植物总多酚含量测定方法
福林酚试剂氧化多酚中-OH基团并使其显蓝，蓝的深浅与多酚的含量成正相关，没食子 酸一般在该方法中被默认为标准物质，采用没食子酸溶液制作标准曲线，然后将多酚含量表 示为等价没食子酸的量，即可求得待测样品中总多酚含量。 二．实验仪器：分光光度计片基
三．实验试剂
试剂一：酚试剂25mL×1瓶
试剂二：显液 200mL ×1瓶
试剂三：1.0mg/mL没食子酸标准溶液 20mL×1瓶和时间赛跑教学设计
四．溶液配制
试剂一使用液：
将试剂用双蒸水10×稀释，制备成酚应用液，每次测试需使用 2.5mL，根据样品数量计算好，用多少配制多少。
例：需要进行38次测试，则可配制40次使用量：40×2.5mL=100mL，量取10mL试剂一加入90mL双蒸水，充分混匀即可。
试剂三使用液：
分别采用移液管移取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL试剂三于100mL容量瓶中，采用双蒸水定容至刻度，摇匀，制成浓度分别为10，20，30，40，50μg/mL的没食子酸应用液。
习惯用使用移液器的老师也可先在15mL离心管中分别加入9.9，9.8，9.7，9.6，9.5mL双蒸水，再采用移液器分别移取100，200，300，400，500 μL 试剂三于相应的离心管中，充分颠倒混匀，制成浓度分别为10，20，30，40，50μg/mL的没食子酸应用液。
五．实验步骤
（1）分别取2.5ml试剂一使用液于标准管和测定管中，在测定管中加入0.5ml样品溶液，再
取0.5ml试剂三使用液于标准管中，分别将标准管和测定管中的溶液混合均匀，室温静置5
分钟，使两个管中的溶液充分反应。2012年四川高考作文
（2）分别在静置后的标准管和测定管中加入2ml试剂二，充分混匀，室温静置60min，使用
1cm光径比皿，765nm处采用分光光度计测定吸光度。
1．必须做标准管，以绘制标准曲线；
2．步骤（1）中室温静置3-8分钟均可，但标准管和所有测定管反应时间应保持一致；
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3．步骤（2）中若加入试剂二后样品颜较深，可做对照管，对照管将试剂二改为双蒸水；4．步骤（2）中室温静置最短40min，建议60min以保证反应充分。
带锈防锈剂1.绘制标准曲线
以没食子酸应用液浓度0，10，20，30，40，50μg/mL为横坐标，以分光光度计测得的吸光值为纵坐标，在坐标纸上或利用EXCEL绘制标准曲线。
2.计算样品浓度
对于坐标纸上绘制的标准曲线，请直接根据坐标求得样品浓度。
对于采用EXCEL计算的，根据方程求得样品浓度。
样品浓度表示为μg/mL没食子酸，或μg/mL gallic acid equivalent (GAE) 。也可根据测试溶液浓度计算出样品粉末中含量，表示为mg/g GAE。
资本主义生产方式七．注意事项
1.一些植物提取物中多酚含量很高，建议首先摸索稀释倍数，若测定数值超出标准曲线线性范围，则不可采纳该读数。应将样品稀释后重新测定；
2. 各管反应时间尽量保持一致，因此不建议一次性测试过多样品；
3. 试剂三应用液应现配现用，不可久放。
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