ation,migraUon and iuvvsion by targeting TRAF5iu colorectal
caucegj].BiochemBiopyys Res Commun,2212,510(5)：799-
7050
[12]CHEN QY,DES MARAIS T,COSTA M.Dereaulatiov of SATB0
iu carciuoyexesis with emppasis on miRNA-mediated control
[J].Caniuoyexesis,258,45(3)：596-450.
[07]PATEL Y,SONI M,AWGULEWITSCH A,et al.OverexpresUon of
miU-489derails mamma/hierarchy structure and indibits
HER2/kex-induced tumo/gexesis[J].Odcoyexe,228,38
(3):245-453.
[13]ZHAO T,QIC B,ZHOU S,et al.Expression of DEK iu paucreatic
cauces and Us correlation with clinicopatSoloyicai features and
proyuosis[J]■8Caucer,2219,15(4)：910-909.[12]WEN Y,XU HN,PRIEETTE VIENEDGE L,et al.Optical ndop
imaging detects the effects of DEK oncoyexe kuochkoou on the
redop state of MDA-MB-050breast cauces cells[J].Mol Ima
ging BUU258,20(3)：412-48.
[22]LIE L,PIAO J GAO W,et al.DEK oves expression as as inde-
pexdext biomarkes for poos proyuosis iu colorectal cauces[J].
BMC Cauces,2513,13：367.
[20]李景阳，孙丽梅，徐慧，等・DEK蛋白在非小细胞肺癌中的表 达及临床意义[J]现代肿瘤医学,2512,20(20)：3556-
35590
LI JY,SUN LM,XU H,et al.The clinical WgmUcadce of DEK
proteiu expression iu uon-small cell lung cauces[J]•MoVeru
Odcology,2212,24(20)：3556-3559.(编校：张西敏)
干扰NBS1表达抑制肝癌HepG2细胞增殖并促进凋亡 肖瑞雪1，魏飞力2，徐忠法1，甄亚男1
InteCering NBS1expression匚血巾匚恰proliferation and promotes apoptosis of livet cancer HepG2cello
XIKO Ruixue1,WEI FeiU,XU Zhongfu1,ZHEN Yansu1
1Thr Thirg J^filiated Hospitai of Shandong First Medicai Universito(Affiliated Hospital ep ShanOong Acalema of Medical Sciences P, ShanOong Jinan250031,China；1Beijing Huhe op Henatolopa,Beijing Youan Hospital,Capital Medical Unwersito,Beijing100067, China.
【Abstrvct i Objective:To invesUgato the ekect of NBS1knochdown oo yrollra/od and apoptosis of HepG2ceks.
Methodt：NBS1specific small interference RNA(siNBSl)was transfected into HepG2cells,performed using Lipc-
fectamine2000,with empty liposome as coowO grovp■The expressioo of NBS1was detected by RT-PCR and West
ern blot.The HepG2cell yrolifera/od was detected bs CCK-8methoV,and cell apoptosis was analyzed bs using
FCM.R csu U s:DiRerent codcekWatiods of siNBS1(10nmol/P,20nmol/L,50nmol/P)conlU indibit the expression of
NBS1gene at mRNA level in HepG2cells(P<0.05or P<0.01)■The highest codcekWa/od of UNBS1(50nmol/L)
conlU significantly indibit the expression of NSB)pntein.CCK-8assas demodsWateX that the yrolifera/od of HepG2
cells in siNBSl grovp transfected with diNerent codcekWatiods of siNBSl was lowec than that of the coowO grovp(P<
0.05or P<0.01), and the yrolifera/od rate decreased most significantly aftec44h of Wansfectioo.FCM revealed that
the apoptosis rate increased significantly aftec Wansfectioo(P<0.05or P<0.01),and was related to the concenWa-
tioo.Conclusion:1ndibikod of NBS1gene expression can significantly inhibit the yrolifera/od and promote apoptosis
of HepG2ceks.
