龄相比观察组均衡性良好（Ｐ＞０．０５），可对比。研究已经院内医学伦理委员会批准。
１．２ 方法 取患者外周血８ ｍｌ于抗凝真空采血管中，离心２０ ｍｉｎ，取血清，于８ ｈ内处理，血清保存过程中温度不得超过３７℃。处理时要先分离外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ），取１００μｌ全血加入１０μｌ抗体，避光孵育２０ ｍｉｎ，先后加入５００μｌ溶血素与稀释液，分
别避光１０ ｍｉｎ，２ ｈ内上机。采用流式细胞分析仪（型号：ＬＳＲ Ｆｏｒｔｅｓｓａ，厂商：ＢＤ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ａｍｅｒｉｃａｎ），调节电压参数ＦＳＣ与ＳＳＣ，使目标细胞于适当位置，调节通道电压，保持适中的通道激光强度范围，获取细胞样本，每个样本细胞数量约５０万。
１．３ 观察指标 观察所有患者血清Ｔ淋巴细胞亚计数，数据分析采用ＣＸＰ软件，包括ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋，计算ＣＤ４＋／ＣＤ８＋。并将细胞计数与对照组、结核菌性质、病变累及肺野范围三种分类进行比较。
１．４ 统计学方法 采用ＳＰＳＳ ２３．０软件进行数据处理，计量资料以（珚ｘ±ｓ）表示，两组间比较均采用内蒙古医学杂志Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ｍｅｄ Ｊ ２０２０年第５２卷第１０期
浙江同志网非参数ｔ检验，Ｐ＜０．０５为差异具有统计学意义。２ 结 果
２．１ 两组Ｔ淋巴细胞亚比较 相比对照组，观察组的ＣＤ８＋明显较高，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋值明显较低，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；两组ＣＤ３＋、ＣＤ４＋差异不明显，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。见表１。２．２ 结核菌性质 观察组阳性结核菌患者与阴性结核菌患者的各项Ｔ淋巴细胞亚指标，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。见表２。
２．３ 病变累及肺野范围 ＞３肺野患者ＣＤ３＋低于≤３肺野的患者，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。见表３。
表１ 两组Ｔ淋巴细胞亚比较（珚ｘ±ｓ）
组 别ｎ ＣＤ３＋（％）ＣＤ４＋（％）ＣＤ８＋（％）ＣＤ４＋／ＣＤ８＋对照组１０ ６９．６２±１７．６２ ４０．６３±５．１８ ２４．６９±３．５８ １．８５±０．１５观察组３８ ６５．５９±２２．３６ ３９．４９±６．４５ ３０．３６±５．４４ １．４３±０．１２ｔ值０．５３５ ０．５２４ ３．１４５ ９．６４２
Ｐ值０．５９５ ０．６０３ ０．００３ ０．０００
表２ 两组核菌性质Ｔ淋巴细胞亚指标比较（珚ｘ±ｓ）
延安颂片尾曲组 别ｎ ＣＤ３＋（％）ＣＤ４＋（％）ＣＤ８＋（％）ＣＤ４＋／ＣＤ８＋阳性１８ ６４．４９±１５．１２ ３９．６２±７．１６ ３１．１７±３．４８ １．４１±０．４１阴性３０ ６６．６３±１４．３９ ３８．４５±６．５１ ３０．５４±３．５１ １．３６±０．５１ｔ值０．４９０ ０．５８１ ０．６０４ ０．３５３
Ｐ值０．６２７ ０．５６４ ０．５４９ ０．７２６
表３ 两组病变累及肺野范围Ｔ淋巴细胞亚指标比较（珚ｘ±ｓ）
组 别ｎ ＣＤ３＋（％）ＣＤ４＋（％）ＣＤ８＋（％）ＣＤ４＋／ＣＤ８＋≤３肺野２８ ７２．６８±１０．７８ ３８．２１±３．２１ ３０．８９±４．２５ １．４１±０．３９＞３肺野２０ ６３．３４±８．０２ ３９．８０±３．２６ ３１．６２±４．３９ １．３６±０．４０ｔ值３．４２８ １．６４５ ０．５６４ ０．４２３
Ｐ值０．００１ ０．１０７ ０．５７５ ０．６７４
３ 讨 论
流式细胞仪作为近年来新型研究成果，可对流液中的细胞及其他生物离子进行多参数分析分选，具有精度高、速度快、准确性高等优势［５］。的发生、发展与机体免疫功能有着密切关系。已有大量研究表明，患者的外周血ＣＤ８＋细胞水平会呈较高水平，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋值会较低［６］。为进一步证实，本研究以健康受试者作为对照组，观察Ｔ淋巴细胞亚情况，研究结果可得知，相比对照组，观察组的ＣＤ８＋明显较高，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋值明显较低，分析原因在于患者疾病还处于初期，因此对免疫细胞的损伤还不严重，但随病情严重，结核杆菌不断增殖，便会破坏机
体免疫状态，使其下降［７］。比较两组患者结核菌性质发现，两组患者均存在免疫功能降低的情况，说明无论患者是阳性结核菌还是阴性结核菌，均会影响到机体免疫功能。比较病变累及肺野范围后发现，＞３肺野患者的ＣＤ３＋显低于≤３肺野的患者，说明随病情发展，免疫细胞水平也会随之降低，发生更显著性变化。因此，结核菌的发生、发展与Ｔ淋巴细胞亚水平高低有着重要关系，这为后期评估患者病情及预后提供了理论依据。
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［收稿日期］２０２０－０６－１５
内蒙古医学杂志Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ｍｅｄ Ｊ ２０２０年第５２卷第１０期
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