透析袋使用说明

透析使用说明
自Thomas Graham1861年发明透析方法至今已有一百多年。透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中,除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。
1技术指标
MWCO(截留分子量),单位:Diatoms。
服务质量
父亲的脊梁透析时,小于MWCO的分子在透析膜二边溶液浓度差产生的扩散压作用下渗过透析膜,其速度与浓度梯度、膜面积及温度成正比。欲快速透析可采用直径较小的透析袋以增加膜面积。常用温度:4℃,升温、更换袋外透析液或用磁力搅拌器,均能提高透析速度。
2使用须知
某些化学物质会破坏透析袋微孔且不可逆转。计有:烃、卤化烃、醇、酮、酯、胺、丙酮、、二氧杂环乙烷、环已烷等。酸(甲酸、乙酸、稀强酸如5%HCI),10%苯酚,30%双氧水。甲醇、乙醇:浓度小于5%时,透析功能在,而MWCO变化。
2.1前处理
为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。化学反应工程原理
2.1.1方法一
将透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。在NaHCO3-EDTA处理液中煮沸10min后用蒸馏水彻底清洗干净,然后在EDTA处理液煮沸10min。冷却后,置于30%乙醇中,放于4℃冰箱,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。使用前戴手套取用透析袋并用蒸馏水将透析袋内外清洗干净。[1]
2.2.2方法二
中国国际石油化工联合有限责任公司将透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段,沸水煮5至10分钟,再用蒸馏[1]乙二胺四乙酸二钠(EDTA)0.2mol/L储备液
邪玉
称取7.4448g乙二胺四乙酸二钠,少量蒸馏水溶解,转至100mL容量瓶中,摇匀并定容。
EDTA处理液(1mmol/L pH8.0)
取2.5mL EDTA储备液,加蒸馏水并用1mol/LNaOH调节pH为8.0,定容至500mL。
NaHCO3-EDTA处理液
称取4.0g碳酸氢钠至200mLEDTA处理液中,配制成(2%)NaHCO3-(pH值8.01mmol/L)EDTA处理液。
水洗净,即可使用。
2.2.3方法三
先用50%乙醇煮沸1小时,再依次用50%乙醇、0.01mol/L碳酸氢钠和1 mmol/L EDTA(pH=8.0)溶液洗涤,最后用蒸馏水冲洗即可使用。
2.2使用方法
使用时,一端用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用特制的透析袋夹夹紧,由另一端灌满水,用手指稍加压,检查不漏,方可装入待透析液,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加50%是正常的。为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
2.3透析袋保存
(1)用生理盐水浸泡以去掉蛋白,并用蒸馏水清洗干净,然后置于50%乙醇中保存即可。
(2)用完以后,要彻底洗干净,透析袋也可以保存在0.1%叠氮钠(可防止微生物生长)里;0.05%-0.1%叠氮钠,或者1mmol/L EDTA,或者50%甘油中4度保存(前2种方法更佳)
(3)使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水或者30%乙醇中,确保透析袋始终浸没在溶液内。若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。
2.4检查透析效果的方法
用1%BaCl2检查(NH4)2SO4,用1%AgNO3检查NaCl、KCl等。
梁挠度即用型透析袋毋须前处理,使用前用蒸馏水洗净即可。
使用时须戴手套。

本文发布于:2024-09-25 19:20:21,感谢您对本站的认可!

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