【Key words】NBS1,RNA interference,HepG2ceks,cek pndfen/od,cek apoptosis
MoVern Oncoloyy2021,29(11):1859-1871【摘要】目的：探讨干扰NBS1基因表达对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响。方法：应用Lipofectamine2000 【收稿日期】2222-57-50
【修回日期】2525-57-05
【基金项目】山东省医学科学院院级科技计划面上项目(编号：2513-56)；山东省医学科学院医药卫生科技创新工程
【作者单位】1山东第一医科大学第三附属医院(山东省医学科学院附属医院)，山东济南250550
5首都医科大学附属北京佑安医院北京市肝病研究所，北京8562
【作者简介】肖瑞雪(884-)女，山东齐河人，硕士，主管技师，主要从事病理学及组织胚胎学研究。E-m/i：yi/cmue2612@127•cm
【通讯作者】甄亚男(837-)，男，山东齐河人，博士，副主任医师，主要从事消化道肿瘤基础与临床研究。E-mail：yrzhexyanas@122
将NBS1特异性小干扰RNA（siNBS1）转染至肝癌细胞HepG2中，以空载脂质体作为对照组。采用RT-PCR 及Western blot法检测NBS1基因表达情况，采用CCK-3法检测转染质粒后WNBS1对HepG2细胞增殖能力的影响，采用流式细胞术检测WNBS1对HepG2细胞凋亡的影响。结果：不同浓度siNBS1（14nmol/L、22 nmol/L、52nmol/L）均能抑制HepG2细胞中的NBS1基因在mRNA水平上的表达（P<2.25或P<2.21）°最高浓度WNBS1（54nmol/L）能抑制NSB1蛋白产物的表达水平（P<4.05）°CCK-3实验显示，转染不同浓度wNBS1的HepG2细胞与对照组相比，细胞活力明显减弱
（P<2.25或P<2.2）），转染48h后增殖率下降最为显著；流式细胞检测结果显示，细胞凋亡的比率在转染后明显升高（P<0.25或P<2.21），并随浓度增加而更为显著。结论：干扰NBS1基因的表达可以明显抑制HepG2细胞的增殖，并促进癌细胞凋亡。
【关键词】NBS1；RNA干扰;HepG2细胞；细胞增殖；细胞凋亡
【中图分类号】R735.7【文献标识码】A DOS：12.3969/j.iwu1672-4796.5261.71.406
【文章编号】1672-4796-（2221）11-1857-25
肝细胞肝癌（hepamcellulcr camiuompHCC）是我国常见的消化道恶性肿瘤之一，其死亡率居所有恶性肿瘤的第6位⑴°常见的手段包括手术切除、肝移植、介入栓塞、化疗、放疗及免疫等，但大多数HCC患者确诊时已处于中晚期，总体效果较差J]°在精准诊疗的时代下，需要更有效的早期诊断、辅助及复发监测手段，以提高HCC的诊疗效果。
当诸多因素如：慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）感染、黄曲霉毒素、酒精损害、药物性中毒等有害因素作用于机体时，就会引起正常肝细胞的DNA损伤，其中DNA 的双链断裂（douUle straok breaks,DSBs）最为严重。正常情况下，机体可及时进行损伤的修复，如果损伤不能得到及时的修复,DSBs的累积就有可能导致HCC的发生。作为一种 关键的DNA修复基因,NBS1在维持端粒及基
因组稳定和防止细胞癌变中起重要作用J]°研究发现，相比于正常肝脏组织,NBS1基因在HCC组织中呈高表达，且其表达水平与HCC的恶性程度正相关⑷°本实验将应用siRNA技术沉默HepG2细胞中的NBS1基因，探讨其对HepG2细胞增殖及凋 亡的影响。
1材料与方法
H主要材料
