生物技术制药课后习题
by ×× Yuan
1、生物技术制药分为哪些类型？
生物技术制药分为四大类：
（1）应用重组DNA技术(包括基因工程技术、蛋白质工程技术)制造的基因重组多肽，蛋白质类剂。 （2）基因药物，如基因剂，基因疫苗，反义药物和核酶等
（3）来自动物、植物和微生物的天然生物药物
（4）合成与部分合成的生物药物
2、生物技术制药具有什么特征？
（1）分子结构复杂
（2）具有种属特异性
（3）针对性强，疗效高
（4）稳定性差
（5）基因稳定性
（6）免疫原性
（7）体内的半衰期短
（8）受体效应
（9）多效性
（10）检验的特殊性
3、生物技术制药中有哪些应用？
应用主要有：
（1）基因工程制药：包括基因工程药物品种的开发，基因工程疫苗，基因工程抗体，基因诊断与基因，应用基因工程技术建立新药的筛选模型，应用基因工程技术改良菌种，产生新的微生物药物，基因工程技术在改进药物生产工艺中的应用，利用转基因动植物生产蛋白质类药物
（2）细胞工程制药：包括单克隆抗体，动物细胞培养，植物细胞培养生产次生代谢产物
（3）酶工程制药
（4）发酵工程制药
4、基因工程药物制造的主要程序有哪些？
基因工程药物制造的主要步骤有：
目的基因的克隆，构造DNA重组体，构造工程菌，目的基因的表达，外源基因表达产物的分离纯化产品的检验
5、影响目的的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些？
（1）外源基因的计量
（2）外源基因的表达效率：
a、启动子的强弱
b、核糖体的结合位点
the scarlet letter
c、SD序列和起始密码的间距
d、密码子组成
（3）表达产物的稳定性
（4）细胞的代谢付荷
（5）工程菌的培养条件
6、质粒不稳定分为哪两类，如何解决质粒不稳定性？园林通
质粒不稳定分为分裂分为分裂不稳定和结构不稳定。质粒的分裂不稳定是指工程菌分裂时出现一定比例不含质粒的子代菌的现象；质粒的结构不稳定是DNA从质粒上丢失或碱基重排，缺失所致工程菌性能的改变。
提高质粒稳定性的方法如下：
（1）选择合适的宿主细菌
（2）选择合适的载体
（3）选择压力
（4）分阶段控制培养
（5）控制培养条件
（6）固定化
7、影响基因工程菌发酵的因素有哪些？如何控制发酵的各种参数？
影响因素：
（1）培养基
（2）接种量
（3）温度
（4）溶解氧
（5）诱导时机的影响
（6）诱导表达程序
（7） PH值
坪上人论坛8、什么是高密度发酵？影响高密度发酵的因素有哪些？可采取哪些方法来实现高密度发酵？
高密度发酵：是指培养液中工程菌的菌体浓度在50gDCW/L以上，理论上的最高值可达200
遐迩贯珍gDCW/L
影响因素：（1）培养基（2）溶氧浓度（3）PH（4）温度（5）代谢副产物
实现高密度发酵的方法：
（1）改进发酵条件：a、培养基 b、建立流加式培养基 c、提高供养能力
（2）构建出产乙酸能力低的工程菌宿主菌：a、阻断乙酸产生的主要途径 b、对碳代谢流进行分流 c、限制进入糖酵解途径的碳代谢流 d、引入血红蛋白基因
（3）构建蛋白水解酶活力低的工程化宿主菌
9、分离纯化常用的谱分离方法有哪些?它们的原理是什么?
方法有离子交换谱、疏水谱、反相谱、亲和谱、凝胶过滤谱及高压液相谱。
（1）离子交换谱IEC：是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换
剂
上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。
（2）疏水层析HIC：是利用蛋白质表面的疏水区与固定相上疏水性基团相互作用力的差异，对蛋白质组进行分离的层析方法。
（3）亲和层析AC：是利用固定化配体与目的蛋白质之间的非常特异的生物亲和力进行吸附，这种结合既是特异的，又是可逆的，改变条件可以使这种结合解除。
（4）凝胶过滤层析：以多孔性凝胶填料为固定相，按分子大小对溶液中各组分进行分离
的液相层析方法。
10、对由基因重组技术所获得的蛋白质药物进行鉴定时，常做哪些项目分析？
基因工程药物质量控制主要包括以下几点：产品的鉴别，纯度，活性，安全性，稳定性和一致性
项目分析主要有：（1）生物活性测定（2）理化性质鉴定（3）蛋白质含量鉴定（4）蛋白质纯度分析（5）杂志检测（6）稳定性考察（7）产品一致性的保证
11、离体培养的动物细胞分为哪些类型?
分为三类：
（1）贴壁细胞：细胞生长必须有可以贴附的支持物表面，细胞依靠自身分泌的培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长增殖。
（2）悬浮细胞：细胞的生长不依赖支持物表面，可在培养液中悬浮状态生长（3）兼性贴壁细胞：既可贴附于支持物表面生长，又在悬浮生长。
12、生产用的动物细胞有哪些种类？它们各有什么特点？
废液焚烧炉13、常用的培养动物细胞的培养基的种类有哪些？
（1）天然培养基
（2）合成培养基
（3）无血清培养基
14、如何进行动物细胞大规模培养？
大规模培养的方法：
（1）悬浮细胞
（2）贴壁细胞
（3）贴壁—悬浮细胞：a、微载体培养 b、包埋和微囊培养 c、结团培养
大规模培养的操作方式：
（1）分批式操作
（2）半连续式操作
（3）灌流式操作
15、动物细胞生物反应器必须具备哪些基本要求？有哪些类型？特定是什么？
动物细胞反应器具备的基本要求：
（1）制造生物反应器所采用的一切材料，尤其是与培养基，细胞直接接触的材料，对细胞必须是无毒性的。
（2）生物反应器的结构必须使之具有良好的传质、传热和混合的性能
（3）密封性良好，可避免一切外采的不需要的微生物污染。
（4）对培养基环境中多种物理化学参数能自动检测和调节控制，控制的精度高，而且能保持环境质量的均一。
（5）可长期连续运转，这对于培养动物细胞的生物反应器显得尤其重要。
华都饭店（6）容器加工制造时要求内面光滑，无死角，以减少细胞或微生物的沉积。
（7）拆装，连结和清洁方便，能耐高压蒸汽消毒，便于操作维修
（8）设备成本尽可能低。
反应器类型及特点：
（1）搅拌罐式生物反应器：主要用于是悬浮细胞培养，微载体培养，微囊和巨载体培养以及结团培养
（2）气升式生物反应器：气体通过装在罐底的喷管进入反应器的导流管，致使该部液体的密度小于导流管外部的液体形成循环流。
（3）中空纤维式生物反应器：占地空间小，产品产量、质量高，生产成本低，不能重复使用，不能耐高压蒸汽灭菌，需用环氧乙烷或其它消毒剂灭菌，难以取样检测。
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