实验十五
磨损率
一实验目的
1.了解脂质体(liposome)在细胞
工程技术中的应用及其制备方法。
和冻融法三种不同的方法制备脂
质体的方法并了解该技术在细胞
工程中的应用。
二实验原理
脂质体(liposome)的制备技术,一般采用超声波法、振荡法、乙醚蒸发法、去污剂透析法、冰
冻干燥法和冻融法等。制备方法
不同,所得脂质体结构、大小不
同,性质和用途也就不同(表15-1)。
种类制备方法大小(m)特性
多层大脂质体(MLV)乙醚蒸发法、醇醚水
中小学资产管理系统
法、振荡法、液相快
速混合振荡法
全森林唱歌大奖赛0.1~50易制备,包被物释放
速度慢
单层小脂质体(SUV)直接超声波法、溶剂
超声波法、乙醚注射
法
0.02~0.05体积小,适合包被离
微弱信号检测
单层大脂质体(LUV)递相蒸发法、去污剂
(胆酸纳等)透析法、
冰冻干燥法
0.05~0.5 适合包被蛋白质、
RNA、DNA片段、
大分子药物及细胞融
合
单层巨大脂质体(GUV)冻融法5~30适合包被蛋白质、
RNA、DNA片段,
除菌处理较难
本实验采用超声波法、冻融法、冰冻干燥
法三种不同类型的方法,超声波法的原理是:在超声波作用下,磷脂类双亲媒性分子被打碎为分子或分子团,并自动重新排布成类似生物膜的双分子层囊泡。冻融法是在超声波法形成的小脂质体基础上,通过冷冻和融解过程使其破裂,重组为大体积脂质体,在通过透析时膜内外渗透压的变化而膨胀为更大体积的脂质体。冰冻干燥法语原理与冻融法基本一致,只在处理条件上有所不同。
蓝宝石4830三实验用品
1.器材
超声波清洗机、光学显微镜、荧光显微镜、荧光分光光度计、漩涡混合器、核酸蛋白检测仪、柱层析装置、冰冻干燥机。
2.试剂
1)磷脂液:100mg经丙酮-乙醚法纯化的卵磷
脂,57.2mg胆固醇,溶于1ml氯仿。
2)荧光液:钙黄绿素(calcein)47mg溶于
100ml Tris缓冲液。2020班公湖互殴八小时
3)Tris 缓冲液:称取Tris 0.12g,EDTA
0.288mg,溶于80ml去离子水中,用0.1 mol/L
盐酸调Ph7.2,再加水至100ml。