人源肝癌细胞系HepG2（上海中国科学院细胞培养中心）；anti-NBS1抗体（美国CST公司）；anti-B-actin（加拿大Ferme/tas公司）；NBS1兔单克隆抗体（美国Abeam公司）；抗兔二抗（美国Abeam公司）；胎牛血清（浙江天杭生物 科技有限公司）；DMEM培养液（美国Hyclone公司）；PBS（美国 Hyclone公司）；Invitmge/Lipofectamiue™2200（美国Thermo FisPer Scie/ti/e公司），细胞裂解液（北京博迈德生物技术有限公司）；BCA蛋白浓度测定试剂盒（北京博迈德生物技术有限公司）；CCK-3检测试剂盒（南京建成生物技术有限公司）；流式细胞Anuexiu-V/7-AAD双染试剂盒（上海翊圣生物技术股份有限公司）;NBS1siRNA及其阴性对照（德国QIGEN公司合成）°
132实验方法
13.3细胞培养用DMEM培养基培养HepG2细胞，细胞培养箱内条件为温度37t，饱和湿度95%,5%CO6，
等细胞生长至融合度达到82%以上时，应用2.25%胰蛋白酶消化，更换培养基，按照5 3进行传代。
13.2质粒转染取对数期HepG2细胞接种于6孔板内，培养过夜，待细胞密度达到34%~54%后，将细胞分成对照组（HepG2-NC组）和实验组（HepG2-WNBS1组），其中实验组包括高浓度组（54nmO/L）、中浓度组（20nmol/L）及低浓度组（12nmol/L）°将各组质粒分别与Lipofectamine TM 2002、OPTI-MEM混合，于室温静置22min后，逐滴加入板内，不断混匀,6h后换液,24~48h后收集细胞进行实验。1.2.3RT-PCR法检测NBS1mRNA表达水平根据试剂盒说明进行操作。分别提取转染24h及48h后的HepG2细胞总RNA，反转录合成cDNA，定量PCR检测，采用ABI Prism7500SDS Software分析，应用6-AACT方法得到相关数据结果，对其相对定量分析，然后选择GAPDH作为内参，标准化处理全部的样本基因表达量。
1.23蛋白印迹法检测NBS1在HepG2细胞中的表达
使用RNA裂解液提取细胞总蛋白，牛碳酸酐酶（BCA）测定蛋白浓度，以B-actiu作为内参，行SDS-PAGE电泳，将蛋 白转移至PVDF膜上后，1%的牛血清蛋白封闭6h，分别加一抗、二抗孵育,ECL显影。
1.2.5CCK-8法检测转染质粒后对HepG2细胞增殖能力的影响取对数生长期的各组转染细胞，制备成细胞密度为6.5x124/mL的悬液，分别取52pL接种到96孔细胞培 养板中海组设5个复孔。分别在2h、24h
、48h、72h加入CCK-8试剂14pL每孔，置入含5%CO、37t细胞培养箱中继续培养2.5h，用酶标仪测定各孔在454nm处光密度即OD1c，绘制细胞增殖曲线。
1.2.6流式细胞法检测细胞凋亡收集转染后48h的细胞培养基，用不含EDTA的胰酶消化细胞，制备成细胞悬液°4 t1200r/min离心5min，弃上清，冷PBS洗涤细胞2次，加入140pL1x Binking Buffer重悬细胞，加入5pL Anuexiu-V-PE和5p L7-AAD，轻轻混匀，避光，室温反应15min°加入440pL1X Binking Buffer，混匀后440目的筛网筛选，1h内检测样品。重复3次。
133统计学方法
采用SPSS26.2软件进行统计分析，计量资料以（士S 表示，两样本均数间采用独立样本t检验，多组间比较采用Oue way ANOVA分析，组间两两比较采用LSD法，CCK-8检测结果采用两因素方差分析,P<2.25示差异有统计学意义。2结果
2.1siRNA干扰NBS1基因表达的效果评价
以空载脂质体作为对照，不同浓度WNBS1（14nmol/L, 20nmol/L、52nmol/L）均能抑制HepG2细胞中的NBS1基因在mRNA水平上的表达（P<2.25或P v OD，图1）°当转染48h时，高浓度WNBS）（52nmol/L）能够显著抑制NSB1蛋白产物的表达水平（P<0.25），见图6°
UOTSSW-IdxwISStN
图0 不同浓度URBS0均能抑制HepG2细胞中NBS1基因mRNA 表达
Fig. 4 DiRerext coucexWatWus of siRBSl coulU indibit the mRNA ex
pression of NBS0 gexe iu HepG2 cells
* P <6. 75 , * * P <6. 70.
