植物抗氧化性的测量通过对POD和抗坏血酸含量的变化来证明。
1、抗氧化酶的提取:分别取0.1 g实验材料→加入少许石英砂和3 ml提取液(50mmol/L PBS, pH6.0,内含0.1mmol/ LEDTA, 1%PVP) → 充分研磨 →转入离心管中→用2 ml提取液洗研钵→ 5000 rpm离心10 min →上清液定容至装备指挥技术学院5 ml →用于测定POD和PPO酶活性或分装后转至-20或-80℃保存。 2、POD测定:取POD反应混合液(10 cielab
mmol/L愈创木酚,5 mmol/L H2O2,用PBS溶解)2.95 ml简单的延时电路,加入酶液50 ml(空白调零用PBS取代),立即记时,摇匀,读出反应2 min时的A470。 3、PPO测定:取southern杂交PPO反应混合液( 20 mmol/L邻苯二酚,用PBS溶解)2.9 ml,加入酶液0.1 ml(空白调零用PBS取代),立即记时,摇匀,读出反应 2 min时的A410。
以每分钟A值变化0.01所需要的酶液的量为一个活力单位(U),则:
4、计算
• ASA车险信息共享平台的提取:分别取0.1 g实验组和对照组的胚芽鞘→加入3 mL 5%三(TCA)和少许石英砂→充分研磨→用2 mL 5% TCA洗研钵→药品分类 5000 rpm离心10 min →上清液定容至5 mL。
• 测定:上清液各0.8 mL (空白用5% TCA代替) → 分别加入0.8 mL 0.15 M NaH2PO4 (pH=7.4) 和蒸馏水→ 摇匀 → 分别加入 0.8 mL 5% TCA、44%磷酸和4%联吡啶 → 摇匀 → 加入3%FeCl3 0.8 mL → 37 ℃ 15 min → 测定A525
通过对实验得到的数据分析。得出结果。