浅析红细胞凝集抑制试验的影响因素

浅析红细胞凝集抑制试验的影响因素
作者:胡燕玲 高习文
通州二中来源:《现代畜牧科技》2018年第08
        摘要:在兽用生物制品特别是兽用疫苗产品检验过程中,红细胞凝集抑制试验在禽灭活疫苗效力检验和禽抗体效价测定中应用广泛,是一个非常基础的常规的试验。但是在试验操作中由于其影响因素较多,很容易造成试验结果的偏差,对检验结果造成影响,因此就红细胞凝集抑制试验的影响因素进行分析,给疫苗检验操作人员提供参考,以减少弯路。
        关键词:红细胞凝集抑制试验;影响因素;兽用生物制品
        中图分类号:S852.5
        文献标识码:B
        文章编号:2095-9737201808-0014-01
        红细胞凝集抑制试验(火柴算式HI)的原理为鸡红细胞表面存在受体,而某些病毒如鸡新城疫病
毒等能与鸡红细胞表面受体结合而产生凝集现象,称为红细胞凝集(HA),而当这种病毒与相应的特异性抗体相结合后,这种凝集现象则被抑制,称为红细胞凝集抑制试验。试验依据:中国兽药典(2015年版)三部附录3404。根据经验,有以下几个主要影响因素需要检验人员在试验中注意。
        1 试剂及器材
        整个实验过程中均应按照兽药典要求使用PBSO.l mol/L六合芳草地pH 7.0—7.2,下同),而不是生理盐水,因PBS缓冲能力较好,实验结果较为稳定。
        操作过程中使用的器材有:50孔反应板、96孔反应板、移液器、头、平皿或移液槽等。
        移液器应选用品牌的单道或多道移液器,配套使用品牌移液器头,若头不配套则加液量可能不准,影响实验结果。使用过程中应严格按照移液器说明书要求使用,使用后应旋至最大刻度处保存,并定期校验,合格方可使用。头应一次性使用,不能清洗后再重复使用。反应板、平皿或移液槽等均应清洁,使用后应立即清洗干净。若条件允许可选
用一次性使用反应板或器皿,一次性使用。对于重复使用的50孔或熔体过滤器96孔反应板,应在试验操作结束后立即清洗。清洗方法为:弃去液体(弃人含有消毒液的盆或桶中),用纯化水冲洗各孔,用75%景竣海酒精棉球擦拭各孔,然后用纯化水冲洗干净,烘干或自然晾干后备用。注意用棉球擦拭反应板时,应避免刮伤反应孔。对于初学者建议使用空气弹簧50孔板进行试验,反应结果观察更为清晰准确,易判定。

本文发布于:2024-09-22 15:31:44,感谢您对本站的认可!

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