2.2 siRNA 干扰NBS1抑制HepG2细胞增殖
如图3所示，与对照组相比，转染不同浓度/NBS1后, HepG2细胞增殖能力均明显减弱(P < 0. 05或P <0.01 ) 在转染24 h 后,HepG2细胞增殖率即有所降低，但与未转染 时相比，差异无明显统计学意义(P>0.05)；随着转染时间推 移,HepG2细胞增殖率也随之明显下降。当转染UNBS1的
浓度为50 nmol/P ，时间在48 h 时,HepG2细胞增殖率下降差 异有显著统计学意义(P<0. 01)；当转染77 h,WNBS1的浓 度为20 nmol/P 及54 nmol/P 时,HepG2细胞增殖率较转染 48 h 时继续略有下降，而转染UNBS1的浓度为10 nmol/P 时,72 h 较48 h 细胞增殖率略有上升，但仍比未转染时(0 h ) 显著降低。
1.2 r P-actin
NBS1Control
10 nmol/L 20 nmol/L 50 nmol/L
尸<0.05
UOISSaldx
aJ K O
4
u g o l d
I S m
N 1.2n 1.0
0.80.60.4
化学成分0.2-o,o-
T
T
图3Fng03Control 10 nmol/L 20 nmol/L 50 nmol/L
1.0
0.8
0.6
0.40.2
—lOnmol/L —a — 20 nmol/L
50 nmol/L
Oh 24h 48 h 72h
不同浓度URBS0对HepG2细胞增殖的抑制作用
Indibitorg effect of ddferext coucexUatUus of siRBSl on the pre
lim r aUon of HepG2 cells
* P <0005 ** P <00010
图0转染48 h 时高浓度WRBSO(56 umO/L)能够显著抑制HepG2
细胞中NBS0蛋白表达
Fig. 0 Ater 48 h of transfection , high coucexWatWn of siRBSl (56 umol/
L) coulU inhibit the expression of NBS0 proteiu iu HepG2 cells
2・3 siRNA 干扰NBS1促进HepG2细胞凋亡
如图4所示，与对照组相比，转染48 h 时,HepG2细胞凋 亡的比率在8 nmol/P 低浓度UNBS1转染后即有明显升高
(P<0.05)，随浓度增加细胞凋亡更加明显(P<0.01)o河南金蝉养殖
Blank.001siRNA-low.002
Control lOnmol/L
20 nmol/L 50 nmol/L
图4 作用48 h 时不同浓度URBS0对细胞凋亡的影响及柱状图分析
Fig. 0 EEects of dikerext codcedWaUous of siRBSl on apoptosis at 48 h and histoyram analysis
* P <6. 75 , * * P <6.
20,
3讨论
DSBs的修复主要通过同源重组(homOoovpcon biua-tiou,HR)及非同源末端连接(uou-homologons e/k-joining, NHEJ)两种途径来完成J]°NBS1基因在DSBs的识别及通过HR和NHEJ途径修复DSBs J]、细胞周期节点的检查、基因组稳定性的维持等方面都起着至关重要的作用J]°作为DNA修复相关基因,NBS1基因首先在奈梅亨断裂综合征，又称Nijmege/断裂综合征(Nijmege/breakage synkmme,NBS)患者中鉴定得到。NBS是一种罕见的常染体隐性遗传病，患者存在先天性免疫缺陷，细胞对电离辐射非常敏感，常表现出染体脆性增高和细胞周期检控点调控异常等特征，极易患多种肿瘤J「4°
NBS1基因定位于人类8号染体长臂2区1带上 (8q61)，序列长度约52kb，包括16个外显子，编码NBS1蛋白(p95)J7，又叫做NibPd或NBN o NBS1蛋白分子量大小约为95kD，由754个氨基酸构成，包含3大结构域:N端(含有1~196个氨基酸)、中间区域(675~343个氨基酸)和C 端(665~693个氨基酸)J5°NBS1蛋白是MRE-RAD54-NBS1(MRN)复合物的组成部分，该复合物在DSBs修复过程 中起重要作用°它在NHEJ修复中作为DNA损伤的传感器，可以在HR修复时参与DNA修复和S期内细胞周期检查，作为ATM激酶调节剂，并直接与位于DSBs周围的磷酸化组蛋白H6AX相结合，以保持基因组的稳定性并防止细胞进行端粒融合J2°动物实验研究结果表明，NBS1基因的突 变可引起小鼠肝癌的发生“」。目前已发现NBS1的多个单核苷酸多态性(single yucleoSbe polymorphism,7NP)位点分别与乳腺癌〔"“3、前列腺癌[9、喉癌[4]2结直肠癌皿」、肺癌[6]等易感性相关。作者团队的前期实验J6]证实了NBS1基因的rsl805774C/G SNP突变与HBV相关HCC的易感性密切相关(P=2.99xl2T,0R=).3))o
在本实验中，我们首先利用不同浓度的WNNA(14nmol/ L、20nmol/L、52nmol/L)干扰NBS1基因在HepG2细胞中的表达，然后在转染后特定时间点(24h、48h)分别检测NBS1基因在mRNA水平和蛋白水平的表达，以确定干扰效果最佳的浓度和时间。结果显示当转染48h，浓度为52nmol/L的siNBS1能够显著抑制NBS1蛋白产物的表达水平(P<0.25)，效果最佳。分别采用CCK-8实验和流式细胞技术分析在转染不同浓度的wNBS1后HepG2细胞的增殖和凋亡情况。结果表明，与对照组相比，转染后HepG2细胞增殖能力明显减弱而细胞凋亡比率明显增加(P<0.25或P<0.21)°在转染48h后，细胞增殖率
扬州杀人案迅速下降，且当wNBS1浓度为54 nmol/L的时候增殖率下降差异有显著统计学意义。同样地，我们用不同浓度的WNBS1转染HepG2细胞48h后观察细胞凋亡情况，结果显示，当应用高浓度siNNA(54nmol/L)干扰NBS1基因表达时,HepG2细胞凋亡率增加最为明显(P< 2.21)°通过实验表明，54nmol/L的WNBS1为干扰HepG2中NBS1基因表达的最佳浓度,48h为最佳转染时间，这将作为指导后续细胞功能实验的重要依据。同时实验结果证实，干扰NBS1基因的表达可以抑制HepG2细胞的增殖并诱导细胞凋亡。
NBS1被证实在许多肿瘤中呈高表达状态：研究人员采用免疫组化染法检测了81例晚期头颈部鳞癌患者NBS1基因表达的情况，结果显示45%患者的肿瘤组织内NBS1蛋白呈高表达状态，且可以作为预后不良的独立预测因素J1]°通过进一步深入研究发现,NBS1过表达可引起SuaO蛋白水平的上调，从而诱导肿瘤细胞的上皮间质转化(epitSelial mese/chymal traosidou,EMT)进程，进一步促进癌细胞的转移及扩散。HCC患者中也有同样的研究：56例HCC患者中，免疫组化结果显示,26例患者肿瘤组织中NBS1蛋白高表达，其表达水平与HCC肿瘤细胞恶性程度呈正相关J]，并且 NBS1过表达可以诱导肿瘤细胞增殖、促进DNA生物合成并参与调控细胞转化。
综合本实验的结果，干扰NBS1基因的表达可以抑制HepG2细胞的增殖并诱导细胞凋亡,NBS1基因的过表达有促进癌细胞增殖、抑制凋亡的作用。此表象显示,NBS1基因似乎发挥着“促癌基因”的作用，但这与NBS1基因参与DSBs 修复、维持基因组稳定、抑制细胞癌变等作用相矛盾。众所周知，作为明
星“抑癌基因”，p53基因在维持基因组稳定性上具有重要作用，其蛋白产物控制着细胞周期的启动，通路异常被认为是肿瘤形成早期最重要的事件之一。但在所有恶性肿瘤中,52%以上会发生y53基因的突变，而突变往往致使其表达量异常增加J6]，使得研究者最初误认为P53是一种原癌基因。随着研究的深入发现，突变型P53蛋白常比 野生型y53蛋白拥有着更长的半衰期，致使体细胞中检测到大量已突变的p53蛋白而非正常野生型的p53蛋白，同时，随着P53基因的突变，其空间构象等多方面发生改变，使其 失去了对正常细胞生长、凋亡和DNA修复的调控作用,y53 基因随之由抑癌基因转变为促癌基因。另外，某些肿瘤中P53基因虽未发生突变，但细胞内大部分y53蛋白活性已受到各种方式的抑制。类似地，肿瘤细胞中可能检测出大量已突变的NBS1蛋白，与野生型NBS1蛋白相比，这些突变型蛋白通常表现为无功能或只保留部分NBS1正常功能，致使DNA损伤的修复难以完成°
既往也有关于NBS1基因突变导致编码蛋白发生变化的相关研究。NBS1基因第657位点处5个碱基的缺失突变(657015)可以使其蛋白产物变为两个截短蛋白，分子量由 95kD分别变为26kD和70kD，其杂合子突变往往可以导致许多肿瘤的发生J2O另一个常见的突变为NBS1511位点的腺苷酸突变成为鸟苷酸(A/G)，该突变为错义突变，使得 第171位的异亮氨酸变成缬氨酸，造成NBS1蛋白BRCT1功能结构域无法正常地结合损伤DNA并修复。另外还有一种 广泛存在的NBS1突变形式为SNP突变，笔者团队在前期实验中也证明了NBS1的/-805774C/G多态性在HBV感染者中可增加患HCC的风险J c]，该SNP突变为非错义突变，未导致编码氨基酸的改变。多种突变都可导致NBS1蛋白的异常表达导致DNA损伤
无法及时修复。NBS1功能改变同样可通过影响下游信号通路进而引起细胞的癌变。例如NBS1的功能失活可以导致细胞核内MRE11/Rad52/NBS1( MRN)复合体和ATM激活受到抑制J4]，靶蛋白磷酸化水平下降，从而导致DNA修复识别、细胞周期监控点监测和细胞凋亡信号传导通路的缺陷，最终导致肿瘤的发生和发展。总之, NBS1基因突变、功能失活及蛋白表达异常,NBS1调控癌细胞生物学行为具有复杂性和多样性的特点，作用机制尚需进一步深入研究。
【参考文献】
J]CHEN WQ,ZHENG RS,BAADE PD,e t af Caxces sta/skcs io Chiyc,4215[J].CA Caxcer J C/u,4219,96(0)：115-134. [4]MAK LY,CRUZ-RAMON V,CHINCHILLA-LOPEZ P,et aX
Global epibemiologp,prevedtiou；and managemext of hepatocellulcs 01'00°11^[]].Am Soo C/u Oxch Edao Boob,2213,32:264-479.
[3]SYEDA,TAICERJA.ThcMREll-RAD52-NBS5complex cou-
dacts the of damage signaling and ouSomes to stress kt DNA rep/ca/ox and repair[J] ■Anxa Rev BAchem,2213,37：223-294.
[4]STICGELE J,BELLELLI R,BOULTON SJ.Mechanisms of DNA-
proteiu crosslink repair[J].Nat Rev Mol Cell Biol,2257,13(9): 573-573.
[5]WANG Y,HUANG J.MhecPcs altera/ox of NBS5gexe and tu-
morgexePst J].MoUem Oxcol,2215,45(9)：/105-0159.
[6]FRi m C SOLOV-OV IA.ActSatSu of the DNA-repais mecha
nism Srouph NBS5and MRE15diRusiou[J] ■PLob Compat Biol, 221324(7)：cl906390.
[7]WICLICMS GJ,LEES-MICLER SP,TAICER JA.Mrell-RaX55-
Nbs)coxformahoxs and the coxtrol of sexsing.signaling.and effect os respoxses at DNA douPle-strand breaks[J] ■DNA Repais, 2212,9(14)：1299-1306.
[3]MACICJCZYK M,MIKOLUC B,PICTRUCHA B,et af Oxidative
stress,aPnormahhes and anhoxibaxt hefexse io ataxia-
telangiectasia.bloom sypdrome and nijmeqe)breakage sypdrome [J].Redox BioX2255,15：373-333.
[9]HASBAOUI BE,ELYAJOURC A,ABICKASSEM R,et af Nijmegex
breakage sypdromc:case vpo V and review of literature[J].Pax Aft Med J222225：35.
[19]WOLSKA-KUSNICRZ B,GREGOREK H,CHRZANOWSKA K,
et aX Nijmeqe)breakage sypXromc:Clinical and immuaological
features,lcug-term ouSome and treatmext optioxs-a retrospee-
tive analysis[J]■3C/u Immuxol,2215,33(6)：539-549. [15]KOMATSU K.NBS5and multiple requ/hoxs of DNA damage re
spouse[J].3Rafict Res,2216,57(P)：il5-i57.
[14]BOSSO G,CICRESSA F,MORONI ML,et af NBS5interacts with
HP5to exsure gexome integrity[J]■Cell Death Dis,2219,12
(12)：955.
[15]DURONJONES V,FRAPPART P,TONG W,et aX Nbx heterozp-
超市品类管理gosity readers mice susceptible to tumos formahou and ioxizing ra-
diatiou-induced Smohgexesis)J]■Caxces Res；2223,63(45):
7223-7269.
[14]WU Z,WANG P,S ONG C,et aX EvaXahou of miRNA-binding-site
长春工业大学学报SNPs of MRE15A,NBS5,RAD55and RAD54ixvo/ed io HRR
pathwap gexes and P s P of breast caxces io China]J].Mol Gexet
GexomAs,2215,229(3)：1145-1153.
[15]NIHYA P,CHANDRA SEKAR A.NBN gexe ana/Ps and/P
impact ox breast caxcep J].3Med SyW,2219,43(3)：472. [12]RUSAK B,KLUZNICK W,WOKOLORCZYKV D,et af1ndePted
NBN mutahous and prostate caxces Psk and survivalf J]■Caxces
Res Treat,2212,55(3)：l/2-1137.
[57]HUX,LIAO J ZHAO H,et aX NBS5v0733393po/momhism h
associated with ax ixcmased Psk of/ryngeal cavixomc[J].BMC
€3X01,2213,13(5)：575.
[13]LI JJ,ZHONG BY,XU HH,et aX AwciaPous betweex NBS5
polymomPhms and colorectal caxces io Chixese pouulatiou[J]■
PLob Oyc,2215,19(5)：e2134334.
[19]MICICA VI,BAKANOVA ML,SOBOLEVA OA,et aX Po/mos-
phisms io DNA repais gexes io luag caxces patiexts living io a
coal-mining reqiox[J].Ear J Cancer Pvv,2219,28(6)：522-
523.
[22]ZHEN Y,XIAO R,CHEN X,et al.A xox-sypoxymoas po/mos-
pPism io NBS5is associated wiS progressiox from chrouie hepati
tis B virus infectiou to hepaScellu/r camixoma io a Chixese pop-
uXhou[J]■OxcotargeW Thes,2213,15：373-579.
[25]SAITO Y,FUJIMOTO H,KOBAYASHI J.Role of NBS5io DNA
damage resyouse and its reXPoxsPip with caxces deveXpmegt
[J]■Transl Caxces Res,2213,2(3)：573-139.财经界
[22]WANG X,LYU W,QI F,et aX Clinical effects of p53overexpres-
siou io syuamoas cell camixoma of the sixoeasal tract[J]■Medi-
0x2625756(12)
[23]BIAN L,MENG Y,ZHANG M,et aX MRE15-RAD57-NBS5
complex alterahous and DNA damage resyouse:implicahous for
caxces SeatsexS J].Molece/r Caxces,2919,13(5):169.
[H]PENNISI R,ANTOCCIA A,LEONE S,-af HpP/a requ/tes
ATM and NBN fuxctioxs io sexsing and repair of DNA douPle-
strand breafs[J].FEBS]2257,234(15)：0373-2395.
(编校：张西敏)
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